TAILIEUCHUNG - Báo cáo: So sánh đặc điểm và phương pháp xây dựng thư viện genomic DNA, thư viện cDNA

Thư viện bộ gene của một sv là tập hợp tất cả các trình tự DNA cấu thành bộ gene được gắn vào vector, sau đó được đưa vào tế bào chủ. Các tế bào chủ được nuôi cấy trên môi trường tạo dòng. Thư viện cDNA là tập hợp tất cả các bản sao từ mRNA của một tế bào, trong một điều kiện sinh lí nhất định, tại một thời điểm nhất định. | SO SÁNH ĐẶC ĐIỂM & PHƯƠNG PHÁP XÂY DỰNG THƯ VIỆN GENOMIC DNA, THƯ VIỆN cDNA. Nhóm 3: Huỳnh Minh Trí Phạm Thị Sương Phạm Thị Lan Bùi Thị Kim Ly NỘI DUNH CHÍNH: THƯ VIỆN GENOMIC DNA THƯ VIỆN cDNA PHƯƠNG PHÁP XÂY DỰNG SO SÁNH Thư viện genomic DNA: Thư viện bộ gene của một sv là tập hợp tất cả các trình tự DNA cấu thành bộ gene được gắn vào vector, sau đó được đưa vào tế bào chủ. Các tế bào chủ được nuôi cấy trên môi trường tạo dòng. Thư viện cDNA là tập hợp tất cả các bản sao từ mRNA của một tế bào, trong một điều kiện sinh lí nhất định, tại một thời điểm nhất định. Thư viện cDNA: TUYỂN CHỌN DÒNG MỤC TIÊU: Để có thể phân lập dòng tế bào chủ tái tổ hợp chứa gene mục tiêu trong một thư viện DNA hay một thư viện cDNA, người ta phải sử dụng các phương pháp sàng lọc. Thông thường các phương pháp sàng lọc được xây dựng dựa trên việc sử dụng mẫu dò DNA. Mẫu dò DNA (probe) là một đoạn oliogonucleotide được đánh dấu và bổ sung hoặc bổ sung một phần với gene mục tiêu. TUYỂN CHỌN DÒNG MỤC TIÊU: Gene được biểu hiện trong tế bào chủ là vi khuẩn: + Lai miễn dịch (Western blot) + Hoạt tính enzyme + Bổ trợ đột biến (gene ngoại lai đồng dạng với gene của tế bào chủ) Gene ngoại lai không biểu hiện trong tế bào chủ: Lai insitu: + Lai khuẩn lạc (colony hybridization): vector là plasmid + Lai plaque (plaque colonization): vector là phage SO SÁNH: Nội dung Tạo thư viện genomic DNA Tạo thư viện cDNA Mục đích Nhằm lưu trữ thông tin di truyền trong các tế bào chủ để phục vụ các hoạt động nghiên cứu. - Đều đưa vào tế bào chủ để tạo dòng. Vector thường sử dụng Phage I, YAC, Cosmid Phage ƛ: ƛgt10, ƛgt11, ƛ11/18/23/ZAP Đối tượng - DNA tế bào - Thường được lập cho Prokaryode (vì genome, biểu hiện gen Eukaryode phức tạp, chưa làm hết) - mRNA trưởng thành của 1 loại mô nhất định - Thường được lập cho Eukaryode. SO SÁNH: Nội dung Tạo thư viện genomic DNA Tạo thư viện cDNA Biểu hiện Một thư viện genomic DNA đại diện cho 1 loài. Một cơ thể có nhiều thư viện cDNA khác nhau đặc trưng cho từng loại tổ chức chuyên hóa trong điều kiện sinh lí, thời điểm nhất định. Các giai đoạn chính Tách chiết DNA Cắt DNA Gắn DNA vào vector Đóng gói các dòng tái tổ hợp Xâm nhiễm vào TB vật chủ Tạo dòng Chọn lọc kích thước của cDNA Gắn các cDNA với các nhánh của bacteriophage Phân tích các đoạn chèn cDNA Tạo thư viện cDNA hoàn chỉnh Khuếch đại thư viện cDNA SO SÁNH: Nội dung Tạo thư viện genomic DNA Tạo thư viện cDNA Phương pháp sàng lọc - Dựa vào các gen chỉ thị trên vector. - Thường sử dụng: lai khuẩn lạc - Dựa vào các gen chỉ thị - Thường sử dụng: lai plaque - Ưu điểm - Dễ thao tác hơn đối với RNA - Có thể xác định được bản đồ giới hạn gen - Các dòng cDNA chứa trình tự mã hóa liên tục của 1 gene - TV cDNA được tạo ra từ 1 loại TB mô có nhiều cDNA mã hóa cho các Pr tương ứng làm giảm nhẹ việc xác định dòng mong muốn từ TV gen. SO SÁNH: Nội dung Tạo thư viện genomic DNA Tạo thư viện cDNA Nhược điểm Tạo ra các dòng mang các đoạn chèn DNA khác nhau nhưng gối chồng lên nhau - Quy trình nghiêm ngặt: mRNA dễ bị phân hủy - Nhiều bước phức tạp. Ứng dụng - Giải mã thông tin DT trong genome, đặc biệt là cấu trúc intron & exon trong 1 gene xác định. - Bảo tồn gene. Nghiên cứu sự biểu hiện của một gene xác định cùng các vấn đề điều hòa biểu hiện tương tác gene. Tài liệu tham khảo : Nguồn Tìm: chương 207, kỹ thuật tạo thư viện genomic DNA và thư viện cDNA. Nguyễn Hoàng Lộc & cộng sự, giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp, Nxb ĐHQG

