TAILIEUCHUNG - HOÀN THIỆN QUI TRÌNH PCR ĐA MỒI PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI VI RÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG (White Spot Syndrome Virus) VÀ VI RÚT GÂY BỆNH CÒI (Monodon Baculovirus) Ở TÔM SÚ (Penaeus monodon) CÓ SỬ DỤNG GEN β-ACTIN LÀM NỘI CHUẨN

HOÀN THIỆN QUI TRÌNH PCR ĐA MỒI PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI VI RÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG (White Spot Syndrome Virus) VÀ VI RÚT GÂY BỆNH CÒI (Monodon Baculovirus) Ở TÔM SÚ (Penaeus monodon) CÓ SỬ DỤNG GEN β-ACTIN LÀM NỘI CHUẨN | Kỷ yếu Hội nghị khoa học thủy sản lần 4 233-240 Trường Đại học Cần Thơ HOÀN THIỆN QUI TRÌNH PCR ĐA MỒI PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI VI RÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG White Spot Syndrome Virus VÀ VI RÚT GÂY BỆnH Còi Monodon Baculovirus Ở TÔM SÚ Penaeus monodon CÓ SỬ DỤNG GEN P-ACTIN làM nội chủẩn Trần Việt Tiên1 và Đặng Thị Hoàng Oanh1 ABSTRACT A multiplex RT-PCR protocol for simultaneous detection of WSSV and MBV in black tiger shrimp Penaeus monodon and to control false negative by detecting shrimp endogenous genes. Based on PCR protocols to detect WSSV from OIE 2006 MBV from Belcher và Young 1998 andRT-PCR protocol to detect 3-actin endogenous gene from Oanh 2008 mPCR protocolfor simultaneous detection of WSSV MBV and P-actin gen were developed with PCR product of 1447 bp WSSV 361 bp MBV and 216 bp P-actin . This mPCRprotocol has a practical application by using internal control P-actin and reduced cost and save time as two viruses will be detected in a single PCR reaction. Keywords Penaeus monodon mPCR WSSV MBV internal control. Title Development of multiplex PCR protocol for simultaneous detection of white spot syndrome virus and monodon baculovirus in black tiger shrimp Penaeus monodon by using P-actin gene as internal control. TÓM TẮT Qui trình mPCR phát hiện đồng thời WSSV MBV trên tôm sú Penaeus monodon có sử dụng nội chuẩn được thực hiện và chuẩn hóa. Trên cơ sở qui trình PCRphát hiện WSSV của OIE 2006 qui trình PCRphát hiện MBV theo Belcher và Young 1998 và qui trình RT-PCR phát hiện gen 3-actin ở tôm của Oanh 2008 qui trình mPCR phát hiện đồng thời WSSV MBV và gen P-actin được thực hiện cho kết quả khuếch đại hiện đồng thời ba vạch ở vị trí 1447 bp WSSV 361 bp MBV và 216 bp P-actin . Kết quả đạt được cho thấy qui trình được thực hiện có thể phát hiện phát hiện đồng thời WSSV và MBV có sử dụng nội chuẩn trong cùng phản ứng vừa giảm được chi phí xét nghiệm khi phát hiện đồng thời WSSV và MBV vừa kiểm soát được trường hợp âm tính giả thường gặp khi sử sụng kỹ thuật PCR. Từ

• Ngư nghiệp
• HOÀN THIỆN QUI TRÌNH PCR ĐA MỒI PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI VI RÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG (White Spot Syndrome Virus) VÀ VI RÚT GÂY BỆNH CÒI (Monodon Baculovirus) Ở TÔM SÚ (Penaeus monodon) CÓ SỬ DỤNG GEN β ACTIN LÀM NỘI CHUẨN