Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Trong thí nghiệm này, chủng nấm men sẽ được nuôi cấy trong bình tam giác thuỷ tinh, và sự thay đổi nồng độ tế bào sẽ được kiểm soát bằng cách dùng ba kỹ thuật khác nhau: đếm dưới kính hiển vi, xác định khối lượng khô, độ đục của dịch huyền phù tế bào. 1. Nguyên liệu - Một chủng nấm men bất kỳ sinh trưởng trong nuôi cấy dịch huyền phù. | Thí nghiệm đường cong sinh trưởng của nấm men Trong thí nghiệm này chủng nấm men sẽ được nuôi cấy trong bình tam giác thuỷ tinh và sự thay đổi nồng độ tế bào sẽ được kiểm soát bằng cách dùng ba kỹ thuật khác nhau đếm dưới kính hiển vi xác định khối lượng khô độ đục của dịch huyền phù tế bào. 1. Nguyên liệu - Một chủng nấm men bất kỳ sinh trưởng trong nuôi cấy dịch huyền phù. Chúng ta có thể thu chủng nấm men từ một phòng thí nghiệm vi sinh vật hoặc mua một chủng đặc biệt từ công ty. - Glucose dịch chiết nấm men NH4Cl MgSO4 CaCl2 và chất chống tạo bọt để pha môi trường. - Hai bình tam giác 125 mL - Pipette vô trùng - Đèn Bunsen - Nồi khử trùng - Tủ ấm - Hemocytometer - Ly tâm - Cân hóa chất - Máy quang phổ 2. Phương thức tiến hành - Chuẩn bị môi trường nuôi cấy Môi trường sinh trưởng đặc trưng của nấm men - Glucose 100g - Dịch chiết nấm men 8 5g - NH4Cl 1 32g - MgSO4 0 11g - CaCl2 0 06g - Chất chống tạo bọt 0 2 ml - Nước bổ sung vừa đủ 1 L - Rót 50 mL bình vào 2 bình tam giác loại 125 mL. - Nút bình tam giác bằng một trong số vật liệu sau giấy nhôm nút plastic chịu nhiệt nắp inox hoặc bông không thấm nước. - Khử trùng bình tam giác đựng môi trường ở 121 oC trong 20 phút. - Tiếp mẫu inoculate 1 mL dịch nuôi cấy nấm men trước đó vào bình tam giác chứa môi trường vô trùng. Tiến hành cẩn thận để khỏi bị nhiễm bẩn pipette nắp đậy và bình tam giác trong suốt quá trình tiếp mẫu. Để giảm thiểu cơ hội nhiễm bẩn nên đốt nắp đậy và cổ của bình tam giác sau khi lấy nắp ra để cấy nấm men vào. - Đặt bình tam giác vào trong tủ ấm ở 37oC. - Lấy 2 mL mẫu ở các khoảng thời gian khác nhau trong quá trình nuôi cấy để xác định nồng độ tế bào bằng cách đếm trên kính hiển vi xác định trọng lượng khô và đo độ đục mật độ quang bằng máy quang phổ. Thời gian lấy mẫu phải được sắp xếp sao có thể thu được cho đường cong sinh trưởng tốt thể hiện cả ba phase sinh trưởng. Trước khi lấy mẫu phải trộn tất cả các thành phần trong bình tam giác bằng cách .
