TAILIEUCHUNG - Phân tích acid nucleic - Phân tích ADN plasmid

Kỹ thuật phân tích acid nucleic liên quan chủ yếu đến phân tích kích thước, cấu trúc acid nucleic, mối tương quan về trình tự acid nucleic thông qua giải trình tự ADN và lai ADN. Phân tích ADN plasmid: Phương pháp phân tích ở đây bao gồm tách plasmid, so sánh các loại plasmid về kích thước sau đó tinh sạch plasmid và xử lý bằng enzym cắt hạn chế, sau đó điện di trên gel agarose và so sánh sự đa hình của các mảnh cắt để phân biệt các chủng vi sinh vật với nhau. . | Phân tích acid nucleic - Phân tích ADN plasmid Kỹ thuật phân tích acid nucleic liên quan chủ yếu đến phân tích kích thước cấu trúc acid nucleic mối tương quan về trình tự acid nucleic thông qua giải trình tự ADN và lai ADN. Phân tích ADN plasmid Phương pháp phân tích ở đây bao gồm tách plasmid so sánh các loại plasmid về kích thước sau đó tinh sạch plasmid và xử lý bằng enzym cắt hạn chế sau đó điện di trên gel agarose và so sánh sự đa hình của các mảnh cắt để phân biệt các chủng vi sinh vật với nhau. Plasmid vòng Streptomyces và Borrelia Plasmid là nhân tố di truyền ngoài nhân và sao chép độc lập với nhiễm sắc thể. Cấu trúc plasmid là sợi đôi ADN khép kín theo vòng. Tuy nhiên có nhiều trường hợp ngoại lệ là sợi kép ADN mạch thẳng đối với vi khuẩn Borrelia và Streptomyces . Plasmid được tìm thấy hầu hết ở các vi khuẩn và một số ít các vi sinh vật nhân thực bậc thấp như nấm men. Tách plasmid Thông thường lượng plasmid có trong tế bào chiếm 5 tổng số acid nucleic của tế bào. Như vậy ta phải thực hiện phép tách plasmid ra khỏi ADN của nhiễm sắc thể. Nói chung có nhiều phương pháp tách plasmid từ vi khuẩn nhưng nguyên tắc chung là phá tế bào vi khuẩn dùng enzym siêu âm hay trong dung dịch kiềm có chất tẩy rửa là SDS hoặc TritonX-100 sau đó là việc loại ADN của nhiễm sắc thể và protein. Thông thường dùng phương pháp kết tủa với axetat. Lúc này phần lớn các thành phần ADN nhiễm sắc thể và protein của tế bào đã bị kết tủa bị loại bằng li tâm và plasmid nằm trong dịch trên tủa được tách khi kết tủa với ethanol hay isopropanol. Đây là phương pháp có hiệu quả để tách plasmid trên thực tế hiệu quả tách các plasmid có kích thước nhỏ cao hơn nhiều so với các plasmid có kích thước lớn 100 Kb . Với các plasmid có kích thước lớn cần các thao tác nhẹ nhàng để tránh đứt gãy do các nguyên nhân cơ học. Với cách tách plasmid như trên thì sản phẩm thu được có lẫn các đoạn ADN có kích thước khoảng 500 bp và nhiễm ARN. Để tránh nhiễm ARN thì cần xử lý với RNase ribonuclease A . Tuy nhiên

• Điện - Điện tử
• vi sinh vật
• tài liệu vi sinh vật
• nghiên cứu vi sinh vật
• lý thuyết về vi sinh vật
• chuyên ngành vi sinh vật
• Hệ vi sinh vật
• Hệ vi sinh vật trong đất
• Hệ vi sinh vật trong nước
• Hệ vi sinh vật không khí
• Vi sinh vật học
• Vi sinh vật đại cương
• Bài giảng vi sinh vật học chương 5
• Vi sinh vật gây bệnh trong nước
• Bài giảng Vi sinh vật
• Vi sinh vật chỉ thị
• Đặc điểm vi sinh vật chỉ thị
• Phân loại vi sinh vật chỉ thị
• Ý nghĩa vi sinh vật chỉ thị
• Công nghệ vi sinh vật
• Cơ sở vi sinh vật công nghiệp
• Sinh sản của vi sinh vật
• Quá trình sinh lý vi sinh vật
• Sinh lý vi sinh vật
• Lý thuyết vi sinh vật học
• Bài tập vi sinh vật học
• Vi sinh vật học thực phẩm
• Vi sinh vật học công nghiệp
• Sinh thái học vi sinh vật
• Ứng dụng vi sinh vật
• Lý thuyết vi sinh vật
• Vi sinh học
• Bài giảng sinh học
• Ôn tập vi sinh vật học
• Câu hỏi vi sinh vật học
• Bài giảng Vi sinh vật đại cương
• Vi sinh vật nhân nguyên thủy
• Vi sinh nhân thật
• Sinh lý học vi sinh vật
• Di truyền học vi sinh vật
• Vi sinh vật nhân thật
• Vi sinh vật chưa có tế bào
• Vi sinh vật tiền nhân
• Bài giảng vi sinh vật học chương 2
• Bài giảng vi sinh vật học
• Đề tài nghiên cứu Y học
• Bài giảng Thực hành vi sinh vật học
• Thực hành vi sinh vật học
• Phương pháp nuôi cấy vi sinh vật
• Phương pháp tiệt trùng vi sinh vật
• Môi trường nuôi cấy vi sinh vật
• Phương pháp quan sát vi sinh vật
• Vi sinh vật thực phẩm
• Bài giảng Vi sinh vật thực phẩm
• Hình thái vi sinh vật
• Cấu tạo sinh vật
• Vi sinh vật Eukaryot
• Vi sinh vật học đại cương
• Giáo trình Vi sinh vật học đại cương
• Cấu tạo vi sinh vật
• Sinh trưởng của vi sinh vật
• Dinh dưỡng của sinh vật
• Trao đổi chất của vi sinh vật
• Đề tài vi sinh vật
• Nghiên cứu sinh vật học
• Đề tài Vi sinh vật gây bệnh
• Kí sinh trùng trong nước thải sinh hoạt
• Vi sinh vật gây bệnh
• Sinh học tế bào
• Vi sinh vật cơ sở
• Tế bào vi sinh vật
• Đa dạng vi sinh vật
• Vi sinh vật đa dạng ở người
• Công nghệ sinh học vi sinh vật
• Chuyển hóa vật chất vi sinh vật
• Sự phân bố vi sinh vật
• Chất hữu cơ chứa nitơ
• Trao đổi vật chất vi sinh vật
• Oxy hóa không an toàn
• Phân giải đường
• Hô hấp vi sinh vật
• Vi sinh vật lên men
• vai trò vi sinh vật
• Dinh dưỡng vi sinh vật
• Sinh trưởng vi sinh vật
• Bài giảng vi sinh vật học chương 3
• Bài giảng Vi sinh vật học đại cương
• Sinh lý học của vi sinh vật
• Dinh dưỡng của vi sinh vật
• Giáo trình Vi sinh vật học công nghiệp
• Nhóm vi sinh vật
• Di truyền vi sinh vật
• Giáo trình Vi sinh vật học
• Vi sinh vật ứng dụng
• Vi sinh vật ứng dụng trong nông nghiệp
• Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm
• Thí nghiệm vi sinh vật học
• Phương pháp định lượng vi sinh vật
• Định lượng vi sinh vật
• Tính chất sinh lý vi sinh vật