TAILIEUCHUNG - Ngân hàng cDNA

Thiết kế ngân hàng cDNA Ngân hàng cDNA là tập hợp các bản sao cDNA từ tất cả các mDNA của một tế bào. Như vậy, ngân hàng được thiết lập từ một loại tế bào xác định (tế bào biệt hóa), vì thế, cDNA mang tính tế bào rất cao. Quá trình chuẩn bị ngân hàng cDNA bao gồm các bước sau đây: | Ngân hàng cDNA 1. Thiết kế ngân hàng cDNA Ngân hàng cDNA là tập hợp các bản sao cDNA từ tất cả các mDNA của một tế bào. Như vậy ngân hàng được thiết lập từ một loại tế bào xác định tế bào biệt hóa vì thế cDNA mang tính tế bào rất cao. Quá trình chuẩn bị ngân hàng cDNA bao gồm các bước sau đây - Chiết tách RNA tổng số ta phải chọn những tế bào có chứa nhiều mRNA cần thiết và sau đó làm sạch mRNA. - Chọn lựa các mRNA chứa nhiều A polyA bằng cách tách trên cột xenlulose oligo dT. - Tổng hợp cDNA sợi kép đầu bằng từ mRNA dưới tác dụng của enzyme sao chép ngược nhờ kỹ thuật nuclease S1 hoặc kỹ thuật Gubler-Hoffman. - Metyl hóa các vùng hạn chế có trong đoạn cDNA sợi đôi được nhận biết bởi enzyme EcoRI để bảo vệ vùng này không bị cắt khi thao tác với EcoRI. - Tạo đầu dính bằng cách sử dụng đoạn nối linker có chứa trình tự nhận biết bởi EcoRI sau đó cắt bằng enzyme EcoRI. Trong trường hợp này chỉ có đoạn nối bị cắt còn cDNA vẫn còn nguyên vẹn do được metyl hóa . Đưa cDNA vào vector tạo DNA tái tổ hợp. - Ghép cDNA đầu dính vào vector thích hợp đã được mở EcoRI và đã khử nhóm phosphat - Hàn kín mạch nhờ enzyme phosphoryl hóa và enzyme ligase để tạo vector tái tổ hợp - Đưa vector tái tổ hợp vào tế bào chủ và nuôi cấy trong các điều kiện thích hợp để tạo dòng - Xác định dòng cần tìm và thành lập ngân hàng cDNA. Mục đích của việc thiết lập ngân hàng cDNA là nhằm nghiên cứu sự biểu hiện của một gen xác định cùng với những vấn đề liên quan đến sự điều hòa biểu hiện gen cũng như mối tương tác giữa các gen trong một quá trình sống. Chú ý Khi phân tích kết quả thu được ngân hàng cDNA cần chú ý tác dụng sinh lí từng thời điểm thí nghiệm. 2. Sàng lọc ngân hàng cDNA Một phương pháp phổ biến nhằm sàng lọc ngân hàng cDNA được bắt đầu từ việc tạo canh trường nuôi cấy chứa đựng nhiều khuẩn lạc từ ngân hàng cDNA. DNA plasmid từ mỗi mẻ cấy vi khuẩn gắn với mảnh nhỏ nitro-xenlulose màng lai sẽ bị biến tính và lai với mRNA tổng số. Mỗi mRNA khác nhau sẽ được lai trên nitroxelulose với thứ tự

• Sinh học
• bản sao cDNA
• Chiết tách RNA
• công nghệ sinh học
• phương pháp thí nghiệm
• thí nghiệm sinh học
• Bài thuyết trình An toàn phòng thí nghiệm
• An toàn Sinh học PTN Y sinh
• Phòng thí nghiệm Y sinh
• Yêu cầu phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguyên tắc phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguy cơ phòn thí nghiệm Y sinh
• Đề tài nghiên cứu khoa học
• Thực hành thí nghiệm môn Hóa học
• Phương pháp hướng dẫn thí nghiệm Hóa học
• Hướng dẫn học sinh thí nghiệm Hóa học
• Các loại thí nghiệm Hóa học
• Các phương pháp dạy thí nghiệm
• Thí nghiệm công nghệ sinh học
• Thí nghiệm vi sinh vật học
• Vi sinh vật học
