TAILIEUCHUNG - A Practical Introduction to Structure, Mechanism, and Data Analysis - Part 10

Peptide tương tự cũng đã được tổng hợp với một nắp acetyl Hcontaining lysine N-thiết bị đầu cuối để truyền đạt một radiolabel peptide và các sản phẩm photolysis. Cleavage của photoproduct với cyanogen bromide hoặc S. aureus V8 proteinase dẫn đến sự phân tách chọn lọc của trái phiếu amide trong calmodulin polypeptide mà không có bất kỳ sự phân tách của các phối tử peptide | 348 TIME-DEPENDENT INHIBITION calmodulin and subsequent photolysis led to a covalent peptide - calmodulin complex that could be separated from free calmodulin by SDS-PAGE or reversed phase HPLC. The same peptide was also synthesized with a 3H-containing acetyl cap on the N-terminal lysine to impart a radiolabel to the peptide and photolysis product. Cleavage of the photoproduct with cyanogen bromide or s. aureus V8 proteinase led to selective cleavage of amide bonds within the calmodulin polypeptide without any cleavage of the peptide ligand. The tritium-containing cleavage product was separated by reversed phase HPLC and subjected to N-terminal amino acid sequence analysis. From these studies DeGrado and coworkers were able to identify Met 144 and Met 71 as the primary sites of photolabeling. These results allowed the researchers to build a model of the three-dimensional structure of the peptide binding pocket in calmodulin. Affinity labeling of enzymes is a common and powerful tool for studying enzyme structure and mechanism. We have barely scratched the surface in our brief description of these methods. Fortunately there are several excellent in-depth reviews of these methods in the literature. General affinity labeling is covered in a dedicated volume of Methods in Enzymology Jakoby and Wilchek 1977 . General chemical modification of proteins is covered well in the texts by Lundblad 1991 and Glazer et al. 1975 . Photoaffinity labeling is covered in the Methods in Enzymology volume edited by Jakoby and Wilchek 1977 and also in review articles by Dorman and Prestwich 1994 and by Chowdhry 1979 . These references should serve as good starting points for the reader who wishes to explore these tools in greater detail. SUMMARY In this chapter we have described the behavior of enzyme inhibitors that elicit their inhibitory effects slowly on the time scale of enzyme turnover. These slow binding or time-dependent inhibitors can operate by any of several distinct .

• Hoá học
• đại cương về sắc ký khí
• tài liệu về sắc ký khí
• phản ứng enzyme
• phương pháp sắc ký khí
• phân tích sắc ký khí
• Bài giảng Đại cương về sắc ký
• Sắc ký khí
• Sơ đồ một sắc ký
• Phương trình sắc ký
• Đại lượng sắc ký
• phương pháp tách
• máy sắc ký khí
• định tính sắc ký khí
• hệ sắc ký khí
• hóa phân tích
• kĩ thuật hoá học
• lý thuyết sắc ký khí
• sắc khí rắn
• sắc khí lỏng
• hoạt động của sắc ký khí
• sắc ký lỏng
• máy sắc ký
• lý thuyết sắc ký
• bài giảng kiểm nghiệm thực phẩm
• giáo trình kiểm nghiệm thực phẩm
• tài liêu
• kiểm nghiệm thực phẩm
• phương pháp kiểm nghiệm thực phẩm
• công nghệ kiểm nghiệm thực phẩm