TAILIEUCHUNG - Tạo dòng, biểu hiện và khảo sát hoạt tính enzyme của eugenol oxidase (eugo) trong escherichia coli

Bài viết trình quá trình phân tích sự biểu hiện protein trong tế bào E. coli mang gen EUGO ở một số điều kiện cảm ứng biểu hiện khác nhau cho thấy EUGO biểu hiện tốt ở pha tan khi được cảm ứng ở nhiệt độ 25o C với nồng độ IPTG 0,1 mM trong thời gian 6 giờ. Protein EUGO được tinh sạch bằng kĩ thuật sắc ký ái lực cố định ion Ni2+-NTA agarose và được khảo sát hoạt tính enzyme in vitro. Enzyme EUGO sau khi được tinh sạch có hoạt tính riêng cao hơn chế phẩm enzyme trước tinh sạch gần 4 lần. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 17 3 561-567 2019 TẠO DÒNG BIỂU HIỆN VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ENZYME CỦA EUGENOL OXIDASE EUGO TRONG ESCHERICHIA COLI Phạm Thị Mỹ Bình Lê Hải Yến Trần Quốc Tuấn Nguyễn Thị Hồng Thương Trường Đại học Khoa học tự nhiên Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Người chịu trách nhiệm liên lạc. E-mail nththuong@ Ngày nhận bài Ngày nhận đăng TÓM TẮT Eugenol oxidase EUGO là enzyme thuộc họ enzyme vanillyl alcohol oxidase có khả năng xúc tác phản ứng oxi hóa vanillyl alcohol thành vanillin hương liệu tạo mùi vani được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp thực phẩm mỹ phẩm và dược phẩm. EUGO đã được tạo dòng biểu hiện trong vi khuẩn E. coli TOP10 và được tinh sạch bằng kĩ thuật sắc kí trao đổi anion Q-Sepharose nhưng độ tinh sạch thấp. Nhằm cải thiện hiệu suất quá trình tinh sạch EUGO trong nghiên cứu này chúng tôi tạo dòng và biểu hiện EUGO trong vi khuẩn E. coli Tunetta thông qua vector pET-28a. Kết quả phân tích sự biểu hiện protein trong tế bào E. coli mang gen EUGO ở một số điều kiện cảm ứng biểu hiện khác nhau cho thấy EUGO biểu hiện tốt ở pha tan khi được cảm ứng ở nhiệt độ 25oC với nồng độ IPTG 0 1 mM trong thời gian 6 giờ. Protein EUGO được tinh sạch bằng kĩ thuật sắc ký ái lực cố định ion Ni2 -NTA agarose và được khảo sát hoạt tính enzyme in vitro. Enzyme EUGO sau khi được tinh sạch có hoạt tính riêng cao hơn chế phẩm enzyme trước tinh sạch gần 4 lần. Đặc biệt là phương pháp tinh sạch dựa trên His-tag cho EUGO có độ tinh sạch cao hơn gấp 2 5 lần so với phương pháp tinh sạch Q-sepharose của nhóm nghiên cứu trước đây. Kết quả này cho thấy quá trình tinh sạch enzyme EUGO đã được cải thiện đáng kể. Từ khóa Eugenol oxidase E. coli pET-28a-EUGO vanillin sắc ký ái lực cố định ion MỞ ĐẦU Eugenol oxidase EUGO - enzyme được mã hóa bởi gene eugo có nguồn gốc từ chủng vi khuẩn Vanillin là một loại hương liệu có mùi vani Rhodococcus Jostii RHA1 Nguyen et al. 2016 được sử dụng trong các lĩnh vực khác nhau như thuộc họ .

