TAILIEUCHUNG - Quy trình multiplex real-time PCR cải tiến phát hiện nhanh nhiễm Streptococccus nhóm B ở thai phụ khi chuyển dạ

Bài viết Quy trình multiplex real-time PCR cải tiến phát hiện nhanh nhiễm Streptococccus nhóm B ở thai phụ khi chuyển dạ trình bày việc tối ưu quy trình multiplex real-time PCR phát hiện GBS trong vòng 2 giờ sau khi lấy mẫu phết dịch âm đạo – trực tràng của thai phụ bằng phương pháp thực nghiệm. | Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh Tập 25 Số 5 2021 QUY TRÌNH MULTIPLEX REAL-TIME PCR CẢI TIẾN PHÁT HIỆN NHANH NHIỄM STREPTOCOCCCUS NHÓM B Ở THAI PHỤ KHI CHUYỂN DẠ Nguyễn Tuấn Anh1 2 Hà Mạnh Tuấn1 3 Trần Thị Bích Huyền4 Bùi Thị Kim Thảo4 Nguyễn Thị Mỹ Linh5 Ngô Đông Kha1 2 Nguyễn Thanh Danh1 2 Nguyễn Lâm Đức Vũ1 2 Lê Thị Mỹ Ly4 Nguyễn Thụy Vy6 Võ Nguyên Trung1 3 Vũ Trí Thanh1 3 TÓM TẮT Đặt vấn đề Vi khuẩn Streptococcus nhóm B là tác nhân quan trọng và chủ yếu gây nhiễm khuẩn sơ sinh. Thai phụ bị nhiễm vi khuẩn này có thể lây cho trẻ sơ sinh trong quá trình chuyển dạ. Vì thế tầm soát trước sinh vi khuẩn này đặc biệt trước khi vào giai đoạn chuyển dạ ở thai phụ là điều cần thiết để hạn chế nhiễm trùng sơ sinh sớm ở trẻ. Có nhiều phương pháp chẩn đoán GBS nhưng có ít phương pháp đáp ứng nhu cầu có nhanh kết quả với độ nhạy cao. Mục tiêu Tối ưu quy trình multiplex real-time PCR phát hiện GBS trong vòng 2 giờ sau khi lấy mẫu phết dịch âm đạo trực tràng của thai phụ bằng phương pháp thực nghiệm. Đối tượng Phương pháp Nghiên cứu thực nghiệm được tiến hành để tối ưu quy trình chẩn đoán. Các thí nghiệm đươc tiến hành từng bước step-by-step để tìm ra thông số tối ưu cho mỗi điều kiện được đánh giá. Quy trình được đánh giá sử dụng cặp mồi và mẫu dò Taq-Man đặc trưng cho gene cfb của GBS với kênh màu FAM và cặp mồi chứng nội đặc trưng cho gene RPLPO của người với kênh màu HEX trong cùng một phản ứng. Phản ứng multiplex real-time PCR được tối ưu với DNA chuẩn của vi khuẩn GBS ATCC 12401TM và ATCC 12386TM và DNA người tách chiết từ mẫu phết dịch âm đạo trực tràng thai phụ đã được xác định âm tính với GBS bằng phương pháp nuôi cấy nhằm đạt hiệu suất nhân bản tốt nhất cho tất cả các gene đích cần phát hiện. Kết quả Kết quả cho thấy quy trình multiplex real-time PCR đã tối ưu và có thể phát hiện chính xác GBS trong khoảng nồng độ rộng từ 101 109 bản sao phản ứng với tổng thời gian hoàn thành quy trình là 1giờ 30 phút. Kết luận Quy trình multiplex real-time PCR được cải tiến .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.