• Khoa học tự nhiên
• báo cáo thực tập
• luận văn tốt nghiệp
• thư viện cDNA
• thư viện genomic DNA
• Lai insitu
• hoạt tính enzym
• Mẫu báo cáo thực tập ngắn hạn
• Mẫu báo cáo thực tập
• Cách viết báo cáo thực tập
• Hướng dẫn viết báo cáo thực tập
• Cách trình bày báo cáo thực tập
• Báo cáo thực tập tốt nghiệp cuối khóa
• Hình thức báo cáo thực tập tốt nghiệp
• Nội dung báo cáo thực tập tốt nghiệp
• Quy định báo cáo thực tập tốt nghiệp
• Trình bày báo cáo thực tập tốt nghiệp
• Báo cáo tốt nghiệp
• bài báo cáo thực tập
• luận văn mẫu
• cách trình bày báo cáo
• ngành ngân hàng
• Báo cáo thực tập sản xuất
• Quy trình viết báo cáo thực tập
• Kết cấu của báo cáo thực tập
• Hình thức báo cáo thực tập
• Báo cáo thực tập tốt nghiệp
• Trình bày báo cáo thực tập
• Hướng dẫn trình bày báo cáo
• Hướng dẫn làm báo cáo thực tập
• Báo cáo thực tập kế toán
• tài liệu báo cáo thực tập
• báo cáo thực tập siêu thị
• Siêu thị Hà Nội
• Đề cương báo cáo thực tập
• Trường Đại học Thương mại
• Cách viết báo cáo
• Báo cáo thực tập kế toán tiền lương
• Báo cáo kế toán
• Báo cáo thực tập về tiền lương
• Báo cáo thực tập các khoản trích theo lương
• Luận văn kế toán tiền lương
• Giáo trình kế toán
• viết báo cáo thực tập
• cẩm nang viết báo cáo thực tập
• kinh nghiệm viết báo cáo thực tập
• Báo cáo thực tập tốt nghiệp Công nghệ thông tin
• Báo cáo thực tập tốt nghiệp Khoa học máy tính
• Báo cáo thực tập tại Công ty Nhơn Mỹ
• Thực tập quản trị website
• Báo cáo thực tập sư phạm
• Thực tập sư phạm
• Tài liệu thực tập sư phạm
• Tìm hiểu thực tập sư phạm
• Báo cáo thực tập sư phạm sinh viên
• Báo cáo thực tập điện tử viễn thông
• Báo cáo thực tập mạng viễn thông
• Báo cáo thực tập VNPT Huế
• Mạng truyền dẫn VNPT Huế
• Báo cáo thực tập viễn thông
• Thực trạng mạng viễn thông
• Báo cáo thực tập thuế
• Thực tập báo cáo thuế
• Dự báo thu thuế doanh nghiệp
• Thuế thu nhập doanh nghiệp
• giáo trình kỹ thuật điện
• mạch điện ứng dụng
• vi mạch điện tử
• Quy định thực hiện báo cáo
• quy định nội dung báo cáo
• bố cục báo cáo thực tập
• tiểu luận nghiên cứu đề tài
• luận văn thực tập tốt nghiệp
• báo cáo thực tập quản lí nhà hàng
• Báo cáo Điện công nghiệp
• Báo cáo điện dân dụng
• Báo cáo thực tập điện
• Thực tập điện công nghiệp
• Thực tập điện dân dụng
• Báo cáo kết quả thực tập tốt nghiệp
• Quản trị website
• nghiên cứu đề tài
• Tiểu luận
• Báo cáo chuyên ngành kế toán
• Báo cáo tốt nghiệp ngành kế toán
• Báo cáo thực tập tài chính
• Hướng dẫn báo cáo
• Quy định chung đối với báo cáo thực tập
• Báo cáo thực tập kỹ thuật
• Quy định báo cáo
• Khoản trích theo lương
• Báo cáo thực tập tài chính doanh nghiệp
• Báo cáo thực tập kế toán thuế
• Luận văn kế toán
• Báo cáo kiến tập kế toán
• Báo cáo tiến độ đề tài thực tập
• Mẫu báo cáo tiến độ
• Tiến độ thực hiện thực tập chuyên ngành
• Biên bản giáo dục
• Thực tập chuyên ngành
• thực tập sư phạm THPT
• phương pháp thực tập
• môi trường thực tập