Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Tham khảo tài liệu 'hộp điện trong công nghệ dna part 15', kỹ thuật - công nghệ, điện - điện tử phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | 4. Rickwood D and Hames BD. 1984. Gel Electrophoresis of Nucleic Acids. IRL Press Ltd. Oxford UK. 5. Surzycki S. 2000. Basic Techniques in Molecular Biology. SpringerVerlag Berlin Heidelberg Germany. 6. Westermeier R. 2005. Electrophoresis in Practice. 4th ed. Wiley-VCH Verlag GmbH Co. KgaA. Weinheim Germany. 1Agar một galactan phức hợp tách chiết từ một số loài tảo đỏ như Gelidium và Gracilaria spp. được sử dụng rộng rãi ở dạng gel làm giá thể rắn hoặc bán rắn cho môi trường nuôi cấy vi sinh vật và thực vật. Chương 3 Khuếch đại in vitro DNA bằng phản ứng chuỗi polymerase PCR PCR polymerase chain reaction là một kỹ thuật được sử dụng phổ biến trong công nghệ sinh học hiện đại và đã đóng góp rất lớn cho những tiến bộ về sinh học phân tử đánh dấu một bước tiến vô cùng quan trọng tương đương với việc khám phá ra các enzyme hạn chế xem chương 1 và kỹ thuật Southern blot xem chương 5 . PCR dựa trên cơ sở phản ứng kéo dài primer nhờ enzyme Taq polymerase để khuếch đại in vitro các nucleic acid đặc hiệu trong thiết bị điều nhiệt tuần hoàn thermocycler còn gọi là máy PCR Hình 3.1 . PCR cho phép khuếch đại theo hàm mũ lên đến hàng triệu lần các đoạn DNA có chiều dài từ 200-3.000 bp. Đoạn DNA được khuếch đại DNA đích được nhận dạng nhờ cặp primer đặc hiệu oligonucleotide thường có chiều dài khoảng 20 nucleotide. Hình 3.1. Thiết bị điều nhiệt tuần hoàn I. Nguyên tắc của PCR Taq polymerase xem chương 1 là một loại enzyme DNA polymerase chịu nhiệt có ở vi khuẩn chịu nhiệt độ cao Thermus aquaticus được dùng để tổng hợp các đoạn DNA mới trong môi trường có bốn loại deoxyribonucleotide dATP dCTP dGTP và dTTP và hai primer trên cơ sở khuôn mẫu của một đoạn DNA nhất định đã biết hoặc chưa biết trình tự. Các đoạn DNA mới hình thành lại được sử dụng làm khuôn mẫu. Sau nhiều chu kỳ số lượng đoạn DNA nói trên được nhân lên gấp nhiều lần nhờ vậy có thể đủ số lượng để tách ra phân tích trình tự hoặc tạo dòng. Primer ở bên trái tác động trên sợi DNA 3 -5 được gọi là primer thuận forward .