TAILIEUCHUNG - Đánh giá sự biểu hiện của CYP11Bs trong dòng tế bào HCT116

CYP11B1 và CYP11B2 là 2 enzyme tham gia lần lượt vào sự tổng hợp cortisol và aldosterone. CYP11B1 tham gia quá trình chuyển hóa 11-deoxycortisol tới cortisol còn CYP11B2 tham gia vào quá trình chuyển hóa 11-deoxycorticosterone tới aldosterone trong quá trình tổng hợp steroid ở người. Trong bài báo này, chúng tôi sử dụng các phương pháp nuôi cấy 2 dòng tế bào động vật (COS-1 và HCT116), biến nạp vector pSVL, pSVL+11B1, pSVL+11B2 vào tế bào động vật và biểu hiện đồng thời với bAdx / hAdx trong 2 dòng tế bào này. Steroid được tách chiết bằng chloroform và được phân tách bằng sắc ký lớp mỏng trên bản kính silica. Kết quả chúng tôi đã đánh giá được mức độ biểu hiện của CYP11Bs trong dòng tế bào người HCT116. Ảnh hưởng của chuỗi truyền điện tử bAdx tốt hơn chuỗi truyền điện tử hAdx trong hệ thống biểu hiện tế bào HCT116. Chính vì vậy, tế bào HCT116 có thể được sử dụng cho nghiên cứu chuyển hóa steroid bởi hai isozyme CYP11Bs. | Đánh giá sự biểu hiện của CYP11Bs trong dòng tế bào HCT116 TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3SE): 326-330 ĐÁNH GIÁ SỰ BIỂU HIỆN CỦA CYP11Bs TRONG DÒNG TẾ BÀO HCT116 Nguyễn Huy Hoàng1,2, Rita Bernhardt2 (1) Viện Công nghệ sinh học, nhhoang@ (2) Đại học Tổng hợp Saarland, CHLB Đức TÓM TẮT: CYP11B1 và CYP11B2 là 2 enzyme tham gia lần lượt vào sự tổng hợp cortisol và aldosterone. CYP11B1 tham gia quá trình chuyển hóa 11-deoxycortisol tới cortisol còn CYP11B2 tham gia vào quá trình chuyển hóa 11-deoxycorticosterone tới aldosterone trong quá trình tổng hợp steroid ở người. Trong bài báo này, chúng tôi sử dụng các phương pháp nuôi cấy 2 dòng tế bào động vật (COS-1 và HCT116), biến nạp vector pSVL, pSVL+11B1, pSVL+11B2 vào tế bào động vật và biểu hiện đồng thời với bAdx / hAdx trong 2 dòng tế bào này. Steroid được tách chiết bằng chloroform và được phân tách bằng sắc ký lớp mỏng trên bản kính silica. Kết quả chúng tôi đã đánh giá được mức độ biểu hiện của CYP11Bs trong dòng tế bào người HCT116. Ảnh hưởng của chuỗi truyền điện tử bAdx tốt hơn chuỗi truyền điện tử hAdx trong hệ thống biểu hiện tế bào HCT116. Chính vì vậy, tế bào HCT116 có thể được sử dụng cho nghiên cứu chuyển hóa steroid bởi hai isozyme CYP11Bs. Từ khóa: Adrenodoxin bò (bAdx), Adrenodoxin người (hAdx), CYP11B1, CYP11B2, tế bào COS-1, tế bào HCT116. MỞ ĐẦU chuyển hóa 11-deoxycortisol đến 18- Ở người, 2 isozyme 11β-hydroxylase đáp oxocortisol. Phản ứng này không có ý nghĩa ở ứng với sự tổng hợp cortisol và aldosterone lần in vivo vì nó không biểu hiện trong vùng lượt là CYP11B1 (được đặt tên như 11β- fasciculata, nhưng nó lại đóng vai trò quan hydroxylase, P450c11, P450XIB1) và trọng ở các bệnh nhân có hội chứng CYP11B2 (sinh tổng hợp aldosterone hay gọi glucocorticoid áp chế tăng aldosterone. tên là P450aldo, P450c18, P450cmo và Giống như các P450 khác, CYP11B1 và P450XIB2). Hai isozyme này thuộc nhóm CYP11B2 cần oxy phân tử từ sự khử điện .

• Sinh học
• Đánh giá sự biểu hiện của CYP11Bs
• Sự biểu hiện của CYP11Bs
• Dòng tế bào HCT116
• Nuôi cấy tế bào COS 1
• Gen hydroxylase steroid ở người