Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
RNAi là phương pháp sử dụng rộng rãi để phát triển các cây thuốc lá chuyển gen kháng virus phổ rộng giúp giảm đáng kể thiệt hại về năng suất do virus gây ra. Do đó, trong nghiên cứu này tác giả đã tiến hành thiết kế vector chuyển gen nhị thể pGWTCYS mang cấu trúc RNAi lặp lại đoạn gen TCYS đảo chiều có ngăn cách một đoạn intron. để tìm hiểu thêm nội dung chi tiết. | Tạp chí Khoa học ĐHQGHN Khoa học Tự nhiên và Công nghệ Tập 30 Số 3 2014 58-67 Tạo cây thuốc lá mang gen đa đoạn kháng virus TMV CMV TYLCV va TSWV bằng kỹ thuật RNAi Lê Thị Thủy1 Nguyễn Thị Thu Hiền2 Phạm Thị Vân2 Chu Hoàng Hà2 Lê Văn Sơn2 ỴĐại học Sư phạm Hà Nội 136 Xuân Thủy Cầu Giấy Hà Nội Việt Nam 2 Viện Công nghệ sinh học 18 Hoàng Quốc Việt Cầu Giấy Hà Nội Việt Nam Nhận ngày 16 tháng 7 năm 2014 Chỉnh sửa ngày 20 tháng 8 năm 2014 Chấp nhận đăng ngày 19 tháng 9 năm 2014 Tóm tắt RNAi là phương pháp sử dụng rộng rãi để phát triển các cây thuốc lá chuyển gen kháng virus phổ rộng giúp giảm đáng kể thiệt hại về năng suất do virus gây ra. Do đó trong nghiên cứu này chúng tôi đã tiến hành thiết kế vector chuyển gen nhị thể pGWTCYS mang cấu trúc RNAi lặp lại đoạn gen TCYS đảo chiều có ngăn cách một đoạn intron. Đoạn gen TCYS mang đa đoạn gen chức năng không đầy đủ của 4 loại virus gây hại phổ biến nhất trên cây thuốc lá ở Việt Nam là TMV Tobacco mosaic virus - virus khảm thuốc lá CMV Cucumber mosaic virus - virus khảm dưa chuột TYLCV Tomato yellow leaf curl virus - virus xoăn vàng lá cà chua và TSWV Tomato spotted wilt virus - virus héo đốm cà chua . Cấu trúc này được chuyển vào 2 giống thuốc lá Nicotiana tabacum K326 và C9-1. Sau quá trình tái sinh và chọn lọc đã thu được 66 dòng cây 36 dòng K326 và 30 dòng C9-1 phát triển bình thường. Phân tích PCR cho thấy tất cả các dòng này đều dương tính với gen chuyển TCYS. Đánh giá tính kháng cả 4 loại virus nghiên cứu của các dòng thuốc lá chuyển gen này ở thế hệ T0 thu được 20 66 dòng trong đó 11 dòng K326 và 9 dòng C9-1 không có biểu hiện bệnh do những virus này gây ra sau lây nhiễm . Từ khóa TMV CMV TYLCV TSWV thuốc lá RNAi 1. Mở đầu Bên cạnh nấm và vi khuẩn virus là một trong 3 nguyên nhân chính gây nên bệnh truyền nhiễm ở thực vật. Cho đến nay đã có gần 1000 loài virus hại thực vật được phát hiện trong khi chưa có loại thuốc bảo vệ thực vật nào có thể chống lại bệnh virus gây nên mối lo ngại lớn cho nền nông nghiệp. Con .