TAILIEUCHUNG - Genetic Engineering Basics New Applications and Responsibilities Part 5

Tham khảo tài liệu 'genetic engineering basics new applications and responsibilities part 5', khoa học tự nhiên, công nghệ sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | 70 Genetic Engineering - Basics New Applications and Responsibilities homology with H. parvula. Hence both enzymes are considered to be almost identical and the similar effect of this mutation could be expected for L. mingrelica luciferase. A rational protein design approach was used to increase thermal stability of L. mingrelica luciferase and prevent the detrimental effect of the of the A217L mutation on its activity by combining the mutation A217L with additional substitutions in its vicinity. The three-dimensional structure of the firefly luciferase and the multiple sequence alignment of beetle luciferases were analyzed to identify these additional substitutions Koksharov Ugarova 2011a . Comparison of the A217 environment in L. mingrelica luciferase with that of L. cruciata and L. lateralis luciferases showed only 3 significant differences G216N I212L S398M. Another difference was the change I212L but it is unlikely to be important because the properties of Leu and Ile are very close. On the other hand the neighboring residue G216 and the more remote S398 are characteristic for the small subgroup of luciferases very close in homology to L. mingrelica luciferase including H. parvula luciferase . We surmised that the elimination of these differences between two groups of luciferases would lead to the A217 environment similar to that of L. cruciata and L. lateralis luciferases which could possibly prevent the loss of activity accompanying the substitution A217L. First we assumed that that changing the neighboring residue G216 would be sufficient to retain the enzyme activity Therefore the double mutant G216N A217L was constructed. Since this double mutant still showed low activity we introduced the additional substitution S398M of the less close residue. This led to a stable and active mutant of L. mingrelica luciferase Table 1 . Enzyme Mutant Relative specific activity Temperature of inactivation Half-life min Reference Luciola cruciata luciferase wild-type 100 .

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.