Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ
Tải xuống
Nghiên cứu chuyển gen nguyên cây ở ngô | Tạp chí Công nghệ Sinh học 7 2 221-227 2009 NGHIÊN CỨU CHUYỂN GEN NGUYÊN CÂY Ở NGÔ Đinh Văn Trình Phạm Thị Lý Thu Lê Thị Thu về Nguyễn Văn Toàn Nguyễn Văn Đồng Viện Di Truyền nông nghiệp TÓM TÁT Hầu hết các phương pháp chuyển gen vào ngô Zea mays L. hiện nay thường đòi hỏi các thao tác nuôi cấy mô với thời gian và chi phí tốn kém. Hơn nữa chúng chỉ áp dụng được với một số kiểu gen có khả năng tái sinh cao. Lần đầu tiên tại Việt Nam chúng tôi áp dụng phương pháp chuyển gen nguyên cây. Đây là phương pháp đơn giàn kinh tế có thể áp dụng cho nhiều giống ngô thông qua hệ thống sinh sản cái. Thí nghiệm chuyển gen thực hiện với chủng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens EHA 105 chứa vector pBiG.ubi mang gen chịu hạn - ZmDREB2A và gen kháng hygromycin - hpt. Râu ngô hoa cái được cách ly và tiếp xúc với dịch huyền phù vi khuẩn trước khi thụ phấn với hạt phấn của cùng dòng. 135 bắp 13145 hạt To đã thu được trong vụ đông xuân năm 2006 - 2007. Cây con chuyển gen giai đoạn 2 - 3 lá được sàng lọc bằng điều kiện khô hạn. Phép thừ. tính kháng hygromycin và phân tích PCR trên 59 cây To sống sót sau xử lý hạn cho thấy hiệu quả chuyển gen ở thế hệ To đạt 0 023 . Tù khóa . Agrobacterium tumefaciens chịu hạn chuyển gen nguyên cây ngô ZmDREB2A ĐẶT VẤN ĐỀ Ngô với tầm quan trọng của nó đã trở thành đối tượng chuyển gen từ khá lâu. Vấn đề khó khăn nhất trong chuyển gen ngô là khả năng tái sinh kém chỉ một số dòng mô hình là AI88 hay H99 Hodges et al. 1986 hay các con lai của chúng được dùng trong chuyển gen. Bộ phận chủ yếu được dùng để biến nạp là phôi non Isida et al. 2007 luôn bị hạn chế bởi mùa vụ. Đe khắc phục các tác giả đã tìm cách tạo mô sẹo từ những nguồn khác nhau như lá hạt già và cây con Sidorov et al. 2006 Ahmadabadi et al. 2007 hay chuyển gen trực tiếp vào chồi đỉnh. Tuy nhiên tất cả các phương pháp này đều đỏi hỏi những thao tác nuôi cấy mô với thời gian và chi phí cao. Hơn nữa các cây ngô thu được sau nuôi cấy mô thường bị dị dạng và có thời gian phun râu tung phấn lệch nhau.