TAILIEUCHUNG - Dòng hóa và biểu hiện enzyme carbapenemase KPC-2 tái tổ hợp trong tế bào chất của E. coli

Bài viết "Dòng hóa và biểu hiện enzyme carbapenemase KPC-2 tái tổ hợp trong tế bào chất của E. coli" trình bày cơ chế đề kháng kháng sinh carbapenem thuộc nhóm β-lactam phổ biến nhất ở Klebsiella pneumoniae là tiết ra enzyme KPC (Klebsiella pneumoniae Carbapenemase). C | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 19, SOÁ T2- 2016 Dòng hóa và biểu hiện enzyme carbapenemase KPC-2 tái tổ hợp trong tế bào chất của E. coli Trần Nhật Phương Huỳnh Thị Kim Phương Phan Thị Phượng Trang Trần Linh Thước Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM Phạm Hùng Vân Công ty Nam Khoa, Đại Học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh (Bài nhận ngày 12 tháng 08 năm 2015, nhận đăng ngày 14 tháng 04 năm 2016) TÓM TẮT Cơ chế đề kháng kháng sinh carbapenem thuộc nhóm β-lactam phổ biến nhất ở Klebsiella pneumoniae là tiết ra enzyme KPC (Klebsiella pneumoniae Carbapenemase). Các chủng tiết enzyme này thường biểu hiện ở nhiều mức độ khác nhau và cần phải có sự phối hợp với các yếu tố khác như mất porin hay cùng biểu hiện với các enzyme đề kháng kháng sinh phổ rộng (ESBL) thì mới có khả năng biểu hiện mức độ đề kháng cao. Để tìm hiểu rõ hơn sự biểu hiện của enzyme này trong cơ chế đề kháng carbapenem và để phục vụ nghiên cứu ứng dụng trong việc phát hiện nhanh vi sinh vật đề kháng ESBL, gene mã hóa enzyme KPC-2 từ hai chủng K. pneumoniae phân lập từ mẫu bệnh phẩm được tạo dòng vào plasmid pET28a. Các plasmid tái tổ hợp mang gene kpc-2 được biến nạp vào tế bào E. coli BL21 và hoạt tính của enzyme được kiểm tra thông qua theo dõi khả năng sinh trưởng trong môi trường nuôi cấy có bổ sung kháng sinh ertapenem 4 µg/mL. Khả năng cảm ứng biểu hiện enzyme KPC-2 dạng nội bào cũng được kiểm tra bằng kỹ thuật điện di SDS-PAGE. Protein tái tổ hợp được gấp cuộn và tan một nửa so với tổng số protein tái tổ hợp tạo ra ở nhiệt độ 23 oC. Protein tái tổ hợp được thu nhận thành công từ phân đoạn tan bằng sắc ký ái lực với cột Histrap-HP. Phân đoạn protein sau khi tinh sạch được xác định khối lượng phân tử bằng phân tích LC-MS cho thấy KPC-2 thu nhận được có trọng lượng phân tử 28,8 kDa, đúng với dự đoán và có độ tinh sạch cao. Nghiên cứu này là tiền đề cho các nghiên cứu cơ bản và ứng dụng tiếp theo của KPC-2. Từ khóa: KPC-2, carbapenem, tạo dòng, tái tổ hợp, pET28a, pHT2008 MỞ .

