TAILIEUCHUNG - Tạo dòng biểu hiện tiết và khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a để tinh chế Endoglucanse A trong Bacillus subtilis

Kết quả khảo sát cho thấy protein CelA được tiết ra môi trường nuôi cấy và có thể tinh chế thông qua việc gắn kết của CBM3a lên cơ chất Regenerated Amorphous Cellulose (RAC). Nghiên cứu này làm tiền đề cho các nghiên cứu sâu hơn về khả năng ứng dụng CBM3a làm đuôi tinh chế protein tái tổ hợp trên hệ thống biểu hiện B. subtilis. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 19, SOÁ T3- 2016 Tạo dòng biểu hiện tiết và khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a để tinh chế Endoglucanse A trong Bacillus subtilis Nguyễn Hoàng Ngọc Phương Nguyễn Thành Phước Phạm Lương Thắng Nguyễn Đức Hoàng Trần Linh Thước Phan Thị Phượng Trang Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nhận ngày 27 tháng 07 năm 2015, nhận đăng ngày 06 tháng 05 năm 2016) TÓM TẮT Các phương pháp tinh chế protein tái tổ hợp truyền thống có giá thành cao và không phù hợp khi áp dụng tinh chế protein dạng tiết với lượng thể tích lớn. Cellulose Binding Module 3a (CBM3a) thuộc phức hệ cellulosome từ chủng Clostridium thermocellum là một module có ái lực cao với cơ chất cellulose. Như vậy, nếu dung hợp protein mục tiêu với CBM3a và nhờ vào ái lực của CBM3a với cơ chất cellulose sẽ giúp tinh chế được protein mục tiêu với giá thành thấp. Các khảo sát ứng dụng CBM3a trong tinh chế protein tái tổ hợp trước đây đa phần đều thực hiện trong hệ thống biểu hiện nội bào. Việc thu nhận protein từ dịch tiết hoặc sử dụng chế phẩm thô từ dịch tiết sẽ giúp quá trình sản xuất protein tái tổ hợp trên quy mô lớn được thuận lợi và đạt hiệu quả kinh tế cao. Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng hệ thống plasmid pHT để khảo sát tinh chế protein chỉ thị CelA (endoglucanase A) dung hợp với CBM3a dưới dạng tiết trên Bacillus subtilis WB800N. Kết quả khảo sát cho thấy protein CelA được tiết ra môi trường nuôi cấy và có thể tinh chế thông qua việc gắn kết của CBM3a lên cơ chất Regenerated Amorphous Cellulose (RAC). Nghiên cứu này làm tiền đề cho các nghiên cứu sâu hơn về khả năng ứng dụng CBM3a làm đuôi tinh chế protein tái tổ hợp trên hệ thống biểu hiện B. subtilis. Từ khóa: Bacillus subtilis, Cellulose Binding Module, Clostridium thermocellum, endoglucanase A, tinh chế protein MỞ ĐẦU Để thủy phân cellulose, vi khuẩn kị khí, ưa nhiệt C. thermocellum sử dụng phức hệ cellulosome có cấu tạo gồm một giá đỡ CipA và các enzyme phụ trợ [3]. CBM3a là module .

