TAILIEUCHUNG - GIẢI TRÌNH TỰ GEN

Có 2 phương pháp chính - Phương pháp hóa học Maxam – Gilbert: đây là phương pháp được sử dụng đầu tiên để xác định trình tự gen nhưng hiện nay không còn được sử dụng phổ biến nữa - Phương pháp Enzyme Sanger Nguyên lý - Sử dụng các chất hóa học cắt đứt sợi DNA lại 1 loại nucleotide đặc hiệu | GIẢI TRèNH TỰ GEN Các phương pháp giải trình tự gen Có 2 phương pháp chính: Phương pháp hoá học Maxam – Gilbert: đây là phương pháp được sử dụng đầu tiên để xác định trình tự gen nhưng hiện nay không còn đựơc sử dụng phổ biến nữa. Phương pháp Enzyme Sanger 1. Phương pháp hoá học Maxam - Gilbert Walter Gilbert Nguyên lý Sử dụng các chất hoá học cắt đứt sợi DNA tại 1 loại nucleotide đặc hiệu Phân tử DNA kép được đánh dấu P32 tại đầu 5’ Tách rời 2 sợi đơn bằng nhiệt Xử lý hoá học sao cho chỉ có 1 loại nucleotide bị phá huỷ -> hàng loạt đoạn DNA có kích thước khác nhau được tạo thành (sử dụng các chất hoá học khác nhau phá huỷ 4 loại nucleotide bằng 4 phản ứng riêng biệt) Tiến hành điện di các đoạn DNA thu đựơc trên gel polyacrylamide, chỉ quan sát đựơc đoạn có gắn P32. Đoạn DNA ngắn nhất có đánh dấu phóng xạ sẽ chạy nhanh nhất dưới tác dụng của điện trường. Căn cứ vào vị trí các vạch quan sát được trên gel mà xác định trình tự các nucleotide. 5’- Treat with chemicals that specifically cleave at a certain base. 4 tubes G-rxn A>G -rxn T>C -rxn C-rxn 5’- 5’- 5’- C The reaction is done such that each strand is cleaved only once C T A G ddNTP Reaction Mix 3’ G C A T T C C A T A G G 5’ MAXAM-GILBERT CHEMICAL SEQUENCING Labeled strand (P32) C C Sequence is read directly autoradiograph of dried sequencing gel Phá huỷ các nucleotide Trong phương pháp này sử dụng 5 phản ứng cơ bản: Dimethylsulfate ở pH sẽ làm thay đổi Guanine (G). Piperidine formate ở pH sẽ phá vỡ cầu nối glycoside giữa deoxyribose với purine (G,A) Hydrazine: mở các vòng pyrimidine (C , T) Hydrazine khi có NaCl chỉ có tác dụng đối với C NaOH ở 900C sẽ phá huỷ A mạnh và C kém. Kết quả: Dimethylsulfate at pH -----------> G Piperidine formate at pH -------> G and A Hydrazine ------------------------------> C and T Hydrazine in M NaCl -----------> C N NaOH at 90 oC -----------------> A and C 5’GACGTACTTA3’ G G+A T+C C A>C N NaOH at 90 oC A>C Hydrazine T+C Piperidine formate

• Sinh học
• giải trình tự gen
• gen
• công nghệ gen
• nghiên cứu sinh học
• sinh học
• bài giảng sinh học
• Bài giảng Giải trình tự gen
• Ứng dụng chuẩn đoán bệnh
• Giải trình tự DNA
• Giải trình tự bằng sinh tổng hợp
• Qui trình chuẩn đoán gen IX factor
• Nghiên cứu y học
• Ung thư phổi
• Giải trình tự thế hệ mới
• Đột biến gen EGFR
• Đột biến gen ALK
• Đột biến gen BRAF
• Đột biến gen ROS1
• Đột biến gen NRAS
• Phân lập gen virus đậu trên dê
• Giải trình tự gen virus đậu trên dê
• Gen virus đậu trên dê
• Dê ở Việt Nam
• Giải trình tự hệ gen mã hoá
• Loạn sản ngoại bì
• Đột biến gen EDA
• Kỹ thuật giải trình tự hệ gen mã hóa WES
• Tạp chí nghiên cứu y học
• Xác định đột biến gen CYP1B1
• Đột biến gen CYP1B1
• Bệnh nhân glôcôm bẩm sinh nguyên phát
• Kĩ thuật giải trình tự gen
• Bệnh nhân glôcôm bẩm sinh
• Phát hiện đột biến gen CYBB
• Gây u hạt mạn tính
• Giải trình tự toàn bộ vùng gen
• Đột biến gen
• Vi khuẩn Enterobacteriaciae
• Gen siêu vi viêm gan C
• Giải trình tự trên đoạn gen 5’NC
• Giải trình tự trên đoạn gen NS5B
• Trung Tâm Y Khoa MEDIC
• Kỹ thuật xác định genotype
• Bài viết y học
• Ung thư da
• Đột biến gen TP53
• Mô ung thư da
• Phương pháp giải trình tự gen
• Luận án tiến sĩ
• Luận án tiến sĩ Y học
• Chuyên ngành Hóa sinh
• Giải trình tự gen thế hệ mới
• Xác định tính đa hình thái đơn
• Đa hình thái đơn Pro47ser gen P53
• Bệnh nhân ung thư phổi
• Kỹ thuật giải trình tự gen
• Vị trí codon 47
• Bệnh vảy da cá
• Giải trình tự gen đích
• Đột biến mới
• Sừng hóa da
• Gen mã hóa Transglutaminase 1
• Tạo dòng gen Laccase 3
• Giải trình tự gen Laccase 3
• Gen Laccase 3 từ Fusarium Oxysporum
• Enzyme oxi hóa nhân đồng
• Ứng dụng laccase tái tổ hợp
• Tạp chí Tim mạch học Việt Nam
• Bài viết về y học
• Giải trình tự gen toàn bộ vùng mã hóa
• Bệnh cơ tim vô căn
• Bệnh đa gen gây rối loạn
• Bệnh cơ tim phì đại
• Kỹ thuật Scorpion Arms
• Ung thư phổi không tế bào nhỏ
• Non small cell lung cancer
• Bệnh α thalassemia
• Bệnh di truyền đơn gen
• Đặc điểm α thalassemia
• Tầm soát bệnh thalassemia
• Loạn dưỡng cơ Duchenne
• Phát hiện người lành mang gen bệnh
• Đột biến xóa đoạn
• Giải trình tự Sanger
• Đột biến gen HBB
• Gen bệnh β thalassemia
• Rối loạn di truyền
• Xác định người lành mang gen bệnh hemophilia A
• Gen bệnh hemophilia A
• Kỹ thuật Microsatellite
• người lành mang gen bệnh
• Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp
• Bài viết về nông nghiệp
• Giải trình tự
• ADN mã vạch
• Đoạn gen matK
• Giải trình tự gen 16s rRNA
• Cây phát sinh loài
• Các loài cua xanh
• Xác định quan hệ di truyền
• Quan hệ di truyền
• Tạp chí y học
• Khuếch đại gen
• Quy trình giải trình tự
• Trình tự gen APC
• Đột biến gen p53
• Ung thư vú
• Nhuộm hoá mô miễn dịch
• Tăng sản thượng thận bẩm sinh
• Đột biến điểm gen CYP21A2