TAILIEUCHUNG - Tạo dòng biểu hiện tiết và khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a tinh chế Endoglucanse A trong Bacillus subtilis

Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng hệ thống plasmid pHT để khảo sát tinh chế protein chỉ thị CelA (endoglucanase A) dung hợp với CBM3a dưới dạng tiết trên Bacillus subtilis WB800N. Kết quả khảo sát cho thấy protein CelA được tiết ra môi trường nuôi cấy và có thể tinh chế thông qua việc gắn kết của CBM3a lên cơ chất Regenerated Amorphous Cellulose (RAC). Nghiên cứu này làm tiền đề cho các nghiên cứu sâu hơn về khả năng ứng dụng CBM3a làm đuôi tinh chế protein tái tổ hợp trên hệ thống biểu hiện B. subtilis. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 19, SOÁ T3- 2016 Tạo dòng biểu hiện tiết và khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a để tinh chế Endoglucanse A trong Bacillus subtilis Nguyễn Hoàng Ngọc Phương Nguyễn Thành Phước Phạm Lương Thắng Nguyễn Đức Hoàng Trần Linh Thước Phan Thị Phượng Trang Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nhận ngày 27 tháng 07 năm 2015, nhận đăng ngày 06 tháng 05 năm 2016) TÓM TẮT Các phương pháp tinh chế protein tái tổ hợp truyền thống có giá thành cao và không phù hợp khi áp dụng tinh chế protein dạng tiết với lượng thể tích lớn. Cellulose Binding Module 3a (CBM3a) thuộc phức hệ cellulosome từ chủng Clostridium thermocellum là một module có ái lực cao với cơ chất cellulose. Như vậy, nếu dung hợp protein mục tiêu với CBM3a và nhờ vào ái lực của CBM3a với cơ chất cellulose sẽ giúp tinh chế được protein mục tiêu với giá thành thấp. Các khảo sát ứng dụng CBM3a trong tinh chế protein tái tổ hợp trước đây đa phần đều thực hiện trong hệ thống biểu hiện nội bào. Việc thu nhận protein từ dịch tiết hoặc sử dụng chế phẩm thô từ dịch tiết sẽ giúp quá trình sản xuất protein tái tổ hợp trên quy mô lớn được thuận lợi và đạt hiệu quả kinh tế cao. Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng hệ thống plasmid pHT để khảo sát tinh chế protein chỉ thị CelA (endoglucanase A) dung hợp với CBM3a dưới dạng tiết trên Bacillus subtilis WB800N. Kết quả khảo sát cho thấy protein CelA được tiết ra môi trường nuôi cấy và có thể tinh chế thông qua việc gắn kết của CBM3a lên cơ chất Regenerated Amorphous Cellulose (RAC). Nghiên cứu này làm tiền đề cho các nghiên cứu sâu hơn về khả năng ứng dụng CBM3a làm đuôi tinh chế protein tái tổ hợp trên hệ thống biểu hiện B. subtilis. Từ khóa: Bacillus subtilis, Cellulose Binding Module, Clostridium thermocellum, endoglucanase A, tinh chế protein MỞ ĐẦU Để thủy phân cellulose, vi khuẩn kị khí, ưa nhiệt C. thermocellum sử dụng phức hệ cellulosome có cấu tạo gồm một giá đỡ CipA và các enzyme phụ trợ [3]. CBM3a là module .

