TAILIEUCHUNG - Các kỹ thuật chủ yếu trong phân tích axit nucleic

DNA đảm bảo độ tinh khiết -Đảm bảo nguyên vẹn về cấu trúc để thực hiện các bước nghiên cứu tiếp Các bước chính: -Phá vỡ tế bào (vật liệu ban đầu) giải phóng các DNA/RNA: cơ học, nitơ lỏng, chất tẩy (SDS) là phân tử lưỡng cực kết hợp với protein màng và photpholipid làm phá vỡ màng tế bào và nhân -Bổ sung các chất chống các chất hoạt hóa enzyme DNAase và làm biến tính các phân tử protein, các chất hữu cơ, -Tách DNA khỏi các tạp chất khác. | Các kỹ thuật chủ yếu trong phân tích axit nucleic Các phương pháp tách chiết DNA, RNA Các phương pháp phân tích DNA Kỹ thuật PCR và nhóm phương pháp phụ thuộc PCR Lai phân tử Giải trình tự Tách chiết, định lượng và định tính axít nucleic Yêu cầu: DNA đảm bảo độ tinh khiết Đảm bảo nguyên vẹn về cấu trúc để thực hiện các bước nghiên cứu tiếp Các bước chính: Phá vỡ tế bào (vật liệu ban đầu) giải phóng các DNA/RNA: cơ học, nitơ lỏng, chất tẩy (SDS) là phân tử lưỡng cực kết hợp với protein màng và photpholipid làm phá vỡ màng tế bào và nhân Bổ sung các chất chống các chất hoạt hóa enzyme DNAase và làm biến tính các phân tử protein, các chất hữu cơ, Tách DNA khỏi các tạp chất khác Thu, rửa, và hòa tan DNA Quy trình chung: 1. Phá vỡ tế bào: Nghiền mẫu trong nito lỏng thành bột mịn Xử lý mẫu trong đệm CTAB ở 55-65 C 2. Loại bỏ protein và photpholipid: Ly tâm loại cặn, thu dịch nổi Xử lý với chloroform:isoamil Ly tâm loại bỏ các protein 3. Thu nhận DNA: Tủa DNA bằng isopropanol or ethanol Ly tâm thu tủa DNA và rửa lại bằng ethanol 70% Hòa tan DNA trong TE or nước cất Bảo quản 4C hoặc -20 đến -80 C Vai trò một số chất thông dụng: Nito lỏng: làm cho màng (thành) tế bào cứng, giòn, dễ vỡ. Hạn chế hoạt động của các enzyme phá hủy nucleotide EDTA: Hạn chế các enzyme phân hủy nội bào vì sự liên kết các ion liên quan quá trình xúc tác thủy phân DNA (ion hóa trị 2 Mg, Ca,) Tris: điều chỉnh pH, tránh sự đứt gãy DNA trong môi trường kiềm or acid CTAB (cetryl ammonium bromide): loại bỏ polysacaride hòa tan DNA cao, hiệu quả cao ở 55-65 C. Chloroform: làm biến tính protein và loại bỏ liên kết DNA-CTAB Ethanol (2:1): tủa DNA trong điều kiện có lực ion, nồng độ muối cao isopropanol (2:1) tủa DNA trong điều kiện không có muối, loại bỏ RNA, DNA đứt gãy, RNAse: loại bỏ RNA, Dnase: loại bỏ DNA TE/nước cất: hòa tan và bảo vệ DNA/RNA . Phương pháp tách chiết ADN DNA có kích thước lớn do đó cần tránh các tách nhân gây đứt gãy. DNA genome (ĐV, TV) sau khi tách chiết phải có kích thước .

