TAILIEUCHUNG - Thiết lập các bộ panel mẫu ADN để đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của phản ứng PCR đa mồi phát hiện Bacillus anthracis

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm thiết lập các bộ panel mẫu ADN để khảo sát độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng PCR đa mồi với 3 cặp mồi vrrAF1/R1, pagAF1/R1, capAF1/R1 xác định B. anthracis. | T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 1-2017 THIẾT LẬP CÁC BỘ PANEL MẪU ADN ĐỂ ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY, ĐỘ ĐẶC HIỆU CỦA PHẢN ỨNG PCR ĐA MỒI PHÁT HIỆN BACILLUS ANTHRACIS Nguy n Thái Sơn*; Tr n Danh Kh i**; Đinh Th Thu H ng*** TÓM TẮT Mục tiêu: thiết lập các bộ panel mẫu ADN để khảo sát độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng PCR đa mồi với 3 cặp mồi vrrAF1/R1, pagAF1/R1, capAF1/R1 xác định B. anthracis. Vật liệu và phương pháp: các bộ panel mẫu ADN được thiết lập theo hướng dẫn của WHO và NIBSC (Viện Quốc gia các mẫu chuẩn sinh học, Anh). Các bộ mẫu chuẩn ADN được tạo ra là panel ngưỡng phát hiện, panel độ nhạy (sử dụng plasmid tái tổ hợp chứa các gen đích đặc trưng và gen độc lực vrrA, pagA, capA chủng B. anthracis Ba1) và panel đặc hiệu (sử dụng ADN chủng chuẩn Bacillus cereus Bc1). Kết quả và kết luận: ngưỡng phát hiện của phản ứng là 5 x 101 copies/phản ứng cùng độ nhạy, độ đặc hiệu đạt 100%. Đây là cơ sở cho các thử nghiệm trên mẫu thực địa. * Từ khóa: Vi khuẩn than; Bộ mẫu chuẩn; PCR đa mồi; Độ đặc hiệu; Độ nhạy. Establishment the In-House DNA Panels for Validation of Multiplex PCR Assay in Detecting Bacillus Anthracis Summary Objectives: To analyze the sensitivity and specificity of multiplex PCR assay that includes three primer pairs vrrAF1/R1, pagAF1/R1, capAF1/R1 for B. anthracis identification on the inhouse DNA panels. Materials and methods: Since there is no international or national reference standard (panels) for calibration of the anthrax PCR kit, in-house reference standards were created according to WHO and NIBSC (National Institute for Biological Standards and Control) guidelines. The in-house DNA standards consist of sensitivity panel (using recombinant plasmids containing the full-length sequence of target vrrA gene in bacterial chromosome, pagA and capA genes on the virulence plasmid pXO1 and pXO2, respectively) of B. anthracis strain Ba1 and a specificity panel (using DNA genome of Bacillus cereus strain Bc1). Results and conclusion: The detection limit of

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.