TAILIEUCHUNG - Hoàn thiện quy trình sản xuất enzyme Taq DNA polymerase ở quy mô phòng thí nghiệm

Enzyme chịu nhiệt Thermus aquaticus DNA polymerase (Taq pol) là một thành phần quan trọng trong phản ứng khuếch đại gen (PCR). Trong nghiên cứu này, plasmid pAKTaq chứa gen mã hóa Taq pol được biến nạp thành công vào vi khuẩn E. coli BL21. | Hoàn thiện quy trình sản xuất enzyme Taq DNA polymerase ở quy mô phòng thí nghiệm Tạp chí Khoa học Công nghệ và Thực phẩm 19 (2) (2019) 31-37 HOÀN THIỆN QUY TRÌNH SẢN XUẤT ENZYME TAQ DNA POLYMERASE Ở QUY MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM Hồ Viết Thế*, Nguyễn Minh Phương, Ngô Thị Kim Anh Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm *Email: thehv@ Ngày nhận bài: 23/9/2019; Ngày chấp nhận đăng: 12/11/2019 TÓM TẮT Enzyme chịu nhiệt Thermus aquaticus DNA polymerase (Taq pol) là một thành phần quan trọng trong phản ứng khuếch đại gen (PCR). Trong nghiên cứu này, plasmid pAKTaq chứa gen mã hóa Taq pol được biến nạp thành công vào vi khuẩn E. coli BL21. Tiếp sau đó, điều kiện biểu hiện của Taq pol được xác định bằng cách cảm ứng với IPTG 1 mM trong 6 giờ ở 30 °C. Phản ứng PCR được sử dụng để đánh giá hoạt tính tương đối của enzyme thu được, kết quả cho thấy enzyme thu được có thể sử dụng trong phản ứng PCR để khuếch đại các DNA mục tiêu từ vi khuẩn, thực vật và động vật. Kết quả nghiên cứu này là tiền đề để sản xuất enzyme Taq pol có giá thành rẻ ở quy mô phòng thí nghiệm. Từ khóa: E. coli, enzyme, PCR, Taq DNA polymerase. 1. MỞ ĐẦU Polymerase chain reaction (PCR) là một kỹ thuật phổ biến trong sinh học phân tử nhằm khuyếch đại đoạn DNA mong muốn dưới tác dụng của enzyme DNA polymerase để tạo ra hàng nghìn đến hàng triệu bản sao DNA. Kỹ thuật PCR được Kary Mullis phát minh năm 1985 [1]. Phản ứng PCR sử dụng enzyme DNA polymerase để khuếch đại vùng DNA mục tiêu. Trong đó, DNA polymerase phân lập từ vi khuẩn suối nước nóng Thermus aquatitus (Taq pol) có trọng lượng phân tử dao động trong khoảng 66-94 kDa được sử dụng phổ biến do việc sản xuất đơn giản [2]. Trong đó enzyme với kích thước 94 kDa có hoạt tính cao nhất và có thời gian bán phân hủy khoảng 3 phút ở 95 °C. Việc phát hiện ra khả năng bền với nhiệt độ cao khi tổng hợp DNA của enzyme này đã thúc đẩy sự ra đời của kỹ thuật PCR tự động. Năm 1989, Saiki và công sự đã

• Sinh học
• Tạp chí Khoa học Công nghệ và Thực phẩm
• E
• coli
• Taq DNA polymerase
• Enzyme chịu nhiệt
• Phản ứng khuếch đại gen
• Plasmid pAKTaq chứa gen mã hóa Taq pol
• Vệ sinh an toàn thực phẩm
• Chế phẩm sinh học EM
• Chất thải hữu cơ
• Hoạt tính chitinase
• Chất điều hòa sinh trưởng thực vật
• Nhân giống in vitro cây ba kích
• Điều kiện tách chiết saponin triterpenoid
