TAILIEUCHUNG - KỸ THUẬT PCR (Polymerase Chain Reaction)

Kỹ thuật PCR (viết tắt từ chữ Polymerase Chain Reaction), hay còn gọi là phản ứng tổng hợp dây chuyền nhờ polymerase hoặc phản ứng chuỗi tổng hợp ADN, do Karl Mullis và cộng sự phát minh năm 1985. Kỹ thuật PCR đã đưa lại một cuộc cách mạng trong di truyền phân tử, khuếch đại in vitro có chọn lọc bằng tạo dòng in vitro mà không cần sự hiện diện của tế bào, khắc phục được nhược điểm thao tác phức tạp và cần thời gian dài của kỹ thuật tạo dòng in vivo. Nhờ phản ứng PCR,. | KỸ THUẬT PCR Polymerase Chain Reaction I. MỞ ĐẦU - Kỹ thuật PCR viết tắt từ chữ Polymerase Chain Reaction hay còn gọi là phản ứng tổng hợp dây chuyền nhờ polymerase hoặc phản ứng chuỗi tổng hợp ADN do Karl Mullis và cộng sự phát minh năm 1985. Kỹ thuật PCR đã đưa lại một cuộc cách mạng trong di truyền phân tử khuếch đại in vitro có chọn lọc bằng tạo dòng in vitro mà không cần sự hiện diện của tế bào khắc phục được nhược điểm thao tác phức tạp và cần thời gian dài của kỹ thuật tạo dòng in vivo. Nhờ phản ứng PCR một đoạn ADN ở một vùng bất kỳ trong bộ gien được khuếch đại lên rất nhiều lần khi trình tự nucleotide ở hai đầu đoạn đó đã biết. II. NGUYÊN TẮC CƠ BẢN - Kỹ thuật PCR sử dụng các đặc điểm của quá trình sao chép ADN. ADN polymerase dùng các đoạn ADN mạch đơn làm khuôn để tổng hợp nên sợi mới bổ sung với sợi này. Các sợi ADN khuôn mạch đơn có thể tạo ra theo cách đơn giản là đun nóng dung dịch ADN mạch kép đến gần nhiệt độ sôi. - ADN polymerase cũng đòi hỏi phải có một đoạn ngắn ADN mạch đơn đoạn mồi để khởi đầu quá trình tổng hợp. Do đó để khởi đầu quá trình tổng hợp cần cung cấp đoạn mồi oligonucleotid có độ dài từ 6 đến 30 nucleotid đoạn này gắn bổ sung vào ADN khuôn tại điểm khởi đầu sao chép. - Cả hai sợi ADN đều được dùng để làm khuôn cho quá trình tổng hợp nếu các đoạn mồi oligonucleotid được cung cấp cho cả hai sợi. Trong kỹ thuật PCR các đoạn mồi được chọn để chặn hai đầu của đoạn ADN cần nhân lên sao cho các sợi ADN tổng hợp mới được bắt đầu từ mỗi đoạn mồi và kéo dài về phía đoạn mồi nằm trên sợi kia Hình 1c . Như vậy sau mỗi chu kỳ các điểm bám cho các đoạn mồi lại xuất hiện trên mỗi sợi ADN mới được tổng hợp. 5 3 3 Các đoạn mồi 5 5 3 3 5 5 3 3 5 3 5 5 3 a Vật liệu khởi đầu là phân tử ADN mạch kép b Các sợi tách nhau ra khi gia nhiệt 94oC sau đó hạ xuống 30-65 C trong 30 giây để các đoạn mồi gắn vào hai vị trí tương hợp trên ADN c Taq polymerase tổng hợp các sợi ADN mới tương hợp với sợi khuôn bắt đầu từ đoạn mồi kéo dài về phía đoạn mồi nằm bên sợi

• Sinh học
• lý thuyết sinh học
• toán di truyền
• đề thi học sinh giỏi sinh
• giáo trình di truyền học
• chuyên ngành y khoa
