TAILIEUCHUNG - Thí nghiệm nuôi cấy mô và tế bào thực vật - Bài 7

Chuyển gen thông qua Agrobacterium tumefaciens I. Mục đích và yêu cầu Các thực vật chuyển gen đã được tạo ra bằng nhiều kỹ thuật khác nhau. Có hai phương thức chính: - Chuyển gen trực tiếp: bắn gen, xung điện, vi tiêm, siêu âm, silicon carbide, thông qua ống phấn, điện di . - Chuyển gen gián tiếp (nhờ vi sinh vật): Agrobacterium tumefaciens. Phương pháp được sử dụng thông dụng và ít tốn kém hơn cả là chuyển gen gián tiếp thông qua Agrobacterium. . | 185 Bài 7 Chuyển gen thông qua Agrobacterium tumefaciens I. Mục đích và yêu cầu Các thực vật chuyển gen đã được tạo ra bằng nhiều kỹ thuật khác nhau. Có hai phương thức chính - Chuyển gen trực tiếp bắn gen xung điện vi tiêm siêu âm silicon carbide thông qua ống phấn điện di . - Chuyển gen gián tiếp nhờ vi sinh vật Agrobacterium tumefaciens. Phương pháp được sử dụng thông dụng và ít tốn kém hơn cả là chuyển gen gián tiếp thông qua Agrobacterium. Agrobacterium tumefaciens là một loài vi khuẩn Gram âm có trong đất thường được sử dụng để tiến hành biến nạp di truyền trên đối tượng thực vật. Đoạn DNA muốn chuyển vào một cây nào đó có thể được thao tác dễ dàng trên E. coli và sau đó chuyển trở lại vào Agrobacterium. Việc chuyển gen vào thực vật qua Agrobacterium đã thực hiện thành công trên nhiều loại cây thuốc lá đậu tương các cây họ đậu nhiệt đới bông cải khoai tây. II. Dụng cụ thiết bị hóa chất 1. Dụng cụ - Bình tam giác 250 mL ống nghiệm có nắp vặn - Giấy thấm vô trùng - Forceps kéo dao mổ - Que cấy vi sinh - Đĩa petri plastic và thủy tinh vô trùng - Giấy parafilm - Giấy nhôm - Tube eppendorf 1 5-2 mL - Cốc chịu nhiệt ống đong micropipette 2. Thiết bị - Nồi khử trùng 186 - Tủ sấy - Laminar - Tủ lạnh - Micro wave - Cân phân tích 10-4g - Cân kỹ thuật 10-2g - Máy cất nước 2 lần - Máy ly tâm lạnh 14000 rpm cho tube 1 5-2 mL 3. Hóa chất - Môi trường cơ bản MS - Môi trường nuôi cấy vi khuẩn LB - Các loại kháng sinh kanamycin rifampicin và cefotaxim - Agar - MgSO4 10mM - Dung dịch stock các chất kích thích sinh trưởng NAA và BAP - Cồn 90 - Nước cất vô trùng III. Phương pháp tiến hành 1. Nguyên liệu - E. coli chủng TOP 10 có mang pRK 2013 helper plasmid - E. coli chủng TOP 10 có mang vector pBI 121 insert DNA gen ngoại lai mang tính trạng mong muốn - Agrobacterium tumenfaciens chủng LBA 4404. - Cây thuốc lá in vitro. 2. Chuẩn bị môi trường . Môi trường LB - Bacto-tryptone 3 g - Yeast-Extract 1 5 g - NaCl 3 g - Nước cất đến đủ 300mL. 187 . Môi trường LB đặc Môi trường .