• Sinh học
• Tạo dòng biểu hiện tiết
• Khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a
• Tinh chế Endoglucanse A
• Bacillus subtilis
• Cellulose Binding Module
• Clostridium thermocellum
• Endoglucanase A
• Tinh chế protein
• Khả năng sử dụng đuôi CBM3a
• Endoglucanse A trong Bacillus subtilis
• Hệ thống biểu hiện B
• subtilis
• Tăng trưởng tế bào sừng KGF
• Tái tổ hợp dạng tiết ở nấm men
• Nấm men Pichia pastoris
• Sự điều hòa của promoter AOX1
• Kiểm soát promoter AOX1 cảm ứng bởi methanol
• Bài giảng Chế phẩm protein
• Định lượng chế phẩm protein
• Đánh giá chế phẩm protein
• Độ tinh sạch của chế phẩm protein
• Xác định hàm lượng protein
• Tính đồng thể của protein
• phân tích protein
• hoạt tính của một enzym
• quá trình tinh chế protein
• phân tích protein trên gen
• Tạp chí khoa học
• Hệ thống biểu hiện pHT
• Tinh chế protein tái tổ hợp
• Công nghệ sinh học
• Protein trị liệu
• protein thực phẩm
• sản xuất giò lụa
• đặc tính của protein
• Cơ chế tạo gel
• Quy trình sản xuất giò
• hình thành gel protein
• Tạp chí Y học
• Bài viết về y học
• Mô hình ức chế enzyme Acetylcholinesterase
• Protein docking
• Hóa tính toán
• Kỹ thuật protein docking
• tiểu luận
• công nghệ thực phẩm
• chế biến thực phẩm
• protein
• protein trong thực phẩm
• luận văn
• hệ thống gel lọc
• sắc ký ái lực
• định lƣợng protein
• đo mật độ quang
• Phƣơng pháp điện di
• Hệ số cô đặc
• Giải pháp bổ sung nước
• Chế phẩm protein đậu phộng
• Quá trình siêu lọc
• Mô hình dead – end
• Chế tạo keo dán sinh học
• Hợp chất thiên nhiên
• Keo dán sinh học
• Biến tính protein zein
• Biến tính protein zein với catechol
• Đồ án tốt nghiệp đại học
• Hoạt tính phân giải protein
• Xử lý nước thải giàu đạm
• Chế phẩm sinh học xử lý nước thải
• Hoạt tính protease
• chuyên đề sinh học
• tài liệu học môn sinh
• phương pháp học môn sinh
• Công nghệ Enzyme Protein
• Thành phần cấu tạo enzyme
• Trung tâm hoạt động của enzyme
• Tính đặc hiệu của enzyme
• Cơ chế tác dụng của enzyme
• Nghiên cứu y học
• Mô hình tương đồng
• Mô hình 3D pharmacophore
• Hoạt tính ức chế protein
• tính chất của invertase tự do
• chế phẩm invetarase
• phương pháp thu nhận chế phẩm invertase
• nồng độ protein
• Giá trị dinh dưỡng và các phương pháp chế biến sữa
• Giá trị dinh dưỡng
• Phương pháp chế biến sữa
• Quy trình kỹ thuật chế biến sữa
• Nhiệt độ đóng băng của sữa
• Tính chất oxy hóa khử của sữa
• Hệ thống protein của sữa
• Tạp chí Nông nghiệp
• Hoạt tính ức chế enzyme của cây xun
• Đặc tính sinh học Cây Xun
• Hợp chất acid trichadonic
• Hoạt động thu hái Cây Xun
• Bơm ngược MRP2
• Mô hình docking
• Chất ức chế bơm ngược ABCC2 MRP2
• Hoạt tính ức chế bơm
• Multidrug resistance associated protein 2
• Công cụ FlexX tích hợp trong LeadIT
• Trichobakin immunotoxin tái tổ hợp
• Ái lực Trichobakin
• Bảo quản protein tái tổ hợp
• Ức chế tế bào ung thư
• TBK tái tổ hợp
• Quy trình lên men tinh chế TBK
• Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang
• Hoạt tính ức chế chuyển vị
• Tế bào ung thư cổ tử cung HeLa
• Quy trình định lượng protein nội bào
• Phân tử sinh học
• Escherichia coli Rosetta2
• Endoglucanase tái tổ hợp
• Vòng thủy phân cơ chất
• Tinh sạch protein
• Muối natri clorua
• Tách dòng yếu tố sinh trưởng
• Yếu tố sinh trưởng nguyên bài sợi 10
• Sinh trưởng nguyên bài sợi 10 của người
• Tinh chế Protein tái tổ hợp hFGF 10
• Đặc tính của hFGF 10
• Chế biến thịt
• Ngành hàng thịt
• Qui trình giết mổ gia súc gia cầm
• Phân loại thịt nạc
• Đặc tính chức năng của protein thịt
• Cấu trúc thịt và quày thịt
• Các yếu tố ảnh hưởng đến thịt và quày thịt
• Phụ gia và gia vị
• Giáo trình Sinh lý dinh dưỡng
• Sinh lý dinh dưỡng
• Giáo trình nghề Chế biến món ăn
• Chức năng dinh dưỡng của Protein
• Cấu tạo ống tiêu hóa
• Quá trình hấp thụ thức ăn
• Tính toán khẩu phần ăn