TAILIEUCHUNG - Phát hiện các gien mã hóa Hemolysin bền nhiệt và không bền nhiệt của Vibro Parahaemolyticus bằng phương pháp PCR

Bài viết trình bày ứng dụng phương pháp PCR để xác định các gien TLH và TDH của các chủng cho phép nhận diện các chủng mang gien gây bệnh. bài viết để nắm chi tiết nội dung bài viết. | Phỏt hiện cỏc gien mó húa Hemolysin bền nhiệt và khụng bền nhiệt của Vibro Parahaemolyticus bằng phương phỏp PCR 42 25(4): 42-46 Tạp chí Sinh học 12-2003 Phát hiện các gien m hóa hemolysin bền nhiệt và không bền nhiệt của Vibrio parahaemolyticus bằng ph−ơng pháp PCR Nguyễn Hoàng Uyên, Nguyễn Chí Thuận, Nguyễn Thị Thanh Lợi, Nguyễn Thị Hồng Hạnh Viện Công nghệ sinh học Vibrio parahaemolyticus là vi khuẩn gram trong 8-16 giờ. Phân lập Vibrio spp. trên môi âm khu trú trong môi trường tự nhiên ven biển. trường TCBS. Định tên dựa trên các đặc điểm Vi khuẩn này có khả năng gây thành dịch bệnh sinh lý sinh hóa bằng test thử API-20E. với nhiều đối tượng hải sản nuôi như tôm, cua, b) Kỹ thuật PCR hầu, , Một số chủng có khả năng gây bệnh ở ADN tổng số của vi khuẩn được tách chiết ng−òi [2]. Ph−ơng pháp phân loại vi sinh vật dựa và làm sạch theo Promega [6]. Kiểm tra độ sạch theo đặc điểm sinh lý và chỉ tiêu sinh hóa, có trên gel agaroza 1%, đệm TAE 1X. thể dễ dàng phát hiện V. parahaemolyticus, nhưng không phân biệt được các chủng mang Cặp mồi Vp tlh-1 dùng để nhân gien tlh các gien gây bệnh. Kết quả nghiên cứu bộ gien được thiết kế dựa trên trình tự gien (tlh) của V. của V. parahaemolyticus đO xác định được gien parahaemolyticus No M36437 [8]: tlh-1: 5' - mO hóa hemolysin không bền nhiệt (tlh) mO hóa AAA GCG GAT TAT GCA GAA GCA CTG - protein TLH và là gien đặc hiệu loài [8], gien 3' ; tlh-2: 5'- GCT ACT TTC TAG CAT TTT mO hóa hemolysin bền nhiệt (tdh) mO hóa CTC TGC -3'. Cặp mồi Vptdh-2 dùng phát hiện protein TDH liên quan đến nguồn gốc gây các gien tdh được thiết kế dựa trên trình tự gien tdh bệnh nhiễm khuẩn, viêm loét dạ dày của người của V. parahaemolyticus No M10069 [4] : tdh- [1]. Việc ứng dụng ph−ơng pháp PCR để xác 1: 5’-GCT TAC AGC TTG GTA TGC C-3’; tdh- định các gien tlh và tdh của các chủng V. 2: 5’-GGA GAT AGA AGA AAC CTT CC-3’. parahaemolyticus cho phép nhận diện các Phản ứng PCR nhân gien với thể tích

• Sinh học
• Phát hiện các gien mã hóa
• Gien mã hóa Hemolysin bền nhiệt
• Vibro Parahaemolyticus bằng phương pháp PCR
• Phương pháp PCR
• Các chủng mang gien gây bệnh