• Sinh học
• Tạo dòng biểu hiện tiết
• Khả năng sử dụng đuôi CBM3a
• Endoglucanse A trong Bacillus subtilis
• Tinh chế protein
• Hệ thống biểu hiện B
• subtilis
• Khảo sát khả năng sử dụng đuôi CBM3a
• Tinh chế Endoglucanse A
• Bacillus subtilis
• Cellulose Binding Module
• Clostridium thermocellum
• Endoglucanase A
• Tăng trưởng tế bào sừng KGF
• Tái tổ hợp dạng tiết ở nấm men
• Nấm men Pichia pastoris
• Sự điều hòa của promoter AOX1
• Kiểm soát promoter AOX1 cảm ứng bởi methanol
• Phân lập đặc tính của các chủng bacillus subtilis
• Xác định đặc tính của các chủng bacillus subtilis
• Chủng bacillus subtilis có phổ kháng khuẩn
• Phổ kháng khuẩn rộng từ tương ớt
• Tương ớt Mường Khương
• Studies on compatibility
• Compatibility of Bacillus subtilis
• Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn
• Chemical fungicides
• Nuôi trồng thủy sản
• Bài viết về ngư nghiệp
• Kiểm soát sinh học
• Bacillus subtilis Q16
• Bacillus subtilis Q111
• Bệnh gan thận mủ
• Edwardsiella ictaluri
• Dịch chiết nấm đông trùng hạ thảo
• Nấm đông trùng hạ thảo
• DNA của vi khuẩn Bacillus subtilis
• Vi khuẩn Bacillus subtilis bị chiếu xạ
• Chủng vi khuẩn Bacillus subtilis B
• Nitrogen vô cơ
• Nitrogen – ammonium (N NH4+)
• Chaetoceros subtilis var
• abnormis
• Môi trường bổ sung N – NH4+
• Vi tảo Chaetoceros subtilis
• Sinh lý thực vật
• Tạp chí Khoa học
• Tinh sạch sơ bộ enzyme α amylase
• Canh trường nuôi cấy bán rắn chủng Bacillus subtilis
• Chủng Bacillus subtilis
• Thử nghiệm thủy phân loại tinh bột
• Khả năng thủy phân Phytate và Cellulose
• Thủy phân Phytate và Cellulose
• Phytate và Cellulose
• Bã sắn chủng Bacillus subtilis C7
• Bacillus subtilis C7
• Nuôi cấy chủng Bacillus subtilis
• Môi trường dịch ép đầu tôm
• Thể sinh protease
• Chủng sinh protease B
• subtilis CB15
• Xác định hoạt tính protease
• Potential application
• Bacillus subtilis SPB1 lipopeptides
• Toothpaste formulation
• Biosurfactant based product exhibited
• Nghiên cứu sản xuất Levan
• Levan từ Baillus subtilis natto D
• Sản xuất Levan
• Baillus subtilis natto D
• Phương pháp bề mặt đáp ứng
• Bacillus subtilis DKT
• Comamonas testosterone KT5
• Immobilized cells
• KT5 AND Bacillus subtilis DKT
• Immobilized bacteria
• Azo dyes
• Methyl orange
• Bacillus subtilis BRTSI 3 Isolated
• Textile effluents
• Recalcitrant textile azo dye
• B subtilis
• Per cent inhibition
• Fruit rot of Chilli
• Bacillus subtilis against major pathogen
• Chilli colletotrichum capsici
• Solid state fermentation
• Industrial applications
• Agro residues for the production
• Colletotrichum capsici
• Chillies against
• Bacillus subtilis mediated systemic resistance
• Managing the fruit
• Penicillium rot
• Khasi mandarin
• Native bacillus subtilis
• Postharvest penicillium rot pathogen
• Molecular identification
• Classical optimization
• Plackett Burman Design
• Response surface optimization
• New probiotic strain Bacillus subtilis P6
• Bacillus subtilis P6
• Phân lập vi khuẩn thuộc nhóm Bacillus subtilis
• Nấm Colletotrichum scovillei
• Bệnh thán thư trên ớt
• Tuyển chọn vi khuẩn thuộc nhóm Bacillus subtilis
• Nấm Colletotrichum scovillei gây bệnh thasnthuw trên ớt
• Evaluation of antagonistic potential
• Antagonistic potential
• Plant pathogenic fungi
• Đồ án tốt nghiệp đại học
• Công nghệ sinh học
• Phân lập Bacillus subtilis
• Vi khuẩn Bacillus subtilis
• Phương pháp phân lập vi khuẩn
• Phương pháp đục lỗ thạch
• Vi khuẩn Bacillus subtilis Natto
• Sinh tổng hợp protease
• Hệ thống phân loại Bacillus subtilis Natto
• Phương pháp tủa enzyme protease
• Phân hủy huyết khối nội sinh
• Chủng Bacillus subtilis BD170
• Gen natC10 mã hóa nattokinase
• Tinh sạch protein
• Chủng B subtilis tái tổ hợp
• Khảo sát hoạt độ enzyme protease
• Bacillus subtilis cố định
• Gel alginate
• Công nghệ sản xuất enzyme
• Tế bào vi khuẩn Bacillus subtilis
• luận văn
• Cấu tạo kháng nguyên
• Kiểm soát dich bệnh
• Độc tính của Bacillus subtilis
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học
• Luận văn Thạc sĩ
• Luận văn Thạc sĩ ngành Vi sinh
• Phương pháp điện biến nạp
• Tần suất biến nạp