• Nghiên cứu vi sinh vật
• Bảo quản giống vi sinh vật
• Vi sinh vật gây bệnh
• Chất lượng giống vi sinh vật
• Giống vi sinh vật
• Môi trường nuôi cấy vi sinh vật
• Báo cáo thực tập
• Quá trình thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thiết bị thí nghiệm năng lượng sinh học
• Phòng thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thí nghiệm năng lượng sinh học
• Nghiên cứu ethanol từ rơm rạ
• Thí nghiệm đường cong sinh trưởng
• thí nghiệm với nấm men
• Tăng cường hứng thú học tập
• Hứng thú học tập
• Bài tập thí nghiệm
• Thí nghiệm giáo khoa
• Thí nghiệm tự tạo
• Thí nghiệm trên máy vi tính
• Thí nghiệm sự thẩm thấu tế bào
• Tính thấm của tế bào
• Sự thẩm thấu tế bào
• Thực hành thí nghiệm sinh học 10
• Thao tác thí nghiệm sinh học
• Phòng thí nghiệm
• An toàn sinh học
• An ninh sinh học phòng thí nghiệm
• Trang thiết bị phòng thí nghiệm
• Phòng thí nghiệm cơ bản
• Thí nghiệm vật lý
• Dạy học thí nghiệm vật lý
• Hướng dẫn sử dụng thí nghiệm vật lý
• Tổ chức thí nghiệm vật lý
• Phương pháp dạy học Vật lý
• Dạy học Vật lý theo hướng tích cực
• An toàn phòng thí nghiệm
• Nội quy phòng thí nghiệm
• An toàn hóa chất
• Dụng cụ phòng thí nghiệm
• Xây dựng E book học phần Thí nghiệm
• Thí nghiệm thực hành phương pháp dạy học
• Thí nghiệm Hóa học
• E book dạy học thí nghiệm Hóa học
• Dạy học tích cực
• Công nghệ thông tin trong dạy học
• Cách sử dụng thí nghiệm Hóa học
• Tổ chức hoạt động học tập tích cực
• Tổ chức học tập cho HS lớp 10
• Dạy học có sử dụng thí nghiệm
• Thiết kế thí nghiệm dạy học Hóa học
• Một số thí nghiệm về enzim
• pH đối với enzim
• Tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm sinh học 6
• Sinh học 6
• Thực hành sinh học
• Thí nghiệm quang hợp
• Xác định chất khí thải
• Xác định chất lá cây
• Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm
• Vi sinh vật học thực phẩm
• Phương pháp định lượng vi sinh vật
• Định lượng vi sinh vật
• Tính chất sinh lý vi sinh vật
• tế bào thực vật
• Luận án Tiến sĩ
• Luận án Khoa học Giáo dục
• Phương pháp dạy học bộ môn Hóa học
• Phát triển năng lực dạy học thí nghiệm
• Đào tạo sinh viên sư phạm hóa học
• Thí nghiệm thực hành Hoá
• Quan sát tế bào dưới kính hiển vi
• Thí nghiệm co nguyên sinh
• Thí nghiệm phản co nguyên sinh
• Cấu tạo tế bào
• Hình dạng tế bào
• Thí nghiệm hóa sinh thực phẩm
• Thí nghiệm hóa sinh
• Hóa sinh thực phẩm
• Tính chất của protein
• Tính chất động học của enzym ureaza
• Thí nghiệm tính chất của protein
• Chỉ tiêu vi sinh vật của thực phẩm
• Vệ sinh công nghiệp
• Kiểm tra vi sinh vật
• Đánh giá thực trạng thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao hiệu quả thí nghiệm vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao chất lượng thực hành vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí trong trường phổ thông
• Thí nghiệm Sinh học 7 Bài 52
• Thực hành Thí nghiệm Sinh học
• Giáo án điện tử Sinh học
• Thiết kế bài giảng Sinh học bài 52
• Sự sinh sản của thú
• Sự di chuyển của thú