Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Tài liệu HOT
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
PHƯƠNG PHÁP PCR
TAILIEUCHUNG - PHƯƠNG PHÁP PCR
DNA polymerase thực hiện tổng hợp mạch mới từ DNA mạch khuôn cần sự hiện diện của mồi chuyên biệt. Mồi: đoạn DNA ngắn, có khả năng bắt cặp bổ sung với một đầu của mạch khuôn. Nhiệt độ nóng chảy của mồi: Tm (ở nhiệt độ này, 50 % DNA mạch đôi bị tách mạch thành mạch đơn). Tm = 4(G + C) + 2(A + T) °C Nếu cung cấp 2 mồi chuyên biệt (mồi xuôi và mồi ngược) bắt cặp bổ sung với 2 đầu của một trình tự DNA, DNA polymerase sẽ xúc tác tổng hợp đoạn DNA nằm giữa 2 mồi | Chương 5 PHƯƠNG PHÁP PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) Nguyên tắc của phương pháp PCR: DNA polymerase thực hiện tổng hợp mạch mới từ DNA mạch khuôn cần sự hiện diện của mồi chuyên biệt. Mồi: đoạn DNA ngắn, có khả năng bắt cặp bổ sung với một đầu của mạch khuôn. Nhiệt độ nóng chảy của mồi: Tm (ở nhiệt độ này, 50 % DNA mạch đôi bị tách mạch thành mạch đơn). Tm = 4(G + C) + 2(A + T) °C Nếu cung cấp 2 mồi chuyên biệt (mồi xuôi và mồi ngược) bắt cặp bổ sung với 2 đầu của một trình tự DNA, DNA polymerase sẽ xúc tác tổng hợp đoạn DNA nằm giữa 2 mồi. 2. Phản ứng PCR: Thành phần phản ứng: - DNA bản mẫu - Mồi xuôi và mồi ngược - dNTP (gồm 4 loại: dATP, dGTP, dTTP, dCTP) - MgCl2 - Enzyme polymerase (Taq polymerase, Pfu ) - Dung dịch đệm. - Nước cất 2 lần (đã khử trùng) Các bước của phản ứng: Là một chuỗi nhiều chu kỳ, mỗi chu kỳ gồm 3 bước: Bước 1: Biến tính (denaturation) DNA được biến tính ở nhiệt độ cao, thường là 94 – 950C, trong thời gian 30s – 1 phút. Bước 2: Bắt cặp mồi (hybridization) Nhiệt độ cần cho sự bắt cặp mồi với DNA mạch khuôn là Ta (Ta thấp hơn Tm khoảng 50C). Bước 3: Kéo dài (elongation) Nhiệt độ được tăng lên đến 720C, để DNA polymerase hoạt động kéo dài mạch. 3. Các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng PCR DNA mẫu: - DNA sạch, lượng DNA sử dụng cho PCR có khuynh hướng giảm (khoảng 100 ng) - Giảm lượng mẫu hạn chế sản phẩm “kí sinh”. - PCR có thể thực hiện trên các mẫu không được bảo quản tốt. Enzyme : Enzyme polymerase đầu tiên chịu nhiệt được tách chiết từ Thermus aquaticus là Taq polymerase. Enzyme Pfu DNA polymerase thu nhận từ vi khuẩn Pyroccus furiosus có khả năng chịu nhiệt cao hơn, có hoạt tính 3’-5’ exonuclease. Tth polymerase, tách chiết từ Thermus thermophilus, có khả năng phiên mã ngược khi có RNA và Mn2+, khi có DNA và Mg2+ thì enzyme này thực hiện khuếch đại DNA. Mồi và nhiệt độ lai Ta - Mồi là chỉ tiêu quan trọng nhất, quyết định tính đặc hiệu của phản ứng. Khi thiết kế mồi cần chú ý: thành phần GC, khả năng bắt cặp bổ sung giữa “mồi xuôi” và “mồi .