• tài liệu y khoa
• lý thuyết y học
• giáo trình y học
• bài giảng y học
• bệnh lâm sàng
• chuẩn đoán bệnh
• ôn tập sinh học
• sinh học
• ôn tập lý thuyết sinh học
• tài liệu ôn tập sinh học
• tóm tắt lý thuyết sinh học
• lý thuyết sinh học 12
• tổng hợp kiến thức sinh 12
• ôn thi tốt nghiệp môn sinh
• luyện thi sinh học 12
• sơ đồ tư duy
• sơ đồ lý thuyết sinh học
• tổng hợp lý thuyết sinh học
• câu hỏi ôn tập sinh học
• câu hỏi ôn tập
• ôn tập tổng hợp lý thuyết sinh học
• Môn Sinh học 12
• Kiến thức cơ bản Sinh 12
• Sinh học THPT
• Vi sinh vật học
• Lý thuyết vi sinh vật học
• Bài tập vi sinh vật học
• Vi sinh vật
• Vi sinh vật học thực phẩm
• Vi sinh vật học công nghiệp
• Sinh thái học vi sinh vật
• chuyên đề sinh học
• di truyền học
• bài tập trắc nghiệm sinh học
• tài liệu học môn sinh
• bài tập di truyền
• bí quyết học lý thuyết môn sinh học
• Lý thuyết vi sinh vật
• Sinh học tế bào
• Vi sinh vật cơ sở
• Tế bào vi sinh vật
• Sinh lý vi sinh vật
• Di truyền học vi sinh vật
• Ôn thi học sinh giỏi môn Toán
• Ôn thi học sinh giỏi môn Lý
• Ôn tập Lý 10
• Ôn tập Lý 11 HK2
• Lý thuyết Lý 10
• Lý thuyết Lý 11
• Lý thuyết Toán 10
• Lý thuyết Toán 11
• Tóm tắt lý thuyết sinh học 12
• Ôn tập Sinh học 12
• Kiến thức cơ bản Sinh học 12
• Ôn thi môn Sinh học
• đề thi học sinh giỏi sinh học
• phương pháp giải nhanh sinh học
• phương pháp học sinh
• bí quyết học môn sinh học
• phương pháp học sinh học
• luyện thi sinh học
• ôn thi đại học môn sinh học 2013
• Sinh trưởng và sinh sản của vi sinh vật
• Ôn tập Sinh học 10 bài 25
• Ôn tập Sinh học 10 bài 26
• Bài tập Sinh học 10
• Lý thuyết Sinh học 10
• Trắc nghiệm Sinh học 10
• Giáo trình Vi sinh vật học
• Trao đổi chất ở sinh vật
• Sinh trưởng ở sinh vật
• Bí quyết chinh phục lý thuyết sinh học
• Bài tập sinh học
• Di truyền học con người
• Ứng dụng di truyền học
• Sinh thái học
• phương pháp học môn sinh
• Khoa Học Tự Nhiên
• Sinh vật học
• Bài tập Sinh học 12
• Sinh học 12
• Bài tập tự luận Sinh học 12
• Bài tập trắc nghiệm Sinh học 12
• Câu hỏi Sinh học
• Bài giảng lý thuyết Ký sinh trùng y học
• Bài giảng Ký sinh trùng y học
• Đại cương về ký sinh trùng
• Hiện tượng ký sinh
• Phân loại ký sinh trùng
• Đặc điểm dịch tễ bệnh ký sinh trùng
• Dịch tễ bệnh ký sinh trùng ở Việt Nam
• Công nghệ ADN
• Genomics vi sinh vật
• sổ tay sinh học
• công nghệ sinh học
• ký sinh thực vật
• Sinh học vi sinh vật
• Virut và bệnh truyền nhiễm
• Ôn tập Sinh học 10 HK2
• Tài liệu Sinh học
• Ôn thi Sinh học
• Thi tốt nghiệp Sinh học
• Ôn thi Sinh
• ôn thi đại học
• ngân hàng câu hỏi
• sinh học di truyền
• Sinh học 10
• Sinh học 10 Bài 11
• Vận chuyển các chất qua màng sinh chất
• Màng sinh chất