TAILIEUCHUNG - Giáo trình CN nuôi cấy mô tế bào thực vật - Phần 2 chương 2

Chương 2. CHUYỂN GEN Ở THỰC VẬT BẬC CAO . Xác định và dòng hóa gen . Chiết suất và tinh sạch DNA từ mô thực vật Có rất nhiều phương pháp tùy theo mục đích sử dụng DNA để làm gì hoặc chiết xuất loại mô nào. Khuynh hướng chung hiện nay là tìm phương pháp đơn giản nhất, thời gian thao tác ngắn nhất nhưng DNA thu được vẫn có đủ độ tinh khiết và độ nguyên vẹn 50 – 100 KG cần thiết cho các thao tác tiếp theo trong công nghệ gen thực vật như cắt bằng E. | 317 Chương 2. CHUYỂN GEN Ở THỰC VẬT BẬC CAO . Xác định và dòng hóa gen . Chiết suất và tinh sạch DNA từ mô thực vật Có rất nhiều phương pháp tùy theo mục đích sử dụng DNA để làm gì hoặc chiết xuất loại mô nào. Khuynh hướng chung hiện nay là tìm phương pháp đơn giản nhất thời gian thao tác ngắn nhất nhưng DNA thu được vẫn có đủ độ tinh khiết và độ nguyên vẹn 50 - 100 KG cần thiết cho các thao tác tiếp theo trong công nghệ gen thực vật như cắt bằng E giới hạn chạy phản ứng PCR .Muốn thu DNA có chiều dài 100 - KG phải dùng phương pháp điện di có điện trường không liên tục Chiết suất và tinh sạch DNA tổng số Tế bào thực vật được nghiền vỡ trong điều kiện lạnh làm cho DNA được hòa vào đệm chiết SDS sodium dedecyl sulfatc hoặc CTAB celytrimethyl amonium bromide được thêm vào để giúp DNA hòa dễ hơn đầy đủ hơn vào dịch đệm. EDTA có tác dụng gắn chặt các ion Mg là yếu tố cần cho sự hoạt động của nucleotit phân huỷ DNA trong quá trình chiết. Protein được tách khỏi DNA bằng phenol hoặc chloroform Nếu tránh được chấn động xé xoáy quá mạnh có thể thu được DNA với chiều dài 50 - 100 KG. Ngoài ra CTAB còn có tác dụng tách các polysaccarit ra khỏi DNA do chúng có độ hòa tan khác nhau trong môi trường có mặt CATB 1. Chiết suất DNA từ mô thực vật Lá nghiền với đệm chiết CATB có chứa mercabthoethamol. DNA được chiết bằng hỗn hợp cloroform izoamila kết tủa bằng izphopanol sau đó qua 1 số bước để rửa và tinh khiết DNA. 2. Chiết xuất DNA thực vật để chạy PCR Mẫu lá được sử dụng ở lượng rất ít. Quá trình chiết được đơn giảm hóa nhiều để thao tác nhanh và làm cùng 1 lúc nhiều mẫu tuy vậy DNA được chiết ra hoàn toàn đủ độ lớn và độ sạch để chạy PCR tiếp theo. Cắt DNA bằng Enzim giới hạn Các enzim giới hạn Enzim giới hạn là nhóm endonucleoaza chỉ cắt phân tử DNA ở những vị trí có dãy Giáo trình nuôi cấy mô tế bào thực vật 318 mã nucleotit nhất định mà chúng có khả năng nhận ra. Thuộc tính rất quan trọng này của enzim giới hạn cho phép cắt phân tử DNA ở các vị trí chọn .

• Sinh học
• công nghệ sinh học
• nuôi cấy mô
• công nghệ nuôi cấy mô
• nhân giống vô tính
• nuôi cấy mô invitro
• Bài giảng Công nghệ sinh học
• Ứng dụng của công nghệ sinh học
• Phương pháp công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học động vật
• Công nghệ sinh học người
• Công nghệ sinh học y sinh
• Sinh học phân tử
• Sinh học tế bào
• Vai trò của công nghệ sinh học
• Sự phát triển của sinh học phân tử
• Cơ sở của công nghệ sinh học
• Giáo trình Công nghệ sinh học
• Tài liệu Công nghệ sinh học
• Nhập môn công nghệ Sinh học
• Công nghệ sinh học phân tử
• Công nghệ sinh học vi sinh vật
• Công nghệ sinh học thực vật
• Công nghệ sinh học môi trường
• Bài giảng Công nghệ sinh học môi trường
• Công nghệ sinh học môi trường chương 7
• Công nghệ sinh học trong nông nghiệp
• Khoa học tự nhiên
• Đề cương môn học
• Định nghĩa công nghệ sinh học
• Lịch sử công nghệ sinh học
• Kinh tế công nghệ sinh học
• Pháp lý công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học y tế
• Công nghệ sinh học nông nghiệp
• Đề cương Công nghệ sinh học
• Ôn tập Công nghệ sinh học
• Ôn thi Công nghệ sinh học
• Bài tập Công nghệ sinh học
• Kiến thức Công nghệ sinh học
• Chẩn đoán phân tử
• công nghệ thực phẩm
• phản ứng khuếch đại gen
• nghiên cứu Công nghệ sinh học
• thiết bị công nghệ sinh học
• sinh học
• Công nghệ sinh học môi trường chương 5
• Chất đốt sinh học
• Năng lượng và chất đốt sinh học
• Sinh học môi trường
• Công nghệ sinh học môi trường chương 3
• Công nghệ sạch
• Chất thải sinh hoạt
• Bài giảng Công nghệ sinh học thực phẩm
• Công nghệ sinh học thực phẩm
• Tài liệu Công nghệ sinh học thực phẩm
• Tìm hiểu công nghệ sinh học thực phẩm