Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Bài viết trình bày các hydrolase epoxide (EH) được phân phối rộng rãi trong nhiều cơ thể, bao gồm cả vi khuẩn, nấm, thực vật và động vật. Những enzyme này là một nhóm thú vị của các enzyme liên quan đến chức năng xúc tác thêm phân tử nước vào epoxit (oxirane moiety), tạo ra 1-2 diol tương ứng. Gần đây các nghiên cứu đã được cung cấp thông tin có giá trị về cấu trúc phân tử của các enzyme này, cũng như cái nhìn sâu sắc về các cơ chế enzyme có liên quan. | Vai trò của đột biến kép ở hai vị trí D260E và Y230V trong Enzim Êpoxit Hydrolaza của hạt đậu tương 28(2): 63-67 T¹p chÝ Sinh häc 6-2006 Vai trß cña ®ét biÕn kÐp ë hai vÞ trÝ D260E vµ Y230V trong enzim ªpoxit hydrolaza cña h¹t ®Ëu t−¬ng Nghiªm Ngäc Minh ViÖn C«ng nghÖ sinh häc £poxit hydrolaza (EH) lµ mét enzim ph©n phßng thÝ nghiÖm cña GS.TS. Fukazawa, ViÖn bè réng r·i ë nhiÒu ®èi t−îng nh− ng−êi [1, 12], nghiªn cøu thùc phÈm quèc gia NhËt B¶n. ®éng vËt [2, 7], c«n trïng [5] vµ vi sinh vËt [8, Takara Ex taqTM Kit cña h·ng Takara Shuzo co., 9]. Enzim nµy cã chøc n¨ng xóc t¸c ®Ó thñy LTD. NhËt B¶n: dïng trong ph¶n øng PCR, Kit ph©n vßng ªpoxy thµnh mét s¶n phÈm cã 2 TA Cloning(R) cã vect¬ pCR2.1, T4 DNA ligaza, nhãm hydroxyl (diols) n»m gÇn nhau, khi thªm tÕ bµo kh¶ biÕn cña chñng E.coli INV F' cña mét ph©n tö n−íc (H2O). N¨m 1995, Katsube vµ h·ng InvitrogienTM dïng ®Ó nh©n dßng cho ®äc cs. ®· c«ng bè tr×nh tù cña cDNA m· hãa cho tr×nh tù. Kit ®äc tr×nh tù: Thermo Sequenase enzim EH [3]. Sau ®ã, Michael vµ cs. ®· chØ ra fluorescent labelled primer cycle sequencing kit r»ng bé ba Asp333 (axÝt aspactic ë vÞ trÝ 333), with 7-deaza-dGTP (RPN2438/RPN2538) cña Asp495 vµ His523 trong EH ë chuét [7], hoÆc h·ng Amersham pharmacia biotech. C¸c enzim Asp107, Asp246 (t−¬ng ®−¬ng víi vÞ trÝ Asp260 ë giíi h¹n Nde I, EcoR I, tÕ bµo kh¶ biÕn cña h¹t ®Ëu t−¬ng) vµ His275 trong EH ë vi khuÈn [8] chñng JM109 nhËn cña h·ng Wako/Nipon ®· t¹o thµnh bé ba xóc t¸c cña enzim EH d¹ng Giene vµ chñng BL21 (DE23) cña h·ng hßa tan. ë ng−êi, vÞ trÝ cña Tyr385 vµ Tyr465 Novagien. (t−¬ng ®−¬ng víi vÞ trÝ Tyr125 vµ Tyr230 ë h¹t ®Ëu t−¬ng) cã vai trß nhÊt ®Þnh trong t©m xóc t¸c Vect¬ biÓu hiÖn pET 21A (+) dïng ®Ó biÓu [12]. Masaomi vµ cs. (2000) còng ®· th«ng b¸o hiÖn trong E. coli nhËn tõ h·ng Invitrogien. C¸c kÕt qu¶ biÓu hiÖn vµ lµm s¹ch ®−îc enzim nµy cÆp måi ®ét biÕn ®−îc thiÕt kÕ dùa trªn tr×nh tù trong h¹t ®Ëu t−¬ng ë d¹ng hßa tan [6]. ë h¹t .