Bích Thảo
229
9
ppt
Báo lỗi
Trùng lắp nội dung
Văn hóa đồi trụy
Phản động
Bản quyền
File lỗi
Khác
Upload
Tải xuống
đang nạp các trang xem trước
Bấm vào đây để xem trước nội dung
Tải xuống
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Phương pháp PCR
12
197
11
Thuyết trình nhóm: Phương pháp PCR
29
201
3
PHƯƠNG PHÁP PCR
9
193
3
Xây dựng phương pháp phát hiện thịt heo và thịt bò trong thực phẩm bằng kỹ thuật multiplex PCR
8
142
0
Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng: Xác định kiểu gen của virus viêm gan B ở một số bệnh nhân nhiễm virus tại Thái Nguyên bằng phương pháp PCR lồng (Nested - PCR)
63
42
1
Luận văn tốt nghiệp: Ứng dụng phương pháp PCR phát hiện vi khuẩn Aeromonas hydrophila phân lập từ cá tra (Pangasianodon hydrophthamus) bị bệnh xuất huyết - ĐH Cần Thơ
46
107
2
Đề tài: PHƯƠNG PHÁP PCR
29
177
4
Chương 5: PHƯƠNG PHÁP PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION)
9
91
1
PHÂN BIỆT CÁC LOẠI THỊT HEO, BÕ, CỪU BẰNG PHƯƠNG PHÁP MULTIPLEX PCR
70
101
0
Xác định kiểu gen của HCV bằng kỹ thuật giải trình tự trực tiếp sản phẩm PCR thu nhận được từ thử nghiệm RT real-time PCR dùng mồi và taqman probe đặc hiệu vùng 5’ NC
7
116
0
TÀI LIỆU XEM NHIỀU
Một Case Về Hematology (1)
8
461887
55
Giới thiệu :Lập trình mã nguồn mở
14
22723
61
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10906
530
Câu hỏi và đáp án bài tập tình huống Quản trị học
14
10083
447
Phân tích và làm rõ ý kiến sau: “Bài thơ Tự tình II vừa nói lên bi kịch duyên phận vừa cho thấy khát vọng sống, khát vọng hạnh phúc của Hồ Xuân Hương”
3
9540
104
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8302
1127
Tiểu luận: Nội dung tư tưởng Hồ Chí Minh về đạo đức
16
8248
423
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7867
2220
Đề tài: Dự án kinh doanh thời trang quần áo nữ
17
6713
253
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
5795
1391
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Sinh học
phương pháp PCR
nguyên tắc của PCR
phản ứng PCR
ảnh hưởng của PCR
tài liệu sinh học
giáo trình PCR
tài liệu PCR
tìm hiểu PCR
bài giảng PCR
Thuyết trình nhóm
Quy trình phản ứng PCR
Ứng dụng PCR
Thực nghiệm PCR
Nguyên tắc PCR
Quy trình multiplex PCR
Tính chuyên biệt các cặp mồi trong phản ứng multiplex PCR
Nồng độ primer cho phản ứng multiplex PCR phát hiện DNA
Phương pháp phát hiện thịt heo trong thực phẩm
Phương pháp phát hiện thịt bò
Kỹ thuật multiplex PCR
Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng
Công nghệ sinh học
Virus viêm gan B
Phương pháp PCR lồng
Kỹ thuật real time PCR
Phương pháp tách chiết Hepatitis B virus DNA
Luận văn ngành thủy sản
Ứng dụng phương pháp PCR
Vi khuẩn Aeromonas hydrophila
Cá tra bị bệnh xuất huyết
Phương pháp PCR phát hiện vi khuẩn
Chuẩn hóa phương pháp PCR
tiểu luận nghiên cứu đề tài
cách trình bày báo cáo
điều kiện phản ứng PCR
dung dịch đệm cho phản ứng PCR
quy trình phản ứng
hạn chế của phương pháp
công nghệ gen và tế bào
nguyên tắc phương pháp PCR
DNA polymerase
luận văn
phƣơng pháp multiplex PCR
tách chiết DNA
phản ứng m PCR
sản phẩm PCR
xác định kiểu gen của HCV
thử nghiệm RT real time PCR
đặc hiệu vùng 5’ NC
phương pháp nghiên cứu
Phát hiện các gien mã hóa
Gien mã hóa Hemolysin bền nhiệt
Vibro Parahaemolyticus bằng phương pháp PCR
