Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Tham khảo tài liệu 'phương pháp phân tích vi sinh vật part 8', khoa học tự nhiên, công nghệ sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Đế biết mật độ của vi sinh vật so sánh trị số ánh sáng đo được với một đường chuẩn tương quan giữa lượng ánh sáng phát ra và mật độ tế bào vi sinh vật đã được biết trước. 2. PHƯƠNG PHÁP ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Những tiến bộ kỹ thuật trong vài thập niên vừa qua thúc đẩy sự phát triển của nhiều kỹ thuật chẩn đoán huyết thanh nhanh nhạy chính xác các bệnh truyền nhiễm. Mặt khác sự phát triển của những kỹ thuật tự động cho phép đơn giản hóa các thao tác thực hiện. Nguyên tắc của phương pháp miễn dịch là phản ứng kết hợp giữa một tế bào kháng nguyên với một kháng thể đặc hiệu. Tín hiệu của phản ứng miễn dịch có thể nhận biết thông qua sự ngưng tủa hay kết dính của kháng nguyên -kháng thể hoặc bằng cách sử dụng những kháng thể đã được đánh dấu bằng chất nhuộm phát huỳnh quang đồng vị phóng xạ hay enzyme . Trong sô các phương pháp phân tích miễn dịch phương pháp hâ p phụ miễn dịch dùng enzyme enzyme-linked immunosorbent assay -ELISA hay enzyme immunosorbent assay - EIA được quan tâm nhiều do có tính đơn giản và hiệu quả cao. Phương pháp này có thể được sử dụng cho hầu hết các loại kháng nguyên với độ nhạy và độ đặc hiệu cao. Nguyên tắc kỹ thuật ELISA là sử dụng kháng thể đơn dòng phủ bên ngoài những đĩa giếng microplate . Nếu có sự hiện diện của kháng nguyên mục tiêu trong mẫu kháng nguyên này sẽ được giữ lại trên bề mặt giếng. Các kháng nguyên này sẽ được phát hiện bằng cách sử dụng kháng thể thứ cấp có gắn với enzyme như horseradish peroxidase hay alkaline phosphatase. Khi bổ sung một cơ chất đặc hiệu của enzyme vào giếng enzyme xúc tác phản ứng thủy phân cơ chất để tạo ra các sản phẩm có màu hay phát sáng. Bằng cách theo dõi sự đổi màu có thể phát hiện sự hiện diện và định lượng lượng kháng nguyên Hình 6.3. . Kháng thể thu khống nguyên Kháng nguyên Kháng thể mang enzyme đánh dấu Hình 6.3 Nguyên tắc phản ứng ELISA 169 ELISA đã được sử dụng rộng rãi dưới dạng các bộ hóa chất kít thương mại phát hiện Salmonella E. colì gây bệnh Listeria độc tố .
