TAILIEUCHUNG - Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR chẩn đoán nhanh vi-rút gây bệnh khảm vàng (PYMoV) trên cây hồ tiêu ở Việt Nam

Bài viết sử dụng cùng lúc 4 cặp mồi, trong 4 tube PCR riêng biệt, được thiết kế tại các vùng gene bảo thủ tương ứng trên 4 ORFs (OFR1 - OFR4) của bộ gene PYMoV trong cùng 1 phản ứng PCR với yêu cầu cả 4 cặp mồi đều cho kết quả dương tính rõ trên DNA của mỗi mẫu nhi m bệnh và đều âm tính trên mẫu đối chứng khỏe. Các cặp mồi này chỉ được đề xuất sử dụng khi chúng đều cho kết quả tương tự trong phản ứng RT-PCR, ở bước tiếp theo, sử dụng RNA tổng số tách chiết từ cùng 1 mẫu giám định. | Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR chẩn đoán nhanh vi-rút gây bệnh khảm vàng PYMoV trên cây hồ tiêu ở Việt Nam BVTV - Sè 5 2018 Kết quả nghiên cứu khoa học NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR CHẨN ĐOÁN NHANH VI-RÖT GÂY BỆNH KHẢM VÀNG PYMoV TRÊN CÂY HỒ TIÊU Ở VIỆT NAM Study on PCR Techniques for Detection of Piper Yellow Mottle Virus PYMoV on Black Pepper in Viet Nam 1 1 1 Tạ Hoàng Anh Nguyễn Hồng Tuyên Nguyễn Thúy Hạnh 1 2 Nguyễn Thị Thúy và A Ishwara Bhat . Ngày nhận bài Ngày chấp nhận Abstract Four pairs of primers designed at conserved regions corresponding to four Open Reading Frames - OFR1 OFR2 OFR3 and OFR4 of the Piper yellow mottle virus PYMoV genome were used in four separated tubes in the same polymerase chain reaction PCR for each sample after extraction of total DNA using CTAB method. All four primer pairs gave bright and a single band of expected size including 379bp 352bp 539bp and 420bp respectively only on the lanes of infected sample but not any in the lane of healthy plant sample as negative control on a agarose gel after electrophoresis. Like many other Budnavirus PYMoV was found to occur endogenous virus intergrated most of their genomic sequence in the sequence of the host plant. Hence in this study for the confirmation of any unspecific amplification in PCR though no band was found on the healthy control DNA after PCR the One-Step RT-PCR was done using the same pairs of primers after total RNA extraction using Tri-Reagent. The same result was obtained after electrophoresis as done previously by PCR. Afterwards the serial dilution of DNA extract was done and gave the sensitivity of PCR protocol was -3 of 10 . These results of PCR and RT-PCR helped to recommend a good protocol using either one of or all those four pairs of primers for a specific and sensitive detection of PYMoV from infected black pepper plants in Vietnam by PCR. Keywords Piper yellow mottle virus detection PCR RT-PCR 1. ĐẶT VẤN ĐỀ biến ở hầu khắp các vườn

• Sinh học
• Ứng dụng kỹ thuật PCR
• Vi rút gây bệnh khảm vàng
• Cây hồ tiêu ở Việt Nam
• Bệnh khảm vàng trên cây hồ tiêu
• Phản ứng RT PCR
• kỹ thuật PCR
• ứng dụng PCR
• tài liệu về PCR
• nguyên lý PCR
• phản ứng PCR
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng
• Công nghệ sinh học
