TAILIEUCHUNG - Vai trò của đột biến kép ở hai vị trí D260E và Y230V trong Enzim Êpoxit Hydrolaza của hạt đậu tương
Bài viết trình bày các hydrolase epoxide (EH) được phân phối rộng rãi trong nhiều cơ thể, bao gồm cả vi khuẩn, nấm, thực vật và động vật. Những enzyme này là một nhóm thú vị của các enzyme liên quan đến chức năng xúc tác thêm phân tử nước vào epoxit (oxirane moiety), tạo ra 1-2 diol tương ứng. Gần đây các nghiên cứu đã được cung cấp thông tin có giá trị về cấu trúc phân tử của các enzyme này, cũng như cái nhìn sâu sắc về các cơ chế enzyme có liên quan. | Vai trũ của đột biến kộp ở hai vị trớ D260E và Y230V trong Enzim ấpoxit Hydrolaza của hạt đậu tương 28(2): 63-67 Tạp chí Sinh học 6-2006 Vai trò của đột biến kép ở hai vị trí D260E và Y230V trong enzim êpoxit hydrolaza của hạt đậu t−ơng Nghiêm Ngọc Minh Viện Công nghệ sinh học Êpoxit hydrolaza (EH) là một enzim phân phòng thí nghiệm của . Fukazawa, Viện bố rộng rãi ở nhiều đối tượng như người [1, 12], nghiên cứu thực phẩm quốc gia Nhật Bản. động vật [2, 7], côn trùng [5] và vi sinh vật [8, Takara Ex taqTM Kit của hãng Takara Shuzo co., 9]. Enzim này có chức năng xúc tác để thủy LTD. Nhật Bản: dùng trong phản ứng PCR, Kit phân vòng êpoxy thành một sản phẩm có 2 TA Cloning(R) có vectơ , T4 DNA ligaza, nhóm hydroxyl (diols) nằm gần nhau, khi thêm tế bào khả biến của chủng INV F' của một phân tử nước (H2O). Năm 1995, Katsube và hãng InvitrogienTM dùng để nhân dòng cho đọc cs. đã công bố trình tự của cDNA mã hóa cho trình tự. Kit đọc trình tự: Thermo Sequenase enzim EH [3]. Sau đó, Michael và cs. đã chỉ ra fluorescent labelled primer cycle sequencing kit rằng bộ ba Asp333 (axít aspactic ở vị trí 333), with 7-deaza-dGTP (RPN2438/RPN2538) của Asp495 và His523 trong EH ở chuột [7], hoặc hãng Amersham pharmacia biotech. Các enzim Asp107, Asp246 (t−ơng đ−ơng với vị trí Asp260 ở giới hạn Nde I, EcoR I, tế bào khả biến của hạt đậu t−ơng) và His275 trong EH ở vi khuẩn [8] chủng JM109 nhận của hãng Wako/Nipon đã tạo thành bộ ba xúc tác của enzim EH dạng Giene và chủng BL21 (DE23) của hãng hòa tan. ở người, vị trí của Tyr385 và Tyr465 Novagien. (t−ơng đ−ơng với vị trí Tyr125 và Tyr230 ở hạt đậu t−ơng) có vai trò nhất định trong tâm xúc tác Vectơ biểu hiện pET 21A (+) dùng để biểu [12]. Masaomi và cs. (2000) cũng đã thông báo hiện trong E. coli nhận từ hãng Invitrogien. Các kết quả biểu hiện và làm sạch được enzim này cặp mồi đột biến được thiết kế dựa trên trình tự trong hạt đậu t−ơng ở dạng hòa tan [6]. ở hạt .
đang nạp các trang xem trước
