TAILIEUCHUNG - Nghiên cứu cải thiện mức độ biểu hiện của kháng nguyên bám dính k88 tái tổ hợp phân lập từ Escherichia coli mang độc tố đường ruột của lợn con cai sữa
Bài viết trình bày kết quả tối ưu biểu hiện của kháng nguyên này ở quy mô phòng thí nghiệm. Kháng nguyên bám dính là các yếu tố gây độc quan trọng của các chủng E. coli gây bệnh đường ruột (ETEC), từ đó mà vi khuẩn có khả năng xâm nhiễm vào ruột non của vật chủ. | TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 120-125 NGHIÊN CỨU CẢI THIỆN MỨC ĐỘ BIỂU HIỆN CỦA KHÁNG NGUYÊN BÁM DÍNH K88 TÁI TỔ HỢP PHÂN LẬP TỪ Escherichia coli MANG ĐỘC TỐ ĐƯỜNG RUỘT CỦA LỢN CON CAI SỮA Nguyễn Hoàng Lộc1*, Nguyễn Thị Khánh Quỳnh3, Hoàng Tấn Quảng2, Trần Thúy Lan2, Lê Mỹ Tiểu Ngọc2, Đinh Thị Bích Lân2, Phùng Thăng Long4 1 Trường đại học Khoa học, Đại học Huế, *nhloc@ 2 Viện Công nghệ sinh học, Đại học Huế 3 Sở Khoa học và Công nghệ Thừa Thiên - Huế 4 Trường đại học Nông Lâm, Đại học Huế TÓM TẮT: Kháng nguyên bám dính là các yếu tố gây độc quan trọng của các chủng E. coli gây bệnh đường ruột (ETEC), từ đó mà vi khuẩn có khả năng xâm nhiễm vào ruột non của vật chủ. K88 (F4) là kháng nguyên bám dính đầu tiên được phát hiện trong các chủng ETEC phân lập từ lợn và là kháng nguyên bám dính phổ biến nhất ở các chủng E. coli gây bệnh tiêu chảy trên lợn con sau cai sữa. Chúng tôi đã tạo dòng và biểu hiện thành công gen faeG mã hóa kháng nguyên bám dính K88-1NT trong vi khuẩn E. coli BL21 (DE3). Kết quả tối ưu hóa các điều kiện sản xuất kháng nguyên tái tổ hợp K88-1NT cho thấy chúng được sản xuất mạnh nhất sau 6 giờ cảm ứng bằng lactose 0,1%, mật độ tế bào (OD600) đạt 0,5 ở 35oC. Môi trường cảm ứng bao gồm 1%, KH2PO4 0,3%, NaCl 0,05%, (NH4)2SO4 1%, 0,2%, glucose 1,5%, tryptone 1%, và dịch chiết nấm men 1%. Sản phẩm K88-1NT tinh sạch bằng sắc ký ái lực Ni2+ có khối lượng phân tử khoảng 31 kDa. Từ khóa: Escherichia coli, độc tố đường ruột, kháng nguyên bám dính, lợn con cai sữa. MỞ ĐẦU Kháng nguyên bám dính là các yếu tố gây độc quan trọng của các chủng E. coli gây bệnh đường ruột, nhờ các yếu tố bám dính có trên bề mặt như K88, K99, 987P, F17, F18 và F41, vi khuẩn E. coli mới có khả năng bám và xâm nhiễm vào ruột non của vật chủ để gây bệnh [13]. Hầu hết các bộ phận bám dính đều được tìm thấy trên các vi khuẩn đường ruột và được gọi là fimbriae. Fimbriae là những cấu trúc liên kết có tính đa phân tử, khả năng miễn dịch cao và .
đang nạp các trang xem trước
