TAILIEUCHUNG - Polymerase Chain Reaction - Các vấn đề cơ bản

PRC là thử nghiệm nhân bản một đoạn DNA trong ống nghiệm dựa vào các chu kỳ nhiệt. Thử nghiệm được thực hiện trong một ống nghiệm nhỏ chứa dung dịch phản ứng (gọi là PCR mix) có thể tích vào khoảng từ 10 - 15 ml với các thành phần chủ yếu: enzyme polymerase chịu nhiệt, thường được gọi là Taq polymerase | Polymerase Chain Reaction Các vấn đề cơ bản PCR là gì PCR là thử nghiệm nhân bản một đoạn DNA trong ống nghiệm dựa vào các chu kỳ nhiệt. Thử nghiệm được thực hiện trong một ống nghiệm nhỏ chứa dung dịch phản ứng gọi là PCR mix có thể tích vào khoảng từ 10pl đến 50pl với các thành phần chủ yếu là 1 enzyme polymerase chịu nhiệt thường được gọi là Taq polymerase có hoạt tính tối đa ở 72oC và bền được với nhiệt độ 2 4 loại desoxyribonucleotide dNTP là Adenine Thymine Guanine và Cytosine dATP dTTP dGTP và dCTP 3 DNA chứa các đoạn DNA đích sẽ được nhân bản trong ống phản ứng 4 các đoạn mồi primer xuôi và ngược là các đoạn oligonucleotide có chiều dài khoảng 20 - 30 nucleotide có trình tự bổ sung một cách đặc hiệu với trình tự của 2 đầu đoạn DNA sẽ được nhân bản 5 ion Mg trong muối MgCl2 ở nồng độ thích hợp 6 dung dịch đệm Tris-KCl để làm dung môi thích hợp cho phản ứng. Khi ống nghiệm phản ứng này được cho vào buồng ủ chu kỳ nhiệt của máy luân nhiệt thermal cycler mà chúng ta thường gọi là máy PCR chương trình nhiệt độ trong máy sẽ làm cho nhiệt độ trong buồng ủ nhiệt của máy thay đổi theo chu kỳ nhờ vậy mà phản ứng nhân bản DNA sẽ xảy ra. Nguyên tắc của PCR về mặt nguyên tắc một chu kỳ nhiệt độ sẽ bao gồm 3 giai đoạn nhiệt độ hình 1 1 Đầu tiên nhiệt độ sẽ được đưa lên 94oC ở nhiệt độ này các liên kết hydro của mạch đôi DNA sẽ bị mất đi nhờ vậy DNA đích bị biến tính thành 94 C Biến tính 55oC-65oC Bắt cặp 72oC Kéo dài Chu kỳ Chu kỳ 2 Chu kỳ 3 Chu kỳ 4 các mạch đơn giai đoạn Hình 1 Nguyên tắc của PCR là nhân bản DNA đích qua các chu kỳ nhiệt 9 nhiệt độ này được gọi là giai đoạn biến tính. 2 Kế đó nhiệt độ sẽ được hạ đến 55oC-65oC là nhiệt độ thích hợp để các đoạn mồi tìm đến bắt cặp bổ sung vào hai đầu của đoạn DNA đích giai đoạn nhiệt độ này được gọi là giai đoạn bắt cặp. 3 Cuối cùng nhiệt độ được đưa lên 72oC là nhiệt độ thích hợp cho hoạt tính của enzyme Taq polymerase để kéo các dNTP lại đầu 3 của đoạn mồi đang bắt cặp trên đầu 5 của sợi DNA đích để bắt nguồn cho sự .

• Sinh học
• Polymerase Chain Reaction
• thử nghiệm nhân bản DNA
• PRC basic
• nguyên tắc của PRC
• lịch sử phát minh PCR
• Bài giảng Polymerase Chain Reaction
• Taq polymerase
• Enzyme bền nhiệt
• Thiết kế primer
• PCR cải biến
• Bombyx mori L
• Grasserie virus
• Detection of grasserie virus
• Bovine papilloma
• Polymerase chain reaction in cattle
• Detection of bovine papillomavirus
• Bovine papillomavirus in cutaneous lesions
• Medicinal and aromatic plants
• Rapid DNA isolation
• Secondary metabolites
• Subsequent polymerase chain reaction
• L monocytogenes
• Chicken meat
• Areas of chennai
• Microbial quality (Listeria monocytogenes)
• Chicken meat by polymerase chain reaction
• Diagnosis of equine herpes virus
• Equine herpes virus 4 infection
• Horses showing symptoms of respiratory disease
• Tạp chí y học
• Nghiên cứu y học
• Mycobacterium tuberculosis và mycobacterirum khác mycobacterium tuberculosis
• Bệnh lý lao da
• Phản ứng chuỗi polymerase
• kỹ thuật PCR
• DNA
• phương pháp khuếch đại đoạn DNA
• nghiên cứu sinh học
• sinh học
• bài giảng sinh học
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học
• Ứng dụng phương pháp PCR
• Sự nhiễm vi sinh vật gây bệnh
• Thực phẩm đường phố
• VSV gây bênh trong TP đường phố
• C perfringens trong thực phẩm đường phố
• certification of conventional soybean seeds and grains
• detection of transgenic soybean
• polymerase chain reaction (PCR)
• Roundup Ready™ (RR™) soybean
• Virus cúm gia cầm A H5N1
• Kỹ thuật Multiplex Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction
• Luận văn thạc sĩ khoa học
• Virus cúm A
• Sinh học thực nghiệm
• nhuộm Haematoxylin và Eosin
• luận văn thủy sản
• nuôi trồng thuỷ sản
• giải pháp phát triển
• ngành thủy sản
• chuyên đề thực tập
• Tạp chí khoa học
• Tạp chí y dược
• Y dược quân sự
• Kỹ thuật reverse transcription polymerase chain reaction
• Xác định virut Ebola
• Định lượng hepatitis B virus DNA
• Kỹ thuật real time polymerase chain reaction
• Nhiễm virus viêm gan B
• Týp gen caga và vaca
• Phương pháp multiplex polymerase chain reaction
• Viêm dạ dày
• Bacterial vaginosis
• Multiplex polymerase chain reaction
• Bacterial vaginosis detection
• Serious complications affecting
• Long term health of women
• BMC Pediatrics
• HIV 1 infection
• Filter paper dried blood spots
• HIV 1 diagnosis
• Early diagnosis
• Early diagnosis of leptospirosis
• Clinical diagnosis
• Leptospirosis during
• Presence of campylobacter jejuni
• Cross contamination
• Food borne bacterial illness
• Antibiotic treatment
• Rapid enterovirus polymerase chain reaction
• Aseptic meningitis
• Causative viral infections
• Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis
• Nested PCR
• ZiehlNeelsen staining
• Nested polymerase chain reaction
• Diagnosis of paratuberculosis
• Theileria annulata
• Cattle calves
• Cross bred
• Breed related hospital prevalence
• Theileria annulata infection in cattle calves confirmed
• Enzyme linked immunosorbent assay
• CMV DNA
• Pregnant women
• Detection of cytomegalovirus
• PALCAM selective agar
• BHI brothand PCR
• Molecular polymerase chain reaction
• Employing conventional isolation techniques
• Klebsiella oxytoca
• Molecular diagnosis
• Polymerase chain reaction targeted
• polygalacturonase gene
• Molecular discrimination of klebsiella oxytoca