• Sinh học
• Tái tổ hợp
• Biểu hiện enzyme carbapenemase KPC 2
• Cnzyme carbapenemase KPC 2 tái tổ hợp
• Tế bào chất của E
• coli
• Cơ chế đề kháng kháng sinh carbapenem
• Kháng kháng sinh
• Sản lượng TrxFlic từ chủng E
• coli tái tổ hợp
• Lên men sản xuất protein tái tổ hợp
• Phương pháp định lượng protein tái tổ hợp
• Khả năng sinh tổng hợp TrxFlic
• Chủng E
• coli tái tổ hợp sinh tổng hợp TrxFlic
• DNA tái tổ hợp ở E
• Biểu hiện DNA tái tổ hợp ở E
• DNA tái tổ hợp
• Protein nguyên thể
• Protein dung hợp
• Vector biểu hiện
• Giáo trình sinh học
• Công nghệ DNA tái tổ hợp
• hệ thống vector
• Kỹ thuật tạo dòng gen
• Công nghệ sinh học
• Kỹ thuật tái tổ hợp DNA
• Biến nạp bằng điện
• Biểu hiện của gen
• Chu trình sinh tan
• Kỹ thuật tái tổ hợp ADN
• Các enzyme giới hạn
• Phương pháp điện di
• Các vector chuyển gen
• Sự tạo ADN tái tổ hợp
• Chèn ADN tái tổ hợp vào tế bào chủ
• Trichobakin immunotoxin tái tổ hợp
• Ái lực Trichobakin
• Bảo quản protein tái tổ hợp
• Ức chế tế bào ung thư
• TBK tái tổ hợp
• Quy trình lên men tinh chế TBK
• Công nghệ sinh học phân tử
• ADN tái tổ hợp
• Công nghệ ADN tái tổ hợp
• Vi sinh vật
• Vi sinh vật tái tổ hợp
• Sinh học phân tử
• Nguyên lý ADN tái tổ hợp
• Ứng dụng ADN tái tổ hợp
• Hệ thống vi sinh vật
• Tạo dòng protein tái tổ hợp FliC
• Biểu hiện protein tái tổ hợp FliC
• Tinh sạch protein tái tổ hợp FliC
• Protein flagellin FliC
• Bỗ trợ miễn dịch
• Tạo dòng protein leptin người tái tổ hợp
• Biểu hiện protein leptin người tái tổ hợp
• Tái tổ hợp trong Escherichia coli
• Vector biểu hiện pET 28a
• Tạo dòng protein tái tổ hợp tPMT C780
• Protein tái tổ hợp tPMT C780
• Tinh sạch protein tái tổ hợp tPMT C780
• Vi khuẩn Pasteurella multocida
• Bệnh tụ huyết trùng lợn
• Biểu hiện Protein tái tổ hợp LTA
• Escherichia coli trong tế bào khả biến
• Escherichia coli BL21 (DE3)
• Kháng nguyên tái tổ hợp LTA
• Luận văn Thạc sĩ Công nghệ sinh học
• Protein tái tổ hợp glycoprotein
• Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn
• Sản xuất protein tái tổ hợp
• Vector tái tổ hợp
• Biểu hiện tổ hợp NLI IF
• Tinh sạch Protein
• Tái tổ hợp NLI IF
• Tế bào Escherichia coli
• Protein tái tổ hợp
• Protein Cas9 tái tổ hợp
• Chỉnh sửa gen
• Tổng hợp nhân tạo gen mã hóa Cas9
• Công nghệ Golden gate
• Biểu hiện protein tái tổ hợp
• Tế bào vi khuẩn E coli
• Tái gấp cuộn Protein Leptin
• Protein Leptin người tái tổ hợp
• Thề vùi của Escherichia coli
• Tái gấp cuộn
• Dung dịch hòa tan thể vùi Leptin
• Mẫu Phụ lục
• Phụ lục danh mục hợp đồng
• Hợp đồng tái bảo hiểm
• Tổ chức nhận tái bảo hiểm nước ngoài
• Tổ chức nhận tái bảo hiểm
• Thiết kế Plasmid
• Tái tổ hợp từ vector
• Biểu hiện BAC7
• Phân đoạn BAAMYLF1
• Tổ hợp Enterocin
• Phương pháp giải đại số tổ hợp 12
• Đại số tổ hợp 12
• Đại số tổ hợp
• Phương pháp giải đại số tổ hợp
• Khai triển nhị thức Newton
• Chứng minh đẳng thức tổ hợp
• Nhị thức Newton
• Toán đố về tổ hợp
• ADN
• in vitro
• ligase
• phương pháp tái tổ hợp
• đoạn ADN
• công nghệ gen
• kỹ thuật di truyền
• kỹ thuật gen
• khoa học tự nhiên
• sinh học
• gen tái tổ hợp
• Escherichia coli
• nhiễn sắc thể
• nhiễm sắc
• quá trình giảm phân
• sinh vật
• Protein tái tổ hợp IL=2
• Điều trị ung thư
• Quy trình kỹ thuật hiện đại
• Tách chiết RNA tổng số