• Hoá học
• axit nuleic
• lai phân tử
• giải trình tự
• tách chiết DNA
• phân tích DNA
• kỹ thuật PCR
• Kinh nghiệm xây dựng PCR/realtime PCR
• Phát triển PCR/realtime PCR
• Kỹ thuật sinh học phân tử
• Tác nhân vi sinh
• Phương tiện vi sinh
• Áp dụng PCR
• Real time PCR
• Real time PCR phòng thí nghiệm chẩn đoán
• Phòng thí nghiệm chẩn đoán
• PCR phòng thí nghiệm chẩn đoán
• Phát triển kỹ thuật PCR
• Xây dựng kỹ thuật PCR
• Các kỹ thuật sinh học phân tử
• Sinh học phân tử hiện đại
• Chẩn đoán bệnh nhiễm trùng
• ứng dụng PCR
• tài liệu về PCR
• nguyên lý PCR
• phản ứng PCR
• Phát hiện RSV ở bệnh nhi dưới 5 tuổi
• Phát hiện RSV
• Kỹ thuật realtime RT PCR
• Kỹ thuật RT PCR truyền thống
• Hô hấp do RSV
• Tạo chí y học
• Nghiên cứu y học
• Kỹ thuật real time PCR
• Kỹ thuật nested PCR
• Chẩn đoán loài plasmodium spp
• Phát triển kỹ thuật multiplex PCR
• Kỹ thuật multiplex PCR
• Gen chlamydia trachomatis
• Giải mã trình tự gen
• Quy trình multiplex PCR
• Tính chuyên biệt các cặp mồi trong phản ứng multiplex PCR
• Nồng độ primer cho phản ứng multiplex PCR phát hiện DNA
• Phương pháp phát hiện thịt heo trong thực phẩm
• Phương pháp phát hiện thịt bò
• Virut gây bệnh dịch tả vịt
• Đàn vịt sinh sản
• Kỹ thuật RT PCR
• Virut dịch tả vịt
• Virut DTV gây bệnh dịch tả vịt
• Tạp chí khoa học
• Tạp chí y dược
• Y dược quân sự
• Phòng chống não mô cầu
• Neisseria meningitidis
• Nhóm huyết thanh
• Tinh sạch ADN của N
• meningitidis
• Gen CtrA mã hóa
• Phân biệt thịt bò
• Kỹ thuật multiplex real time PCR
• Phân biệt thịt trâu
• Phân biệt thịt heo
• Quy trình multiplex real time PCR
• Multiplex real time PCR nhận diện DNA
• Kỹ thuật chẩn đoán
• PCR chẩn đoán
• PCR Real time
• Phòng thí nghiệm nghiên cứu
• Thiết lập kỹ thuật Taqman probe real time PCR
• Bệnh thận do B polyomavirus
• Định lượng nồng độ BKV ADN
• Taqman probe real time PCR
• Thành phần tối ưu của kỹ thuật real time PCR
• Sử dụng kỹ thuật Rapd Pcr
• Mối quan hệ di truyền
• Một số loài thuộc chi Calothrix Cyanobacteria
• Kỹ thuật Rapd Pcr
• Phản ứng RAPD PCR
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng
• Công nghệ sinh học
• Quy trình phát hiện Microsporidia
• Viêm loét giác mạc
• Kỹ thuật Realtime PCR
• sản phẩm PCR
• xác định kiểu gen của HCV
• thử nghiệm RT real time PCR
• đặc hiệu vùng 5’ NC
• phương pháp nghiên cứu
• Virus viêm gan B
• Phương pháp PCR lồng
• Phương pháp tách chiết Hepatitis B virus DNA
• Phân biệt thịt bò trâu heo
• Kỹ thuật Multiplex Realtime PCR
• Quy trình multiplex realtime PCR nhận diện DNA
• Gian lận thương mại
• Quy trình multiplex realtime PCR
• Giá trị của kỹ thuật RT PCR
• Chẩn đoán virut Dengue
• Bệnh viện Quân y 103 năm 2017
• Ứng dụng kỹ thuật Real time PCR
• Xác định kiểu gen
• Bệnh viện đa khoa Đồng Tháp
• Ứng dụng kỹ thuật Realtime PCR
• Đột biến 455G A trên gen Fibrinogen Beta
• Bệnh nhân nhồi máu cơ tim trẻ tuổi
• Nhồi máu cơ tim trẻ tuổi
• Ứng dụng kỹ thuật PCR RFLP
• Kỹ thuật PCR RFLP
• Xác định các đột biến A2142G
• Gene 23s rRNA
• Đề kháng clarithromycin
• Vi khuẩn Helicobacter pylori
• Tạp chí nghiên cứu y học
• Phát triển kỹ thuật multiplex real time PCR
• Taqman probe cải tiến
• Phát hiện HPV nguy cơ thấp
• Độ nhạy cao
• Hiệu quả của kỹ thuật PCR
• Chẩn đoán lao phổi
• Điều trị bệnh lao
• Vi khuẩn lao Mycobacterium tuberculosis
• Bệnh viện Lao và Bệnh phổi Thái Nguyên