• Sinh học
• Tạo dòng hoạt tính enzyme
• Hoạt tính enzyme của eugenol oxidase
• Ezym trong escherichia coli
• Sắc ký ái lực cố định ion
• Đa dạng di truyền
• di truyền sinh học
• khái niệm đa dạng di truyền
• ôn tập đa dạng di truyền
• sinh học và đời sống
• tài liệu ôn tập sinh học
• Đa dạng sinh học
• Tài nguyên di truyền thực vật
• Nguyên lý về đa dạng sinh học
• Đa dạng phân loại
• Đa dạng hệ sinh thái
• di truyền học
• giống lúa chịu mặn
• đa dạng di truyền lúa
• tách chiết ADN
• nhận dạng di truyền giống
• Kĩ thuật AFLP
• Anacardium occidentale L
• Mức độ đa dạng di truyền
• Tổ hợp primer nhân bản
• Đa dạng di truyền trên cây điều
• Gà Lạc Sơn
• Sai khác di truyền
• Chỉ thị microsatellite
• Đa dạng di truyền trong quần thể
• Tính đa dạng các locus microsatellite
• Đa dạng sinh vật
• Đánh giá đa dạng di truyền
• Dạng di truyền một số giống bơ
• Persea americana Mill
• Chỉ thị phân tử SSR
• Chỉ số PIC
• Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam
• Hai dòng gà ri
• Chất lượng di truyền
• Nguồn gốc di truyền
• Công nghệ sinh học
• Đa dạng di truyền sa mộc dầu
• Cunninghamia lanceolata vat
• konishii
• Chỉ thị ISSR
• Đa dạng di truyền quần thể
• Quần thể điều
• Đa dạng di truyền của quần thể điều
• Tạo giống cây điều
• Luận văn nghiên cứu đa dạng sinh học
• Nghiên cứu sinh vật học
• Luận văn Thạc sĩ Sinh học
• Sinh học thực nghiệm
• Anisoptera costata
• Vên vên
• Phân tích đa dạng di truyền
• Di truyền của các mẫu giống
• Giống đậu cô ve
• Chỉ thị hình thái
• Phân tích đa dạng di truyền giống ớt xiêm
• Tỉnh Quảng Ngãi
• Chỉ thị RAPD
• Tương đồng di truyền
• Giống ớt địa phương
• Luận văn Thạc sĩ Khoa học
• Đa dạng về di truyền
• Thằn lằn ngón Cyrtodactylus
• Quan hệ di truyền
• Đa dạng di truyền loài vên vên
• Phân cắt nơi sống
• Công tác bảo tồn di truyền
• Đa dạng sinh học cây thuốc
• Đa dạng loài
• Giá trị của đa dạng sinh học
• Bảo tồn đa dạng sinh học
• Tài nguyên di truyền
• Bảo tồn tài nguyên di truyền
• Hiện trạng đa dạng sinh học
• Bài giảng đa dạng sinh học chương 5
• Du sam đá vôi
• Kỹ thuật Rapd
• Đa dạng di truyền loài Du sam đá vôi
• Phương pháp định lượng AND
• Điện di sản phẩm RAPD
• Đa dạng di truyền giống quýt
• Giống quýt bản địa
• Trình tự ITS hệ gen nhân
• Mẫu giống ngô tẻ địa phương
• Đa dạng di truyền mẫu giống ngô tẻ
• Hình thái mẫu giống ngô tẻ
• Giống ngô ở Việt Nam
• Chương trình tạo giống ngô ở Việt Nam
• Đa dạng di truyền dòng lúa lai
• Lúa Tám Xuân Đài
• Lúa Dự Hải Hậu
• Khai thác nguồn gen quý của lúa
• Đa dạng di truyền dòng cá rô
• Dòng cá rô đầu vuông
• Anabas Testudines
• Cá rô ở Hậu Giang
• Quần thể gà nội
• Cấu trúc sinh sản
• Bảo tồn nguồn gen gà nội
• Lúa ngắn ngày
• Chỉ thị SSR
• Kỹ thuật PCR
• Giai đoạn sinh trưởng
• Công tác chọn tạo giống
• Ếch ang tam đảo
• Ếch ang tam đảo tại Thái Nguyên
• Đa dạng di truyền của loài Ếch