Các chủng mang gien gây bệnh
Kỹ thuật PCR
Phản ứng chuỗi trùng hợp
Polymerase Chain Reaction
Sinh học phân tử
AND tái tổ hợp
Phương pháp Multiplex PCR
Nhiễm khuẩn âm đạo
Vùng gene đặc hiệu 16s rRNA
Tối ưu hóa M PCR
Bệnh viêm vùng chậu
Bài viết Enterovirus 71
Phương pháp Real Time RT PCR
Quy trình Real time PCR
Phát hiện EV71
Bệnh tay chân miệng
Đa hình rs10811661 gen CDKN2A
Phương pháp AS PCR
Tế bào β
Bệnh đái tháo đường týp 2
Hội chứng chuyển hóa ở người Việt Nam
Tạp chí Nông nghiệp
Đa dạng di truyền nhóm bacillus subtilis
Phương pháp giải trình tự đoạn gen
Protein ngón tay kẽm
Bệnh Care ở chó
Biểu hiện lâm sàng của bệnh Care
Khám lâm sàng
Xét nghiệm nhanh
Phương pháp RT PCR
Vi khuẩn vibrio parahaemolyticus gây bệnh ở cá
Vi khuẩn Vibrio sp
Vi khuẩn là Vibrio vulnificus
Thừa Thiên Huế
Ứng dụng kỹ thuật nested PCR
Định type porcine circovirus type 2
Đàn lợn nuôi
Ngành chăn nuôi lợn
Phương pháp tách ADN
Phương pháp nested PCR
Real time PCR phát hiện Ricin
Aptamer đặc hiệu Ricin
Lecin thực vật
Cấu trúc vòng sarcin ricin
Phương pháp real time PCR
Luận văn Thạc sĩ Sinh học
Sự nhiễm vi sinh vật gây bệnh
Thực phẩm đường phố
VSV gây bênh trong TP đường phố
C perfringens trong thực phẩm đường phố
độ tinh sạch
phương pháp thí nghiệm
thí nghiệm sinh học
Teo cơ tủy
Đột biến gen SMNt
Quy trình xác định đột biến gen SMNt
Phương pháp enzym giới hạn
Bệnh teo cơ tủy từ một tế bào
Đặc điểm bệnh lý của bệnh đậu dê
Bệnh đậu dê
Triệu chứng lâm sàng của dê mắc bệnh đậu
Phương pháp điều tra dịch tễ
Nghiên cứu y học
Ung thư cổ tử cung
Nhiễm HPV ở phụ nữ
Tế bào học cổ tử cung
Phương pháp Aptima HPV
Phương pháp realtime PCR HPV
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
Động cơ đốt trong và máy kéo công nghiêp tập 1 part 7
23
260
0
01-05-2024
Động cơ đốt trong và máy kéo công nghiêp tập 2 part 8
32
262
0
01-05-2024
Bơm máy nén quạt trong công nghiệp part 8
20
199
2
01-05-2024
MySQL Database Usage & Administration PHẦN 9
37
143
0
01-05-2024
Lịch sử Đội TNTP Hồ Chí Minh - CHƯƠNG III VÂNG LỜI BÁC DẠY, LÀM NGHÌN VIỆC TỐT, CHỐNG MỸ, CỨU NƯỚC, THIẾU NIÊN SĂN SÀNG
45
138
0
01-05-2024
Đề tài: Tìm hiểu một số yêu cầu đặt ra với một phòng thu âm, để đảm bảo chất lượng âm thanh trong sản phẩm đa phương tiện
8
162
1
01-05-2024
Diseases of the Liver and Biliary System - part 1
33
125
0
01-05-2024
XỬ TRÍ CHẤN THƯƠNG SỌ NÃO KÍN
1
116
1
01-05-2024
New Trends and Developments in Automotive Industry Part 7
35
97
0
01-05-2024
GIÁO TRÌNH VI XỬ LÝ 1 - CHƯƠNG 5. LẬP TRÌNH CHO VI ĐIỀU KHIỂN 80C51
23
108
1
01-05-2024
TÀI LIỆU HOT
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7867
2220
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
5795
1391
Ebook Chào con ba mẹ đã sẵn sàng
112
3772
1233
Ebook Tuyển tập đề bài và bài văn nghị luận xã hội: Phần 1
62
5334
1136
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8302
1127
Giáo trình Văn hóa kinh doanh - PGS.TS. Dương Thị Liễu
561
3518
644
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
10906
530
Giáo trình Sinh lí học trẻ em: Phần 1 - TS Lê Thanh Vân
122
3695
525
Giáo trình Pháp luật đại cương: Phần 1 - NXB ĐH Sư Phạm
274
4071
516
Bài tập nhóm quản lý dự án: Dự án xây dựng quán cafe
35
4136
480
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.