TAILIEUCHUNG - Atomic Force Microscopy in Cell Biology Episode 2 Part 7

Tham khảo tài liệu 'atomic force microscopy in cell biology episode 2 part 7', kỹ thuật - công nghệ, cơ khí - chế tạo máy phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | 306 Chen and Moy 4. Repeat wash twice. 5. After removing supernatant from last wash resuspend beads in BSA in PBS. 6. Add 100 lỏl of washed beads to neutravidin-coated plate. Beads should adhere to the dish almost immediately. III. Applications A. Probing Molecular Landscapes of Streptavidin-Biotin Unbinding Direct force measurements of the unbinding strength of single streptavidin biotin pairs opened the way for examining the molecular determinants of ligand-receptor unbinding Merkel et al. 1999 . As predicted by the Bell Model the rupture force of the individual streptavidin-biotin bonds increased with increasing loading rate Bell 1978 Evans and Ritchie 1997 . Figure 3 shows the dynamic response of streptavidin and a streptavidin mutant W120F in which the tryptophan residue at position 120 was replaced by a phenylalanine. As shown the mutation altered the force spectrum of the streptavidinavidin interaction. The analysis of these force spectra provides a direct approach for probing the landscape of the streptavidin-biotin unbinding Yuan et al. 2000 . The streptavidin-biotin force measurements were carried out as described in earlier sections with a streptavidin-functionalized tip and an agarose bead. To ensure that single bonds were being measured the frequency of adhesion events was reduced to 30 by restricting indentation depth and or by adding excess free biotin. By simple statistical analysis based on the Poisson distribution one is thus ensured that 80 of the measured events are due to the rupture of single-molecule pairs Merkel et al. 1999 . The loading rate of the measurement is dependent on both the elasticity of the system and the speed Fig. 3 Loading rate dependence of the rupture force in the unbinding of the streptavidin-biotin o and W120F-biotin . The force measurements revealed two loading regimes in the unbinding of the complexes. Both regimes in force spectra were fitted to the Bell model Yuan et al. 2000 . 14. Single-Molecule Force .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.