TAILIEUCHUNG - Báo cáo khoa học: "TaqMan reverse transcription polymerase chain reaction for the detection of Japanese encephalitis virus"

Tuyển tập các báo cáo nghiên cứu khoa học quốc tế về bệnh thú y đề tài:TaqMan reverse transcription polymerase chain reaction for the detection of Japanese encephalitis virus | J. Vet. Sci. 2004 5 4 345-351 JOURNAL OF Veterinary Science TaqMan reverse transcription polymerase chain reaction for the detection of Japanese encephalitis virus Dong-Kun Yang1 Chang-Hee Kweon1 Byoung-Han Kim1 Seong-In Lim1 Seong-Hee Kim1 Jun-Hun Kwon1 Hong-Ryul Han2 National Veterinary Research and Quarantine Service Ministry of Agriculture and Forestry Anyang 430-824 Korea Department of Veterinary Internal Medicine College of Veterinary Medicine Seoul National University Seoul 151-742 Korea One step TaqMan reverse transcription polymerase chain reaction RT-PCR using TaqMan probe was developed for detection of Japanese encephalitis virus JEV . Real-time RT-PCR was optimized to quantify JEV using the detection system Rotor Gene 2000 detector and dual-labeled fluorogenic probes. The gene specific labeled fluorogenic probe for the 3 non-translated region 3 NTR was used to detect JEV. When the specificity of the assay using specific JEV primers was evaluated by testing three different JEV strains other swine viruses and bovine viral diarrhea virus no cross-reactions were detected with non-JE reference viruses. A single tube TaqMan assay was shown to be 10-fold more sensitive than the conventional two-step RT-PCR method. Detection limits of two step and real-time RT-PCR for JEV were 112 TCID50 ml and TCID50 ml respectively. Quantification of JEV was accomplished by a standard curve plotting cycle threshold values Ct versus infectivity titer. Real-time RT-PCR assay using single tube method could be used as a sensitive diagnostic test and supplied the results in real time for detection and quantification of JEV. We could detect JEV RNA genome in plasma samples of pigs inoculated with KV1899 strain at 2 days post inoculation but couldn t in 41 fetus samples. This assay was sensitive specific rapid and quantitative for the detection of JEV from laboratory and field samples. Key words Real-time RT-PCR JEV TaqMan quantification Introduction Japanese encephalitis JE is

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.