TAILIEUCHUNG - Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 13

Tham khảo tài liệu 'hộp điện trong công nghệ dna part 13', kỹ thuật - công nghệ, điện - điện tử phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | . Bổ sung 35 DL TEMED vào mỗi 100 mL dung dịch tạo polyacrylamide gel trộn hỗn hợp bằng cách vortex. Rót dung dịch tạo gel vào giữa hai tấm kính. Gắn nhanh lược vào tránh bọt khí ở răng lược giếng . Đỉnh của răng lược phải hơi cao hơn mép gel. Nếu cần bổ sung thêm một ít dung dịch tạo gel để làm đầy mép gel. Bảng . Dung tích của các chất dùng cho polyacrylamide gel Duug dịch Số inL cũa cãc notig độ khác nhau đề chuẩn bị gel 3 5 5 0 s 0 12 0 20 0 3 0 acrylamide bao gồm bis-acrylamide 11 0 16 6 26 6 40 0 66 6 Nước 67 6 02 7 52 7 39 3 12 7 íxTBE 20 0 20 0 20 0 20 0 20 0 10 ammonium persulphate 0 7 0 7 0 7 0 7 0 7 . Cho phép acrylamide polymer hóa trong khoảng 60 phút ở nhiệt độ phòng bổ sung thêm dung dịch tạo gel nếu thấy gel co vào nhiều. . Sau khi polymer hóa hoàn toàn rút lược cẩn thận tháo băng dính ra khỏi đáy khuôn gel. Gắn khuôn gel vào buồng điện di và làm đầy buồng điện di bằng đệm 1X TBE dùng Pasteur pipette để phá các bọt khí ra khỏi đáy gel và các giếng bằng đệm 1X TBE. . Trộn các mẫu DNA với một lượng thích hợp của đệm 6 gel-loading dye. Đặt mẫu vào trong giếng bằng micropipette hoặc Hamilton syringe. . Nối buồng điện di với bộ nguồn. Polyacrylamide gel không biến tính thường chạy điện di trong khoảng 1 V cm đến 8 V cm. Chạy gel cho đến khi thuốc nhuộm chỉ thị dịch chuyển đến vị trí mong muốn. Tắt nguồn lấy khuôn gel ra và đặt lên bàn. Tháo tấm kính nhỏ ở mặt trước ra tấm kính lớn ở phía sau được dùng làm giá đỡ và chuẩn bị nhuộm gel. . Phát hiện DNA trong polyacrylamide gel . Nhuộm bằng ethidium bromide Polyacrylamide có thể làm mất huỳnh quang của EtBr do đó không thể phát hiện các băng DNA bằng phương pháp này nếu hàm lượng của nó thấp hơn 10 ng. Ngâm nhẹ gel cùng với tấm kính đỡ vào trong dung dịch nhuộm 0 5 ũg mL EtBr trong 1 TBE . Cho vừa đủ dung dịch nhuộm phủ hoàn toàn lên bề mặt gel. Sau khi nhuộm 30-45 phút ở nhiệt độ phòng lấy gel và tấm kính đỡ ra cẩn thận thấm khô bề mặt gel bằng giấy thấm Kimwipe. Phủ lên .

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
31    426    56
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.