TAILIEUCHUNG - Tạo dòng và biểu hiện hIGF-1 trong e. coli

Trong bài viết này, chúng tôi tiến hành tạo dòng và biểu hiện protein hIGF-1 trong hệ thống Escherichia coli với mục tiêu bước đầu xây dựng quy trình sản xuất hIGF-1 tái tổ hợp nhằm phục vụ nhu cầu nghiên cứu và điều trị. | TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 78-83 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN hIGF-1 (HUMAN INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR 1) TRONG E. coli Dương Long Duy, Đặng Thị Phương Thảo*, Trần Linh Thước Đại học Khoa học tự nhiên, ĐHQG tp. Hồ Chí Minh, (*)thaodp@ TÓM TẮT: hIGF-1 (human Insulin-like Growth Factor 1) là nhân tố tăng trưởng do gan tiết ra dưới sự kích thích của hormone tăng trưởng GH. hIGF-1 được chỉ định để điều trị bệnh lùn ở trẻ do thiếu hụt hIGF-1 và được sử dụng để kích thích sự phát triển khối lượng cơ ở các vận động viên thể dục thể thao. Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng, hIGF-1 có khả năng kiểm soát lượng glucose trong máu ở bệnh nhân đái tháo đường type 1 và type 2, có tác động tích cực đến một số bệnh thần kinh như bệnh alzheimer, một số bệnh tim mạch và nhiều nghiên cứu ứng dụng chức năng của hIGF-1 vẫn đang được tiến hành. Với mục tiêu thu nhận lượng lớn hIGF-1 nhằm mục đích phục vụ điều trị bệnh và nghiên cứu, nhóm chúng tôi tiến hành sản xuất rhIGF-1 trên hệ thống tế bào vi khuẩn E. coli. Đầu tiên, chúng tôi tiến hành tạo dòng và biểu hiện protein hIGF-1. Gen mã hóa cho hIGF-1 được gắn chèn vào plasmid pET-22b để tạo thành plasmid pET22b-IGF1. Vector tái tổ hợp được kiểm tra bằng các phương pháp PCR, enzyme cắt giới hạn và giải trình tự. Plasmid pET22b-IGF1 được biến nạp vào chủng tế bào E. coli Origami (DE3) để biểu hiện protein mục tiêu. Protein rhIGF-1 được cảm ứng biểu hiện bằng IPTG, kết quả SDS-PAGE và Western blot cho thấy có vạch protein rhIGF-1 trên bản điện di và trên bản phim. Chúng tôi đã biểu hiện thành công rhIGF-1 trong tế bào E. coli. Kết quả này là cơ sở để chúng tôi tiếp tục phát triển nghiên cứu các bước tiếp theo gồm lên men, tinh chế và kiểm tra hoạt tính rhIGF-1 thu nhận được. Từ khóa: E. coli, protein tái tổ hợp, rhIGF-1. MỞ ĐẦU Human Insulin-like Growth Factor 1 (hIFG1) là nhân tố tăng trưởng có bản chất protein, có cấu trúc không gian gần giống với phân tử insulin với độ tương đồng trình tự lên đến 50%. hIGF-1 gồm một chuỗi 70 .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.