TAILIEUCHUNG - KỸ THUẬT GIẢI TRÌNH TỰ TRỰC TIẾP SẢN PHẦM PCR

Đặt vấn đề: Xét nghiệm HCV genotype là xét nghiệm mà các bác sĩ lâm sàng cần xác định trước khi bắt đầu điều trị bệnh nhân nhiễm HCV để có thể quyết định thời gian điều trị. Có nhiều phương pháp để xác định genotype HCV, tuy nhiên tiêu chuẩn nhất và hữu dụng lâm sàng nhất vẫn là giải trình tự vùng 5’-NC. Mục tiêu nghiên cứu: Thực hiện xét nghiệm giải trình tự trực tiếp sản phẩm PCR khuếch đại một đoạn DNA trên vùng 5’-NC của HCV, phân tích các kết quả và rút ra. | KỸ THUẬT GIẢI TRÌNH Tự TRỰC TIẾP SẢN PHẦM PCR TÓM TẮT Đặt vấn đề Xét nghiệm HCV genotype là xét nghiệm mà các bác sĩ lâm sàng cần xác định trước khi bắt đầu điều trị bệnh nhân nhiễm HCV để có thể quyết định thời gian điều trị. Có nhiều phương pháp để xác định genotype HCV tuy nhiên tiêu chuẩn nhất và hữu dụng lâm sàng nhất vẫn là giải trình tự vùng 5 -NC. Mục tiêu nghiên cứu Thực hiện xét nghiệm giải trình tự trực tiếp sản phẩm PCR khuếch đại một đoạn DNA trên vùng 5 -NC của HCV phân tích các kết quả và rút ra các kinh nghiệm chủ yếu. Vật liệu và phương pháp Các mẫu huyết thanh sau khi thu thập sẽ được tách chiết RNA cùng với RNA chứng nội tại được cho vào mẫu và tổng hợp thành cDNA từ dịch ly trích này. Thực hiện phản ứng real-time PCR dùng mồi và các đoạn dò Taqman đặc hiệu định lượng HCV có trong mẫu ban đầu. Tiến hành giải trình tự trực tiếp sản phẩm khuếch đại này so sánh với ngân hàng gene để định các subtype của HCV. Phân tích các kết quả và rút các kinh nghiệm chủ yếu. Kết quả Từ tháng 1 2007 đến tháng 5 2008 tác giả đã áp dụng kỹ thuật này để định kiểu gene HCV cho 2000 trường hợp với kết quả ghi nhận được 58 thuộc subtype 1b 8 thuộc subtype 1a 5 thuộc subtype 1c 10 thuộc subtype 2a 0 4 thuộc subtype 2b và 17 thuộc subtype 6a. Kết luận Từ kết quả trên chúng ta nhận thấy các bệnh nhân nhiễm HCV ở Việt Nam hầu hết đều tập trung vào subtype 1b và 6a. Trong nghiên cứu này tác giả đã đưa ra được kỹ thuật tốt nhất để vừa định lượng vừa định type trên cùng một sản phẩm khuếch đại có chứa hỗn hợp DNA đích và DNA chứng nội tại đồng thời chứa cả hệ thống chống ngoại nhiễm mà không làm ảnh hưởng đến kết quả cuối cùng của xét nghiệm. Một ưu điểm nữa của phương pháp giải trình tự là có thể cho kết quả phân biệt được từng loại subtype trong khi các phương pháp khác sẽ có một tỉ lệ không cho subtype hay thậm chí không phân biệt được subtype. ABSTRACT APPLY THE DIRECT SEQUENCING OF THE QPCR PRODUCTS TO DO THE HCV GENOTYPING. Nguyen Thanh Bao Pham Hung Van Y Hoc TP. Ho Chi

• Y khoa - Dược
• kiến thức y học
• tài liệu y khoa
• bệnh thường gặp
• nghiên cứu y học
• lý thuyết y học
• y học dân tộc
• y học phổ thông
• chuyên ngành y học
• y học thực hành
• tài liệu y học
• chuyên ngành y khoa
• Điều trị phong thấp bằng y học Á châu
• y học cổ truyền
• lưu ý khi uống sữa
• mẹo uống sữa
• điều cần biết khi uống sữa
• y học thường thức
• y học cơ sở
• giáo trình y học
• mẹo vặt chữa bệnh
• y tế
• sức khỏe
• cách chăm sóc sức khỏe
• bệnh thường gặp ở người
• đông y trị bệnh
• sức khỏe phụ nữ
• cách chăm sóc bé
• sức khỏe giới tính
• sức khỏe người cao tuổi
• Kiến thức y học về chăm sóc bé 7 lưu ý giúp bé ngủ ngon
• bài giảng y học
• bệnh lâm sàng
• chuẩn đoán bệnh