TAILIEUCHUNG - Phân lập gien mã hóa Protein vận chuyển Lipit ở cây đậu xanh
Bài viết trình bày kết quả phân lập gien LTP, gien mã hóa Protein vận chuyển Lipit ở cây đậu xanh địa phương của tỉnh Cao Bằng. Để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu bài viết. | Phõn lập gien mó húa Protein vận chuyển Lipit ở cõy đậu xanh 31(1): 92-96 Tạp chí Sinh học 3-2009 PHÂN LậP GiEN M HóA PRôTêIN VậN CHUYểN LIPíT ở CÂY ĐậU XANH NGUYễN Vũ THANH THANH Trường đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên CHU HOàNG MậU Đại học Thái Nguyên Các protein vận chuyển lipít LTP (Lipid trình bày ở bảng 1: Transfer Proteins - LTP) là protein có liên quan Bảng 1 tới dặc tính chịu khô hạn ở thực vật. LTP có Cặp mồi nhân gien LTP khối lượng phân tử khoảng 9,12 kDa và có 8 phân tử xystein làm nhiệm vụ tạo ra 4 cầu nối Nhiệt đisulfit [5]. LTP có khả năng xúc tác tới sự vận ’ ’ độ Mồi Trình tự mồi (5 -3 ) chuyển phốtpholipit giữa các lớp màng của tế gắn bào [2, 3] và có thể hỗ trợ việc tạo ra lớp sáp mồi hoặc lớp biểu bì giúp thực vật bảo vệ, phản ứng Xuôi atggctagcctgaaggttgc 56oC và đáp ứng lại những thay đổi của môi trường Ngược ttacttgatgttagcgcagtt 56oC [3, 5]. Trong những năm gần đây, có nhiều công 2. Ph−ơng pháp trình nghiên cứu và phân lập gien LTP từ cây ADN tổng số được tách chiết theo ph−ơng Arabidopsis thaniana L. [1], Zea mays L. [8], pháp Gawel và Jarnet (1991) có cải tiến [4]. Triticum L. [7], Vigna radiata L. [6] và Oryza Nhân gien LTP bằng kỹ thuật PCR. PCR sativa L. [9]. được tiến hành với tổng thể tích phản ứng 50 àl Dựa vào trình tự của gien mT hoá protein gồm: ADN mẫu (50 ng/àl) 4 àl, mồi (10 pM) LTP đT công bố trên Ngân hàng gien Quốc tế 4 àl, dNTP (2,5 mM) 4 àl, MgCl2 (25 mM) 5 àl, với mT số AY300807, chúng tôi đT thiết kế cặp Taq polymeraza (5 unit/àl) 0,8 àl, buffer PCR mồi đặc hiệu để khuếch đại gien mT hoá protein (10X) 5 àl, H2O khử ion 27,2 àl. LTP của đậu xanh bằng kỹ thuật PCR, nhằm phục vụ cho việc nghiên cứu các giống đậu xanh Chu trình nhiệt bao gồm các bước sau: 94oC có khả năng chống chịu với điều kiện bất lợi của - 3 phút; 94oC - 50 giây, 56oC - 1 phút, 72oC - 1 môi trường. Đoạn gien LTP được nhân lên bằng phút 30 giây lặp lại 30 chu kì; 72oC - 10 phút và ph−ơng pháp PCR
đang nạp các trang xem trước
