Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Sức khỏe - Y tế
Văn bản luật
Nông Lâm Ngư
Kỹ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Tài liệu HOT
Tìm
Danh mục
Kinh doanh - Marketing
Kinh tế quản lý
Biểu mẫu - Văn bản
Tài chính - Ngân hàng
Công nghệ thông tin
Tiếng anh ngoại ngữ
Kĩ thuật công nghệ
Khoa học tự nhiên
Khoa học xã hội
Văn hóa nghệ thuật
Y tế sức khỏe
Văn bản luật
Nông lâm ngư
Kĩ năng mềm
Luận văn - Báo cáo
Giải trí - Thư giãn
Tài liệu phổ thông
Văn mẫu
Thông tin
Điều khoản sử dụng
Quy định bảo mật
Quy chế hoạt động
Chính sách bản quyền
0
Trang chủ
Khoa Học Tự Nhiên
Sinh học
Chương 6: Tạo dòng và xây dựng thư viện cDNA
TAILIEUCHUNG - Chương 6: Tạo dòng và xây dựng thư viện cDNA
Các phân tử RNA không bền, dễ bị phân hủy bởi các ribonuclease (RNase). Để thu được dịch chiết RNA có chất lượng tốt, cần phải giảm thiểu hoạt tính của RNase được giải phóng trong suốt quá trình sinh tan tế bào hoặc từ các nguồn tiềm tàng khác trong phòng thí nghiệm (dụng cụ, bàn làm việc, bàn tay của kỹ thuật viên.) bằng các nhân tố ức chế RNase, bao gồm các nhân tố ức chế protein của RNase, các phức hợp vanadyl-ribonucleoside hoặc macaloid. . | Chương 6 Tạo dòng và xây dựng thư viện cDNA I. Tách chiết tinh sạch và phân tích RNA 1. Tách chiết và tinh sạch RNA . Tách chiết RNA tổng số - Kiểm soát hoạt tính ribonuclease. Các phân tử RNA không bền dễ bị phân hủy bởi các ribonuclease RNase . Để thu được dịch chiết RNA có chất lượng tốt cần phải giảm thiểu hoạt tính của RNase được giải phóng trong suốt quá trình sinh tan tế bào hoặc từ các nguồn tiềm tàng khác trong phòng thí nghiệm dụng cụ bàn làm việc bàn tay của kỹ thuật viên. bằng các nhân tố ức chế RNase bao gồm các nhân tố ức chế protein của RNase các phức hợp vanadyl-ribonucleoside hoặc macaloid. - Nguyên lý. Phương pháp tách chiết RNA tổng số bao gồm các bước cơ bản giống như tách chiết DNA. Tế bào hoặc mô được nghiền trong dung dịch có chứa chất tẩy mạnh là SDS sodium dodecyl sulphate sarcocyl ở nồng độ cao các dung dịch muối mạnh guanidinium thiocyanate-GTC để hòa tan RNA và kết tủa các protein bị biến tính ở cùng một thời gian và một chất khử b-mercaptoethanol . Hai loại chất sau có tác dụng ức chế các RNase nội bào và tách các protein liên kết khỏi phân tử RNA. Bên cạnh đó có thể bổ sung các protease chẳng hạn protease K để gây biến tính các thành phần protein của phức chất RNA-protein. Các protein được loại bỏ khỏi mẫu bằng cách chiết ly tâm với phenol phenol chloroform và chloroform. RNA hòa tan trong pha nước được kết tủa bằng ethanol hoặc isopropanol và được thu nhận lại qua ly tâm. RNA được bảo quản trên một năm ở -70oC trong nước có chứa RNasin nhân tố ức chế RNase . . Phân lập RNA poly A RNA tổng số của tế bào chứa khoảng 90-99 rRNA và tRNA trong đó rRNA chiếm khoảng 80-85 và tRNA chiếm khoảng 15-20 . Các RNA này có kích thước và trình tự xác định và có thể được tách riêng dễ dàng bằng điện di hoặc ly tâm. Riêng mRNA chỉ chiếm khoảng 1-5 RNA tổng số của tế bào lại có kích thước và trình tự rất đa dạng. Tuy nhiên chúng có một điểm chung là cấu trúc đuôi polyA có thể lên tới 100A . Dựa vào cấu trúc này và đặc tính liên kết bổ sung A-T của
Tấn Tài
95
17
pdf
Báo lỗi
Trùng lắp nội dung
Văn hóa đồi trụy
Phản động
Bản quyền
File lỗi
Khác
Upload
Tải xuống
đang nạp các trang xem trước
Bấm vào đây để xem trước nội dung
Tải xuống
TÀI LIỆU LIÊN QUAN
Bài giảng Biểu hiện của DNA tái tổ hợp ở E. coli - Nguyễn Vũ Phong
19
110
1
Bài giảng Công nghệ DNA tái tổ hợp - Nguyễn Hoàng Lộc
128
122
2
Giáo trình Công nghệ DNA tái tổ hợp
175
209
10
Biểu hiện và thu nhận enzyme T4 DNA ligase tái tổ hợp trong E. coli
7
114
6
Bài giảng Công nghệ DNA tái tổ hợp
7
105
0
Bài giảng Công nghệ sinh học: Công nghệ DNA tổ hợp - Nguyễn Vũ Phong
7
110
0
DNA tái tổ hợp được hoàn thành.
