TAILIEUCHUNG - Xác định tính đặc hiệu enzym giới hạn bằng phân tích đầu tận cùng của các đoạn ADN bị cắt

Các enzym giới hạn cắt ADN kép ở các vị trí đặc hiệu ngoài hoặc trong trình tự nucleotid đ-ợc nhận ra và để lại 3 dạng các đầu tận cùng: phẳng; chéo có ADN đơn 3’ thừa, chéo có ADN đơn 5’ thừa. Nghiên cứu này dùng một ph-ơng pháp cho phép xác định kiểu cắt của các enzym giới hạn. Ph-ơng pháp trình tự Sanger đ-ợc sử dụng để phân tích ADN ở xung quanh vị trí cắt nh-ng dùng chất không phóng xạ. Song song các đoạn ADN tổng hợp kéo dài đ-ợc cắt bằng enzym. | ______________________________________________TCNCYH 23 3 2003 XÁC ĐỊNH TÍNH ĐẶC HIỆU ENZyM GIỚI HẠN BẰNG PHÂN TÍCH ĐẦU TẬN CÙNG CỦA CÁC ĐOẠN ADN BỊ CẮT Lê Thị Kim Tuyến Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương Hà Nội Các enzym giới hạn cắt ADN kép ở các vị trí đặc hiệu ngoài hoặc trong trình tự nucleotid được nhận ra và để lại 3 dạng các đầu tận cùng phẳng chéo có ADN đơn 3 thừa chéo có ADN đơn 5 thừa. Nghiên cứu này dùng một phương pháp cho phép xác định kiểu cắt của các enzym giới hạn. Phương pháp giải trình tự Sanger được sử dụng để phân tích ADN ở xung quanh vị trí cắt nhưng dùng chất không phóng xạ. Song song các đoạn ADN tổng hợp kéo dài được cắt bằng enzym giới hạn. Phản ứng Klenow mang hai hoạt tính là tổng hợp ADN 5 3 và exonucleasa 3 5 cho phép xác định kiểu cắt của enzym giới hạn. Kết quả đã cho phép xác định vị trí cắt của hai enzym mới. Điểm cắt Sml I nằm trong trình tự đối xứng được nhận 5 - Cị TPuPy AỲG - 3 . BciV I nhận ra một trình tự không đố i xứng và cắt ngoài vị trí nhận 5 - GTATCC N 6 ị - 3 3 - CATAGG N 5 T - 5 . I. ĐẶT VẤN ĐỀ Trong y học việc chẩn đoán và nghiên cứu bệnh lý ở mức đô ADN ngày càng quan trọng. Để phân tích được các ADN genom cần dùng đến phản ứng cắt ADN giới hạn để tạo thành các mảnh nhỏ có kích thước nhất định. Phản ứng này được xúc tác bắng các enzym giới hạn thuỷ phân ADN ở các vị trí quyết định sau khi đã nhận trình tự đặc hiệu gồm từ 4 đến 8 bp. Tập hợp các enzym giới hạn là hết sức đa dạng và có nguồn gốc phong phú là các vi khuẩn không phân biệt loại chi. Hiện nay trên thế giới đã thu thập hơn 200 enzym giới hạn có tính đặc hiệu khác nhau. Nếu tính đủ các loại trình tự từ 4 đến 8 nucleotid có tính liên tục hay không số enzym giới hạn phải hơn 1000 1 . Với mục đích có được enzym để có thể cắt ADN ở bất cứ vị trí mong muốn nào chúng tôi tiếp tục khảo sát các enzym giới hạn có tính đặc hiệu mới 2 . Đến nay các enzym giới hạn được xác định chủ yếu bằng các trình tự nucleotid được nhận ra trên ADN. Nhưng các enzym giới hạn nhận ra .

• Báo cáo khoa học
• đặc hiệu enzym
• báo cáo khoa học
• nghiên cứu y học
• tài liệu y học
• chăm sóc sức khỏe
• các đoạn ADN
• Đề cương chi tiết học phần
• Hoá sinh đại cương
• Tác dụng của enzym
• Tính đặc hiệu của enzym
• Trao đổi protein
• Trao đổi carbohydrate
• Aptamer đặc hiệu ricin
• Kỹ thuật SELEX
• Tỷ lệ nhân sợi đơn ADN
• Cặp mồi lệch thông qua phản ứng PCR
• Quá trình sàng lọc aptamer đặc hiệu ricin
• Phương pháp Enzym – Linked Aptamer Assay
• cơ chế enzyme
• hiện tượng xúc tác sinh học
• Lịch sử về enzym
• tính đặc hiệu của enzyme
• Đặc hiệu tuyệt đối
• Dược lý học thú y
• Dược lực học của thuốc
• Cơ chế tác dụng của thuốc trên enzym
• Cơ chế tác dụng không đặc hiệu của thuốc
• Thuốc tác dụng do liên kết với receptor đặc hiệu
• Y học cộng đồng
• Bài viết về y học
• Hệ thống R M II
• Enzym giới hạn
• Xác định tính đặc hiệu
• Nghiên cứu in silico
• Luận văn Thạc sĩ Hóa học
• Kappaphycus alvarezii
• Rọng sụn
• Cấu trúc polysaccharide thủy phân
• Chất kích thích sinh trưởng
• Bài giảng Enzyme và sự xúc tác sinh học
• Enzyme và sự xúc tác sinh học
• Xúc tác sinh học
• Thuyết hợp chất trung gian
• Thuyết tiếp xúc cảm ứng
• Ung thư vòm mũi họng
• Cell free ADN EBV
• Mô bệnh học
• Giai đoạn bệnh ung thư vòm mũi họng
• Điều trị bệnh ung thư vòm mũi họng
• Công nghệ sinh học
• Kỹ thuật nhân giống cây trồng
• Công tác phục vụ giám định loài
• Mã vạch ADN
• Bảo tồn loài Áo cộc
• ADN
• in vitro
• ligase
• phương pháp tái tổ hợp
• tái tổ hợp
• đoạn ADN
• báo cáo khao học
• báo cáo sinh học
• báo cáo về thủy sản
• các tài liệu về sinh học
• tài liệu nghiên cứu về vi sinh vật