TAILIEUCHUNG - Ebook Trichobakin và immunotoxin tái tổ hợp: Phần 2 - Phan Văn Chi, Trần Bích Nhi

Phần 2 cuốn sách "Trichobakin và immunotoxin tái tổ hợp" tiếp tục giới hiệu đến bạn đọc nội dung tiếp theo từ chương VI đến chương X về các vấn đề: Thay đổi trình tự Amino acid và ái lực của Trichobakin tái tổ hợp và các dẫn xuất đối với Cm- sepharose, nhận dạng, xác định TBK tái tổ hợp và các dẫn xuất trên hệ khối phổ maldi-tof ms và ms/ms, quy trình lên men, tinh chế và bảo quản TBK và các dẫn xuất ở qui mô 5 lit,. và các nội dung khác. Cuốn sách là tài liệu để giảng dạy cho các sinh viên, học viên cao học và nghiên cứu sinh các chuyên ngành sinh học, công nghệ sinh học và bạn đọc quan tâm đến lĩnh vực này. | 133 Chương VI THAY ĐỔI TRÌNH Tự AMINO ACID VÀ ÁI Lực CỦA TRICHOBAKIN TÁI TỔ HỢP VÀ CÁC DAN XUẤT ĐỐI VỚI CM-SEPHAROSE Chương V đã được giới thiệu với các kết quả thiết kế tạo một số dạng protein lai tái tổ hợp trên cơ sở trình tự gen mã hóa cho Trichobakin TBK gồm hai dạng chính i biến đổi về trình tự amino acid ở đầu amino đầu N tạo các protein lai PBL-2 ATF-TBK PBL-3 GnRH-TBK PbL-5 TGF-TBK và ii biến đổi tại đầu carboxyl đầu C trong trường hợp PBL-4 mini-TBK . Các dẫn xuất của TBK này đã được biểu hiện ở E. coli và đã được xác định tinh chế. Chương VI tiếp theo sẽ trình bày một số kết quả nghiên cứu về sự thay đổi cấu trúc bậc một của TBK và các dẫn xuất đối với một số đặc tính hóa lý như khối lượng phân tử pI và ái lực của các protein tái tổ hợp đối với CM-Sepharose. . Mức độ biểu hiện của TBK và các dẫn xuất Để biểu hiện protein các vector biểu hiện tái tổ hợp sau khi được thiết kế pQV pGnRH-TBK puPA-TBK và pMTBK được biến nạp vào chủng vi khuẩn E. coli BL21 DE3 và nuôi cấy trong môi trường LB lỏng có cảm ứng bằng IPTG. Các mẫu tế bào được thu tại các thời điểm 0 1 2 3 giờ sau khi cảm ứng. Dịch chiết protein tổng số của các mẫu tế bào được phân tích bằng SDS-PAGE. Kết quả điện di SDS-PAGE cho thấy trong dịch chiết protein tổng số của các mẫu tế bào thu tại các thời điểm khác nhau sau khi được cảm ứng bằng IPTG có xuất hiện một băng protein mới có trọng lượng phân tử phù hợp với kết quả tính toán lý thuyết đối với từng trường hợp cụ thể. Để có thể khẳng định mức độ biểu hiện trên phản ứng Western blot đã được tiến hành kiểm tra với tất cả các mẫu biểu hiện với kháng thể kháng TBK. Các clone biểu hiện đều 134 Phan Vân Chi Nguyễn Bích Nhi cho kết quả dương tính điều đó cho thấy đã thu được các protein tái tổ hợp mong muốn Phan Van Chi et al 2001a Lê Thị Bích Thảo et al 2002 Đặng Thành Nam et al 2003 Lê Thị Bích Thảo et al 2003 2007 . Tế bào E. coli chủng BL21 DE3 chứa vector biểu hiện pQV pGnRH-TBK puPA-TBK và pMTBK đã được chứng minh là có khả năng biểu hiện .

• Hoá học
• Trichobakin immunotoxin tái tổ hợp
• Ái lực Trichobakin
• Bảo quản protein tái tổ hợp
• Ức chế tế bào ung thư
• TBK tái tổ hợp
• Quy trình lên men tinh chế TBK
• Phương pháp nghiên cứu Its
• Protein bất hoạt Ribosome type I
• Độc tố miễn dịch tái tổ hợp
• Độc tố miễn dịch