• Thủy phân collagen từ da cá ngừ vây vàng
• An toàn thực phẩm
• Kiến thức về an toàn thực phẩm
• Thái độ của người bán rau
• Hộ trồng rau tại Khánh Hòa
• Vệ sinh an toàn thực phẩm ở Khánh Hòa
• Tạp chí Khoa học Công nghệ Thực phẩm
• Giáo dục thể chất
• Thể lực của sinh viên
• Các tố chất thể lực
• Đại học Công nghiệp Thực phẩm thành phố Hồ Chí Minh
• Tạp chí Khoa học và Công nghệ
• Khoa học Kỹ thuật và Công nghệ
• Khoa học Nông nghiệp
• Công nghệ sấy bơm nhiệt Sasaki
• An toàn vệ sinh thực phẩm
• Tạp chí Khoa học Công nghệ
• Công nghệ Sinh học và Thực phẩm
• Tính chất cấu trúc của kem bọt
• Tính chất vi thể của kem bọt
• Kem bọt không trứng/sữa
• Sản phẩm tráng miệng lạnh
• Hệ thống thực phẩm bền vững
• Tạp chí Khoa học
• Tạp chí sinh học
• Công nghệ sinh học
• Phương pháp tạo phức với urê
• Sản xuất thực phẩm chức năng
• Sản xuất dược phẩm
• Công nghệ thực phẩm
• Khả năng kháng oxy hóa
• Quá trình trích ly dầu hạt chè
• Đặc điểm kháng kháng sinh
• Bảo vệ sức khoẻ người tiêu dùng
• Sản phẩm thịt tươi sống
• Chương trình giám sát an toàn thực phẩm
• Kỹ thuật multiplex PCR
• Ngộ độc thực phẩm
• Salmonella sp
• Staphylococcus aureus
• Công nghệ sản xuất thực phẩm chức năng
• Khả năng thu nhận HA từ xương sụn cá
• Quá trình tạo chế phẩm bromelain dạng bột
• Phụ phẩm dứa
• Chế phẩm bromelain
• Phương pháp sấy phun
• Thái độ của người bán hải sản
• Người bán hải sản ở Phú Yên
• Tạp chí Khoa học Công nghệ Thủy sản
• Thông số công nghệ
• Chất lượng sản phẩm
• Nước sương sáo đóng lon
• Cây sương sáo
• Tính ổn định của sữa hạt điều
• Phụ gia thực phẩm
• Đồng hóa áp suất cao
• Glycerol monostearate
• Công thức sản xuất sữa thực vật
• Thực phẩm ăn kiêng
• Chỉ tiêu thực phẩm
• Hàm lượng chất khô của glucomannan
• Chỉ tiêu hóa lý
• Tác dụng kháng khuẩn của củ sâm
• Cây thuốc Việt Nam
• Thực vật trị bỏng
• Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp
• Bài viết về nông nghiệp
• Viện Nghiên cứu Lúa Quốc tế
• Giống lúa nhập nội
• Viện Cây lương thực và Cây thực phẩm
• Thông tin khoa học và công nghệ hạt nhân
• Năng lượng Việt Nam
• Công nghệ hạt nhân
• Chất lỏng siêu chảy
• Thiết bị phát hiện thực phẩm giả
• Xử lý rơm rạ
• Biện pháp gia tăng năng suất nấm
• Tảo xoắn spirulina
• Thực phẩm tốt cho sức khỏe
• Hành vi mua của người tiêu dùng
• Người tiêu dùng thành phố Hồ Chí Minh
• Nghiên cứu công nghệ BAC BSF
• Xử lý nước thải
• Công nghệ BAC BSF
• Công nghiệp sóng thần 1
• Mục đích tái sinh
• Bảo quản thực phẩm
• Phòng trị bệnh trên vật nuôi
• Khả năng sản sinh hợp chất kháng khuẩn
• Nấm men Sporobolomyces japonicus
• Tinh sạch phytase ngoại bào
• Chất màu thực phẩm
• Quá trình tạo bột màu betacyanin
• Vỏ quả thanh long
• Hylocereus undatus
• Dưỡng chất thực vật