• Sinh học
• Thí nghiệm sinh học
• nuôi cấy mô
• tế bào thực vật
• sinh học phân tử
• dinh dưỡng
• Bài thuyết trình An toàn phòng thí nghiệm
• An toàn Sinh học PTN Y sinh
• Phòng thí nghiệm Y sinh
• Yêu cầu phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguyên tắc phòng thí nghiệm Y sinh
• Nguy cơ phòn thí nghiệm Y sinh
• Đề tài nghiên cứu khoa học
• Thực hành thí nghiệm môn Hóa học
• Phương pháp hướng dẫn thí nghiệm Hóa học
• Hướng dẫn học sinh thí nghiệm Hóa học
• Các loại thí nghiệm Hóa học
• Các phương pháp dạy thí nghiệm
• Thí nghiệm công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học
• Thí nghiệm vi sinh vật học
• Vi sinh vật học
• Nghiên cứu vi sinh vật
• Bảo quản giống vi sinh vật
• Vi sinh vật gây bệnh
• Chất lượng giống vi sinh vật
• Giống vi sinh vật
• Môi trường nuôi cấy vi sinh vật
• Báo cáo thực tập
• Quá trình thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thiết bị thí nghiệm năng lượng sinh học
• Phòng thí nghiệm năng lượng sinh học
• Thí nghiệm năng lượng sinh học
• Nghiên cứu ethanol từ rơm rạ
• Thí nghiệm đường cong sinh trưởng
• thí nghiệm với nấm men
• phương pháp thí nghiệm
• Tăng cường hứng thú học tập
• Hứng thú học tập
• Bài tập thí nghiệm
• Thí nghiệm giáo khoa
• Thí nghiệm tự tạo
• Thí nghiệm trên máy vi tính
• Thí nghiệm sự thẩm thấu tế bào
• Tính thấm của tế bào
• Sự thẩm thấu tế bào
• Thực hành thí nghiệm sinh học 10
• Thao tác thí nghiệm sinh học
• Phòng thí nghiệm
• An toàn sinh học
• An ninh sinh học phòng thí nghiệm
• Trang thiết bị phòng thí nghiệm
• Phòng thí nghiệm cơ bản
• Thí nghiệm vật lý
• Dạy học thí nghiệm vật lý
• Hướng dẫn sử dụng thí nghiệm vật lý
• Tổ chức thí nghiệm vật lý
• Phương pháp dạy học Vật lý
• Dạy học Vật lý theo hướng tích cực
• An toàn phòng thí nghiệm
• Nội quy phòng thí nghiệm
• An toàn hóa chất
• Dụng cụ phòng thí nghiệm
• Xây dựng E book học phần Thí nghiệm
• Thí nghiệm thực hành phương pháp dạy học
• Thí nghiệm Hóa học
• E book dạy học thí nghiệm Hóa học
• Dạy học tích cực
• Công nghệ thông tin trong dạy học
• Cách sử dụng thí nghiệm Hóa học
• Tổ chức hoạt động học tập tích cực
• Tổ chức học tập cho HS lớp 10
• Dạy học có sử dụng thí nghiệm
• Thiết kế thí nghiệm dạy học Hóa học
• Một số thí nghiệm về enzim
• pH đối với enzim
• Tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm tính đặc hiệu của enzim
• Thí nghiệm sinh học 6
• Sinh học 6
• Thực hành sinh học
• Thí nghiệm quang hợp
• Xác định chất khí thải
• Xác định chất lá cây
• Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm
• Vi sinh vật học thực phẩm
• Phương pháp định lượng vi sinh vật
• Định lượng vi sinh vật
• Tính chất sinh lý vi sinh vật
• Luận án Tiến sĩ
• Luận án Khoa học Giáo dục
• Phương pháp dạy học bộ môn Hóa học
• Phát triển năng lực dạy học thí nghiệm
• Đào tạo sinh viên sư phạm hóa học
• Thí nghiệm thực hành Hoá
• Quan sát tế bào dưới kính hiển vi
• Thí nghiệm co nguyên sinh
• Thí nghiệm phản co nguyên sinh
• Cấu tạo tế bào
• Hình dạng tế bào
• Thí nghiệm hóa sinh thực phẩm
• Thí nghiệm hóa sinh
• Hóa sinh thực phẩm
• Tính chất của protein
• Tính chất động học của enzym ureaza
• Thí nghiệm tính chất của protein
• Chỉ tiêu vi sinh vật của thực phẩm
• Vệ sinh công nghiệp
• Kiểm tra vi sinh vật
• Đánh giá thực trạng thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao hiệu quả thí nghiệm vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí đại cương
• Nâng cao chất lượng thực hành vật lí đại cương
• Thí nghiệm vật lí trong trường phổ thông
• Thí nghiệm Sinh học 7 Bài 52
• Thực hành Thí nghiệm Sinh học
• Giáo án điện tử Sinh học
• Thiết kế bài giảng Sinh học bài 52
• Sự sinh sản của thú
• Sự di chuyển của thú