TAILIEUCHUNG - analysis of genes and genomes phần 8

Single-bước gen knock-outs trong men. Việc chuyển đổi men với một đoạn DNA tuyến tính có chứa một gen có thể lựa chọn (URA3 hình thức một phần của con đường sinh tổng hợp uracil) hai bên kết quả trình tự DNA chèn của nó tại khu vực tương đồng của bộ gen (được chỉ định bởi các đường đứt nét). | 328 POST-GENOME ANALYSIS 10 PCR product URA3 Genomic DNA Í. s _ Í s Gene 1 Ura URA3 Figure . Single-step gene knock-outs in yeast. The transformation of yeast with a linear DNA fragment containing a selectable gene URA3 forms part of the uracil biosynthetic pathway flanked by genomic DNA sequences results in its insertion at homologous regions of the genome indicated by the dashed lines . The gene between the homologous sequences is eliminated and replaced by the selectable gene cassette contains the KANR ORF of the E. coli Tn903transposon fused to transcriptional and translational control sequences of the TEF gene of the filamentous fungus Ashbya gossypii. The insertion of the cassette into the yeast genome permits efficient selection of transformants resistant to the antibiotic geneticin G418 . The disruption of a gene is likely to lead to one of the following phenotypes. Lethal. The deleted cell is unable to grow. The gene is essential for some part of the growth process. Essential genes in yeast can be distinguished by the way in which they segregate during sporulation. Wild type. There is no detectable difference between the mutant and wildtype cells. If no differences can be detected under a variety of conditions it may suggest that another gene is able to compensate for the loss or that particular conditions have not been found where the loss will show as a phenotypic change. Growth difference. The deleted strain may grow slower or faster than the wild-type parent under particular conditions. A battery of different growth tests each under a variety of conditions may then be used to identify potential roles of the protein encoded by the gene. The analysis of yeast disruption mutants showed that almost 20 per cent of yeast genes within the genome were essential for growth on glucose-rich media and in other screens 15 per cent of the disruptions had an effect on overall cell ANTISENSE AND RNA INTERFERENCE RNAi 329 size or morphology Giaever et al. 2002

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.