5
74
0
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Phụ lục
27
90
0
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 1
23
75
0
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2
25
86
0
TÀI LIỆU XEM NHIỀU
Một Case Về Hematology (1)
8
462069
59
Giới thiệu :Lập trình mã nguồn mở
14
23844
75
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
11128
537
Câu hỏi và đáp án bài tập tình huống Quản trị học
14
10374
458
Phân tích và làm rõ ý kiến sau: “Bài thơ Tự tình II vừa nói lên bi kịch duyên phận vừa cho thấy khát vọng sống, khát vọng hạnh phúc của Hồ Xuân Hương”
3
9653
106
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8652
1150
Tiểu luận: Nội dung tư tưởng Hồ Chí Minh về đạo đức
16
8362
423
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7947
2250
Đề tài: Dự án kinh doanh thời trang quần áo nữ
17
6982
260
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
6771
1610
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Sinh học
DNA tái tổ hợp
công nghệ gen
kỹ thuật di truyền
kỹ thuật gen
khoa học tự nhiên
sinh học
thư viện cDNA
DNA tái tổ hợp ở E
coli
Biểu hiện DNA tái tổ hợp ở E
Protein nguyên thể
Protein dung hợp
Vector biểu hiện
Công nghệ DNA tái tổ hợp
Bài giảng Công nghệ DNA tái tổ hợp
DNA Polymerase
Phân tử DNA
Tạo dòng phân tử
Công nghệ DNA
Giáo trình sinh học
hệ thống vector
Kỹ thuật tạo dòng gen
Công nghệ sinh học
Kỹ thuật tái tổ hợp DNA
Biến nạp bằng điện
Biểu hiện của gen
Chu trình sinh tan
Biểu hiện enzyme T4 DNA ligase
Thu nhận enzyme T4 DNA ligase
Protein tái tổ hợp
T4 DNA ligase
Tổ hợp pET16b T4Dnl
Ứng dụng công nghệ gene
Quy trình tiến hành
Lịch sử hình thành
Bài giảng Công nghệ sinh học
Công nghệ DNA tổ hợp
Vector chuyển gene
Hệ thống tế bào chủ
Biến nạp DNA tái tổ hợp
nhiễn sắc thể
nhiễm sắc
tái tổ hợp
quá trình giảm phân
sinh vật
ứng dụng sinh học
Bài giảng Công nghệ Gene
Công nghệ Gene
Kỹ thuật nhân dòng DNA tái tổ hợp
Phương pháp chuyển DNA vào tế bào nhân sơ
Tế bào nhân sơ
Giáo trình DNA
tài liệu DNA
bài giảng DNA
tài liệu sinh học
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
Công nghiệp gang thép Việt Nam : Một giai đoạn phát triển và chuyển đổi chính sách mới part 5
6
217
0
01-07-2024
Báo cáo tốt nghiệp: Vận hành và bảo dưỡng trong MPLS
92
169
5
01-07-2024
HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG PHẦN MỀM CAITA part 9
18
160
0
01-07-2024
XỬ TRÍ CHẤN THƯƠNG SỌ NÃO KÍN
1
148
2
01-07-2024
Data Structures and Algorithms - Chapter 8: Heaps
41
148
1
01-07-2024
Báo cáo nghiên cứu khoa học " HÃY LÀM CHO HUẾ XANH HƠN VÀ ĐẸP HƠN "
6
143
1
01-07-2024
Tự học thổi sáo và ngâm thơ part 4
11
175
1
01-07-2024
ĐỀ THI THỬ ĐH NĂM 2011 MÔN VẬT LÍ _ ĐỀ SỐ 101
7
121
0
01-07-2024
Color Atlas of Ophthamology
165
106
0
01-07-2024
CHƯƠNG 2: RỦI RO THÂM HỤT TÀI KHÓA
28
133
0
01-07-2024
TÀI LIỆU HOT
Mẫu đơn thông tin ứng viên ngân hàng VIB
8
7947
2250
Giáo trình Tư tưởng Hồ Chí Minh - Mạch Quang Thắng (Dành cho bậc ĐH - Không chuyên ngành Lý luận chính trị)
152
6771
1610
Ebook Chào con ba mẹ đã sẵn sàng
112
4025
1302
Ebook Tuyển tập đề bài và bài văn nghị luận xã hội: Phần 1
62
5712
1196
Ebook Facts and Figures – Basic reading practice: Phần 1 – Đặng Tuấn Anh (Dịch)
249
8652
1150
Giáo trình Văn hóa kinh doanh - PGS.TS. Dương Thị Liễu
561
3647
667
Giáo trình Sinh lí học trẻ em: Phần 1 - TS Lê Thanh Vân
122
3849
601
Giáo trình Pháp luật đại cương: Phần 1 - NXB ĐH Sư Phạm
274
4412
546
Tiểu luận: Tư tưởng Hồ Chí Minh về xây dựng nhà nước trong sạch vững mạnh
13
11128
537
Bài tập nhóm quản lý dự án: Dự án xây dựng quán cafe
35
4298
483
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.