TAILIEUCHUNG - Phân tích trình tự nucleotit gen hormon sinh trưởng

Số lượng hormone sinh trưởng ở lợn có liên quan đến khả năng vỗ béo, thành phần thân thịt, chất lượng thịt và khả năng chống lại các stress (Geldmann và cộng sự, 1997). Sự đa hình gen hormone sinh trưởng còn ảnh hưởng đến khả năng tăng trọng ngày, tỷ lệ nạc, mỡ và nồng độ hormone sinh trưởng trong huyết thanh (Nielsen và cs, 1995). Sự khác biệt về số lượng hormone sinh trưởng là do sự sai khác di truyền ở gen hormone sinh . | Phân tích trình tự nucleotit gen hormon sinh trưởng của một số giống lợn Việt nam 1. Giới thiệu Số lượng hormone sinh trưởng ở lợn có liên quan đến khả năng vỗ béo thành phần thân thịt chất lượng thịt và khả năng chống lại các stress Geldmann và cộng sự 1997 . Sự đa hình gen hormone sinh trưởng còn ảnh hưởng đến khả năng tăng trọng ngày tỷ lệ nạc mỡ và nồng độ hormone sinh trưởng trong huyết thanh Nielsen và cs 1995 . Sự khác biệt về số lượng hormone sinh trưởng là do sự sai khác di truyền ở gen hormone sinh trưởng và các gen điều hoà khác của trục hormone. Gen hormone sinh trưởng của lợn nằm trên cánh tay p của nhiễm sắc thể số 12 Yerle và cs 1993 Chowdhary và cs 1994 vùng mã hoá gồm 5 exon có chiều dài khoảng 1 7 kb Vize và Wells 1997 . Mục đích của chúng tôi là tiến hành giải trình tự đoạn gen từ nucleotit 380 đến nuleotit 802 của một số giống lợn nội nhằm phát hiện ra sự thay đổi của một số nuleotit trong exon II của gen hormone sinh trưởng. 2. Đối tượng và phương pháp . Đối tượng ADN được tách từ mẫu máu của các giống lợn nội Móng Cái ỉ và H mông . . Phương pháp lấy mẫu và tách ADN Mỗi mẫu lấy 0 5 ml máu chống đông bằng EDTA và sử dụng 100 m l máu để tách ADN theo phương pháp kít của hãng Sepagene Nhật bản . Phương pháp nhân gen PCR Chúng tôi sử dụng primer được thiết kế bởi Eiji Kobayashi và cs 1999 có trình tự như sau Mồi xuôi 5 -GAGGCCAAGTTTTAAATGTCCCTG-3 Mồi ngược 5 -GTGTAAACTGAAGGGGATTCCCAA-3 Thành phần và điều kiện phản ứng PCR theo phương pháp Eiji Kobayashi và cs 1999 . Phương pháp giải trình tự gen Giải trình tự nucleotit được thực hiện theo các bước sau Sản phẩm sau PCR được làm sạch bằng Pre-sequence kít gồm 5 m l ADN-PCR cần xác định trình tự 0 5 m l exonuclease III 10 UI trong 20 mM Tris-HCl pH7 5 5 mM 2 mercaptoethanol 50 Glycerol 0 5 m l shrimp alkaline phosphatase 2 UI m l trong 25 mM Tris-HCl pH7 6 1 mM MgCl2 0 1mM ZnCl2 50 Glycerol . ủ phản ứng ở 370C trong 15 phút sau đó ủ ở 800C. Thêm vào phản ứng 2 m l Big dye terminator 3 m

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.