TAILIEUCHUNG - Báo cáo " Tổng hợp và biểu hiện gen mã hoá enterocin vòng AS-48 của vi khuẩn Enterococcus faecalis trong tế bào Escherichia coli "

Tổng hợp và biểu hiện gen mã hoá enterocin vòng AS-48 của vi khuẩn Enterococcus faecalis trong tế bào Escherichia coli | Tạp chí Công nghệ Sinh học 6 3 367-373 2008 TÔNG HỢP VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA ENTEROCIN VÒNG AS-48 CỦA VI KHUẢN ENTEROCOCCUS FAECALIS TRONG TẾ BÀO ESCHERICHIA COLI ị Trần Ngọc Tân1 Đinh Th Thu Hằng2 Nguyễn Thanh Nhàn1 Phạm Thùy Linh3 Đỗ Th Huyền1 Lê Văn Tnrỉmg1 Trương Nam Hải1 1 Viện Công nghệ sinh học Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội 3 Viện Hóa học Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam TÓM TẮT Enterocin AS-48 là một peptide dạng vòng bao gồm 70 amino acid. Được sinh tồnệ hợp bởi chủng vi khuẩn Enterococcus faecalis peptide này có phổ hoạt tính kháng khuẩn khá rộng đoi với cả vi khuẩn Gram dương và Gram âm. Do đó nhằm mục đích tạo ra sản phẩm enterocin tái tổ hợp ưinh tự nucleotide của gen as-48 từ GenBank 210 bp được tổng hợp nhân tạo dựa trên kỹ thuật PCR hai bước. Bước 1 tiến hành PCR tự mồi với hai đoạn mồi dài có trình tự gối lên nhau. Bước 2 sử dụng sàn phẩm PCR ở bước một làm khuôn đê nhân gen as-48 bằng kỹ thuật PCR bình thường với 2 mồi ngắn. Sản phẩm PCR sau đó được thu nhận lại đê tách dòng trong vector pJETl. Trình tự 210 nucleotide của gen trong vector tách dòng được xác định đúng như mong muốn. Để tạo ra sản phẩm enterocin AS-48 tái tổ hợp có hoạt tính gen as-48 đã tổng hợp được chuyển vào vector biểu hiện pTWIN 1. Quá trình biểu hiện của vector này trong tể bào E. coll ER2566 được điều khiển bời promoter mạnh T7. Sản phẩm của quá ưình biêu hiện AS-48 tái tổ hợp là một protein dung hợp giữa đoạn peptide AS-48 với hai íntein nằm ở 2 đầu c và đầu N. Kiểm tra và so sánh kích thước phân tử của sản phẩm protein dung hợp bằng kỹ thuật điện di protein SDS-PAGE với kỹ thuật Western blot cho thấy sự tương đồng vê kích thước của protein dung hợp khoảng 63 kDa. Kết quà này cho phép khẳng định lần đầu tiên gen as-48 đã được tổng hợp và biểu hiện thành công đồng thời mở ra ưiển vọng mới trong việc nghiên cứu hoạt tính của enterocin AS-48 tái tồ hợp. Từ khóa Biểu hiện E. coỉì ER2566 enterocin AS-48 peptide .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.