• Quy trình phát hiện Microsporidia
• Viêm loét giác mạc
• Kỹ thuật Realtime PCR
• Tạp chí khoa học
• Tạp chí y dược
• Y dược quân sự
• Kỹ thuật multiplex PCR
• Phòng chống não mô cầu
• Neisseria meningitidis
• Nhóm huyết thanh
• Tinh sạch ADN của N
• meningitidis
• Gen CtrA mã hóa
• Virus viêm gan B
• Phương pháp PCR lồng
• Kỹ thuật real time PCR
• Phương pháp tách chiết Hepatitis B virus DNA
• Sử dụng kỹ thuật Rapd Pcr
• Mối quan hệ di truyền
• Một số loài thuộc chi Calothrix Cyanobacteria
• Kỹ thuật Rapd Pcr
• Phản ứng RAPD PCR
• Ứng dụng kỹ thuật Real time PCR
• Xác định kiểu gen
• Bệnh viện đa khoa Đồng Tháp
• Ứng dụng kỹ thuật Realtime PCR
• Đột biến 455G A trên gen Fibrinogen Beta
• Bệnh nhân nhồi máu cơ tim trẻ tuổi
• Nhồi máu cơ tim trẻ tuổi
• Ứng dụng kỹ thuật PCR RFLP
• Kỹ thuật PCR RFLP
• Xác định các đột biến A2142G
• Gene 23s rRNA
• Đề kháng clarithromycin
• Vi khuẩn Helicobacter pylori
• Ứng dụng kỹ thuật RFLP
• Xác định đột biến gen SMN1
• Bệnh thoái hóa cơ tủy
• Thoái hóa cơ tủy
• Đột biến gen SMN1
• Đột biến gen
• Phương pháp PCR
• Phản ứng chuỗi trùng hợp
• Polymerase Chain Reaction
• Sinh học phân tử
• AND tái tổ hợp
• Thực tập tốt ngiệp
• Ứng dụng kỹ thuật QF PCR
• Chẩn đoán trước sinh các rối loạn nhiễm sắc thể
• Rối loạn nhiễm sắc thể thường gặp
• Phân tích kết quả QF PCR
• Ứng dụng kỹ thuật nested PCR
• Định type porcine circovirus type 2
• Đàn lợn nuôi
• Ngành chăn nuôi lợn
• Phương pháp tách ADN
• Phương pháp nested PCR
• Ứng dụng kỹ thuật chuỗi polymerase
• Một số loài bifidobacterium
• Thực phẩm chức năng
• Thực phẩm bổ sung
• di truyền học
• phương pháp giải nhanh sinh học
• tài liệu học môn sinh
• phát hiện gen gây tiêu chảy
• Ứng dụng kỹ thuật PCR – RFLP
• Xác định kiểu gene của vi rút
• Vi rút viêm gan B
• Đồ án điều dưỡng
• Đồ án y đa khoa
• Kiểu gene của HBV
• Xác định giới tính chim yến hàng aerodramus fuciphagus
• Chim yến hàng aerodramus fuciphagus
• Hệ sinh thái
• Đa dạng sinh học
• Ứng dụng kỹ thuật realtime PCR
• Chẩn đoán virus túi (sacbrood virus) nhiễm
• Đàn ong mật nuôi
• Thủ đô Hà Nội
• Phát hiện các gen VEB
• Ứng dụng kỹ thuật multiplex PCR
• Phát hiện các gen DIM
• Chủng vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa
• Phát hiện các gen AmpC
• giáo dục
• đào tạo
• cao đẳng
• đại học
• bài thuyết trình
• Ứng dụng PRC trong Y học
• Ứng dụng kỹ thuật One Step RT PCR
• Chẩn đoán bệnh cứng trái
• Vi rút (East Asian Passiflora Virus EAPV)
• Chanh leo ở Việt Nam
• Bệnh cứng trái trên chanh leo
• Ứng dụng kỹ thuật RT PCR
• Chẩn đoán bệnh do Corona virus
• Bệnh do Corona virus trên chó nuôi
• CCoV II trên nhóm giống chó ngoại
• Chẩn đoán bệnh do CCoV trên chó nuôi
• Chẩn đoán Feline Herpesvirus 1
• Chẩn đoán Feline Herpesvirus 1 (FHV 1) ở mèo
• Điều trị bệnh Feline Herpesvirus 1 trên mèo
• Viêm đường hô hấp ở mèo
• Tạp chí y học
• Nghiên cứu y học
• Bệnh bạch cầu kinh dòng hạt
• Kỹ thuật khuếch đại chuỗi gen
• Gen tổ hợp BCR ABL
• Kỹ thuật nuôi cấy tế bào