TAILIEUCHUNG - Kết quả tách Enzim Ribonuclea từ nọc rắn hổ mang bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion trên cột Cm-xen-lu-lô
Bài viết trình bày tách chiết và làm sạch RNaza từ nọc rắn hổ mang để nhận chế phẩm Enzim có độ sạch cao, phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo về tương tác RNara nọc rắn với RI là rất cần thiết. | Kết quả tỏch Enzim Ribonuclea từ nọc rắn hổ mang bằng phương phỏp sắc ký trao đổi ion trờn cột Cm-xen-lu-lụ 28(3): 83-87 Tạp chí Sinh học 9-2006 Kết quả tách enzim ribonucleaza từ nọc rắn hổ mang bằng ph−ơng pháp sắc ký trao đổi ion trên cột CM-xen-lu-lô Nguyễn Văn Thiết, Giang Thái Sơn Viện Công nghệ sinh học Các nghiên cứu trước đây của chúng tôi đã cacbôxymethylxenlulô (CM-xen-lu-lô) của hãng cho thấy enzim ribonucleaza (RNaza) trong nọc Sigma. Glyxin (Gly) của hãng Prolabo. Các hóa rắn hổ mang Naja atra (Cantor, 1842) Việt Nam chất khác đều có độ sạch phân tích cao. thể hiện hoạt tính xúc tác cao nhất trong vùng Phân tách RNaza bằng ph−ơng pháp sắc ký axit [7, 8], với pH tối −u (pHopt) t−ơng đ−ơng với trao đổi ion trên cột (∅1,6 ì 12-15 cm) CM- pHopt của pepsin [1] trong dạ dày của người và xen-lu-lô. Trong mỗi lần sắc ký cho lên cột (đã các động vật bậc cao khác: pHopt = 2,53 ± 0,30 được cân bằng trước với đệm xitrat 10 mM có [8]; trong khi RNaza trong nọc rắn hổ mang Naja giá trị pH khác nhau là 5,8; 5,6; 5,5; 5,2; 4,8 và oxiana vùng Trung á [10], RNaza trong nọc rắn 4,4) khoảng 100 mg nọc rắn đông khô (10 ml hổ mang Naja naja vùng Guntur của ấn Độ [4] chế phẩm Eo), rửa cột bằng một thể tích đệm và tất cả các enzim khác thuộc siêu họ RNaza A ban đầu, sau đó thôi protein ra khỏi cột bằng (bao gồm tất cả các RNaza ngoại tiết ở động vật gradient nồng độ NaCl 0 ữ 1,0 M NaCl với thể có x−ơng sống, trừ lớp Cá) [5] đều có pHopt > 7. tích chung là 120 ml (bình chứa: 60 ml NaCl 1 Hơn nữa, những kết quả nghiên cứu bước đầu của M trong đệm xitrat 10 mM; bình khuấy: 60 ml chúng tôi cho thấy RNaza trong nọc rắn hổ mang đệm xitrat 10 mM), tốc độ chảy 1 ml/phút, thu Việt Nam không bị ức chế bởi protein ức chế mỗi phân đoạn 3 ml. Sau khi kết thúc công việc RNaza (RI) từ nhau thai người [11]. Điều này có sắc ký, hoạt tính của RNaza trong mỗi phân nghĩa là RNaza trong nọc rắn hổ mang không đoạn được xác định theo ph−ơng pháp
đang nạp các trang xem trước