TAILIEUCHUNG - Innovations in Biotechnology Part 4

Tham khảo tài liệu 'innovations in biotechnology part 4', kỹ thuật - công nghệ, cơ khí - chế tạo máy phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | In Vivo Circular RNA Expression by the Permuted Intron-Exon Method 81 still binds to the solid-phase and it can be reused for another round of RNA purification data not shown . Using a streptavidin-coated column GE Healthcare the circular streptavidin RNA aptamer was eluted under denaturing conditions and yielded 21 pg of the circular RNA about 88 recovery from 1 L of E. coli cell culture. Electrophoretic mobility shift assay EMSA also showed that the purified circular streptavidin RNA aptamer from JM109 DE3 retained its binding properties toward streptavidin. To verify the suitability of the circular RNA for future RNA therapeutic uses we measured the half-life of the purified circular RNA aptamer in HeLa cell extracts as a model of intracellular conditions. The estimated half-life of the purified circular streptavidin RNA aptamer was at least 1 386 min while that of the S1 aptamer which is the linear form of the streptavidin RNA aptamer was 43 min. These observations suggested that the circular RNA escapes exoribonuclease-dependent RNA degradation under intracellular conditions. However the circular RNA degraded completely within 15 s in 25 human serum. This is reasonable because human serum contains the RNaseA family ribonucleases Haupenthal et al. 2006 Haupenthal et al. 2007 Turner et al. 2007 . These findings indicated that the circular RNA would be useful under cellular conditions only when delivered into the cell in a precise manner . by using cationic liposomes Sioud Sorensen 2003 Sorensen et al. 2003 or virus vector systems Mi et al. 2006 to prevent RNaseA family ribonuclease-dependent degradation. Constitutive in vivo circular streptavidin RNA aptamer expression by the PIE method We then considered the constitutive circular RNA expression as the previous expression procedure requires monitoring of the optical density for optimal IPTG induction see . For constitutive expression of the RNA sequence in E. coli we followed the procedure of Ponchon

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
69    272    11
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.