TAILIEUCHUNG - Synthesis, cloning and expression of a novel pre-miniproinsulin analogue gene in Escherichia coli

In the present study, a novel pre-miniproinsulin analogue was designed to have a short 9 residue sequence replacing the 35 residue C-chain, one lysine and one arginine added to the C-terminus of the B-chain in combination with glycine and arginine substitution at A21 and B29, respectively, and a 16-residue fusion partner comprising the pentapeptide sequence (PSDKP) of the N-terminus of human tumor necrosis factor-a (TNF-a), 6 histidine residues for Ni2+ chelated affinity purification and a pentapeptide ending with methionine for ease of chemical cleavage fused at the N-terminus. Homology modeling of the designed protein against miniproinsulin (protein databank file 1 efeA) as a template showed that the distance between the a-carbons of the C-terminus of the B-chain and the N-terminus of the A-chain did not change; the root-mean-square deviation of the backbone atoms between the structures of modeled miniproinsulin and miniproinsulin template was A˚ . DNA sequencing of the synthesized gene showed 100% identity with theoretical sequence. The gene was constructed taking into account the codon preference of Escherichia coli (CAI value ) in order to increase the expression rate of the DNA in the host strain. The designed gene was synthesized using DNA synthesis technology and then cloned into the expression plasmid pET-24a(+) and propagated in E. coli strain JM109. Gene expression was successful in two E. coli strains: namely JM109(DE3) and BL21(DE3)pLysS. SDS–PAGE analysis was carried out to check protein size and to check and optimize expression. | Synthesis, cloning and expression of a novel pre-miniproinsulin analogue gene in Escherichia coli

• Sinh học
• Pre miniproinsulin
• Insulin analogues
• Synthetic DNA
• Codon adaptation index
• Escherichia coli
• Tóm tắt Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp
• Vi khuẩn Escherichia coli phân lập
• Escherichia coli phân lập từ ngan bệnh
• Biện pháp phòng vi khuẩn Escherichia coli
• Trị vi khuẩn Escherichia coli
• Pathotypes of E coli
• Pond water
• Occurrence of pathotypes of Escherichia coli
• Escherichia coli in aquatic environment
• Pathotypes of Escherichia coli
• Sự lan truyền của Escherichia coli
• tính kháng kháng sinh Escherichia coli
• Kháng kháng sinh
• Vi khuẩn escherichia coli
• Tỉnh Hà Nam
• Nước thải sinh hoạt
• Tóm tắt luận văn Tiến sĩ
• Tóm tắt luận văn Tiến sĩ Nông nghiệp
• Đặc tính của vi khuẩn Escherichia Coli
• Vi khuẩn Escherichia Coli từ ngan bệnh
• Xác định kiểu gen β lactamase
• Kiểu gen β lactamase phổ mở rộng
• Các chủng Escherichia coli
• Escherichia coli phân lập từ người
• Escherichia coli phân lập từ bệnh phẩm
• Multi drug resistant Escherichia coli
• Extended spectrum
• Beta lactamase producing Escherichia coli
• Multi drug resistant
• Biểu hiện Protein tái tổ hợp LTA
• Escherichia coli trong tế bào khả biến
• Escherichia coli BL21 (DE3)
• Kháng nguyên tái tổ hợp LTA
• Protein dung hợp
• Cải thiện mức độ biểu hiện protein
• Biểu hiện protein tái tổ hợp LTB
• Tế bào khả biến Escherichia Coli BL21
• Foodborne disease
• Shiga toxin producing escherichia coli
• Escherichia coli from milk
• Meat based fast foods
• Mizoram (India)
• Urinary tract infection
• Serum resistance
• Apparently healthy adults
• Escherichia coli isolated
• Tỷ lệ mang gen mã hóa enzym ESBL
• Tỷ lệ mang gen mã hóa Amp C β lactamase
• Phân lập vi khuẩn Escherichia coli
• Vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ chó
• Cảm biến sinh học
• An toàn thực phẩm
• Cảm biến sinh học phát hiện vi khuẩn E
• coli
• Phương pháp giúp phát hiện vi sinh vật
• Cảm biến cộng hưởng plasmon bề mặt
• Cảm biến Amperometric
• Cảm biến trở kháng điện hóa
• Cảm biến đánh dấu huỳnh quang
• Vi khuẩn Escherichia coli O157 H7
• Đồ án tốt nghiệp
• Phát hiện nhanh Bacillus cereus
• Phát hiện nhanh Escherichia coli
• Sữa tiệt trùng
• Bacillus cereus trong sữa tiệt trùng
• Escherichia coli trong sữa tiệt trùng
• Tạo dòng vi khuẩn escherichia coli
• Đái tháo đường
• Protein dung hợp ecotin miniproinsulin
• Mã hóa Ecotin
• Sự lưu hành
• Sự đề kháng kháng sinh
• Kháng sinh của vi khuẩn
• Vi khuẩn Escherichia coli trên vịt
• Nuôi vịt tại thành phố Cần Thơ
• Tạo tế bào vi khuẩn Escherichia coli
• Tái tổ hợp enzyme acyl thioesterase 2 (ALT2)
• Khả năng tổng hợp các 2 methylketone
• Chuỗi carbon ngắn
• Tế bào vi khuẩn Escherichia coli C41
• Yếu tố gây bệnh của vi khuẩn Escherichia coli
• Bệnh tiêu chảy ở dê
• Tỉnh Thái Nguyên
• Thuốc kháng sinh và hóa dược
• Chất lượng gia súc
• Tạp chí khoa học
• Phát hiện hai nhóm Escherichia Coli Epec và Eiec
• Nhóm Escherichia Coli Epec và Eiec
• Cấu trúc genome
• Tương đồng di truyền
• nhiễm trùng bệnh viện
• Porcine PID1
• Expression and purification
• 3T3 L1 preadipocytes
• Escherichia coli Rosetta
• Phát triển kỹ thuật Lamp
• Loop Mediated Isothermal Amplification
• Phát hiện nhanh vi khuẩn Escherichia coli
• Escherichia coli O157 H7
• Tách chiết DNA tổng số từ tế bào vi khuẩn
• Antibiotic resistance
• Milk and milk products
• Drug resistance pattern
• Escherichia coli strains isolated
• Antimicrobial susceptibility pattern
• Avian pathogenic Escherichia coli
• Pathogenic mechanism of disease
• Dead birds suffering
• Vector biểu hiện kháng nguyên
• Kháng nguyên S1C
• Kháng nguyên S1C CT24
• Virus gây dịch tiêu chảy cấp ở lợn
• Antibiotic resistance profile
• Bovine mastitic milk samples
• Economy of milk production
• Đặc điểm viêm màng não
• Viêm màng não do Escherichia coli
• Escherichia coli ở trẻ em
• Đặc điểm dịch tễ
• Di chứng thần kinh