TAILIEUCHUNG - Nghiên cứu phát triển hệ thống sắc kí miễn dịch cạnh tranh phát hiện nhanh các độc tố ruột tụ cầu trong sữa

Trong nghiên cứu này, các tác giả nghiên cứu chế tạo que thử phát hiện nhanh đồng thời năm loại độc tố ruột tụ cầu thường gặp là SEA, SEB, SEC1, SED và SEE trong sữa dựa trên kỹ thuật sắc ký miễn dịch cạnh tranh sử dụng kháng thể đa dòng IgY do chúng tôi tự sản xuất. Ưu điểm cơ bản của kháng thể IgY so với IgG là có thể sản xuất với liều lượng lớn, giá thành rẻ và đặc biệt là không có phản ứng với protein A | Tạp chí Khoa học ĐHQGHN Khoa học Tự nhiên và Công nghệ Tập 31 Số 1 2015 23-31 Nghiên cứu phát triển hệ thống sắc kí miễn dịch cạnh tranh phát hiện nhanh các độc tố ruột tụ cầu trong sữa Trần Thị Sao Mai1 Nguyễn Thị Khánh Trâm2 Lê Quang Hòa3 1Trường Đại học Kỹ thuật Y tế Hải Dương 2Viện Dinh dưỡng Quốc gia 3 Viện Công Nghệ Sinh học và Công Nghệ Thực Phẩm Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội Nhận ngày 8 tháng 01 năm 2015 Chỉnh sửa ngày 22 tháng 01 năm 2015 Chấp nhận đăng ngày 20 tháng 3 năm 2015 Tóm tắt Các độc tố ruột của tụ cầu là một trong những nguyên nhân chủ yếu gây ngộ độc thực phẩm trên thế giới. Mục tiêu của nghiên cứu này là tạo que thử phát hiện nhanh và đồng thời các độc tố ruột tụ cầu thường gặp bao gồm SEA SEB SEC1 SED và SEE trong sữa dựa vào kỹ thuật sắc ký miễn dịch cạnh tranh. Để đạt mục tiêu này độc tố ruột tụ cầu SEC1 được sản xuất và tinh sạch bằng con đường tái tổ hợp và sau đó được cố định lên hạt nano cac bon để tạo cộng hợp phát hiện. Bên cạnh đó kháng thể đa dòng IgY kháng các độc tố ruột tụ cầu SEA SEB SEC1 SED và SEE và IgY kháng Bovine serum albumin BSA cũng được tạo ra và tinh sạch trước khi được in lên vạch thử nghiệm và vạch kiểm chứng của que thử sắc ký miễn dịch cạnh tranh. Các kết quả nghiên cứu về việc sản xuất SEC1 trong tế bào Escherichia coli BL21 đã chỉ ra rằng điều kiện thích hợp để thu nhận độc tố này là nuôi lắc 150 vòng phút ở 30oC nồng độ chất cảm ứng isopropyl P-D-1-thiogalactopyranoside IPTG là 0 5 mM thời gian cảm ứng là 8 giờ. Các thông số thích hợp để tạo que thử cũng đã được xác định là lượng kháng thể IgY kháng các độc tố ruột tụ cầu SEA SEB SEC1 SED và SEE cần cố định tại vạch thử nghiệm là 0 6 pg que thử có độ rộng 4 mm lượng kháng nguyên cộng hợp cần sử dụng là 2 pl. Ngưỡng phát hiện của que thử đối với các độc tố SEA SEB và SED trong sữa là 30 ng ml đối với SEC1 và SEE là 9 ng ml. Toàn bộ thời gian phân tích diễn ra trong 30 phút. Từ khóa Độc tố ruột tụ cầu kỹ thuật sắc ký miễn dịch sữa que thử. 1. Đặt vấn đề Nguyên

• Sinh học
• Hệ thống sắc kí miễn dịch
• Độc tố ruột tụ cầu
• Kỹ thuật sắc ký miễn dịch
• Ngộ độc thực phẩm
• Kháng thể IgY
• Tinh sạch protein
• Tạp chí khoa học
• Công nghệ sinh học
• Khoa học tự nhiên
• Độc tố ruột tụ cầu trong sữa
• Bài giảng Chế phẩm protein
• Định lượng chế phẩm protein
• Đánh giá chế phẩm protein
• Độ tinh sạch của chế phẩm protein
• Xác định hàm lượng protein
• Tính đồng thể của protein
• Tạo dòng protein tái tổ hợp FliC
• Biểu hiện protein tái tổ hợp FliC
• Tinh sạch protein tái tổ hợp FliC
• Protein flagellin FliC
• Bỗ trợ miễn dịch
• Biểu hiện protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin
• Tinh sạch protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin
• Protein tái tổ hợp
• Nội độc tố
• Tạo dòng protein tái tổ hợp tPMT C780
• Protein tái tổ hợp tPMT C780
• Tinh sạch protein tái tổ hợp tPMT C780
• Vi khuẩn Pasteurella multocida
• Bệnh tụ huyết trùng lợn
• Tinh sạch Peptid
• Khả năng thấm qua màng
• Ứng dụng trong protein trị liệu
• Protein trị liệu
• Tạp chí Công nghệ Sinh học
• Bài viết về sinh học
• Nồng độ gây chết 50%
• Protein tinh thể
• Vector biểu hiện
• Bài giảng Sắc ký sinh học
• Sắc ký sinh học tinh sạch Protein
• Sắc ký sinh học
• Sử dụng sắc ký sinh học tinh sạch
• Phương pháp sắc ký thông dụng
• Phương pháp sắc ký
• acid amin
• chức năng sinh hóa
• chiếu xạ tia X
• quá trình tinh sạch
• Thu nhận protein
• Phân tách protein
• điện di
• Biểu hiện tổ hợp NLI IF
• Tái tổ hợp NLI IF
• Tế bào Escherichia coli
• Biểu hiện tạm thời
• Nicotiana benthamiana
• Protein M
• Cấu trúc vetor chuyển gen thực vật
• Pasteurella multocida
• Vacxin tái tổ hợp
• Vi khuẩn Escherichia coli BL21
• Mã hóa trình tự axit amin
• Đồ án tốt nghiệp đại học
• Quá trình tách chiết protein
• Quá trình tinh sạch protein
• Rong bún Enteromorpha spp
• Công nghiệp thức ăn gia súc
• Luận văn Thạc sĩ Khoa học
• Di truyền học
• Tinh sạch protein p53
• Protein p53 tái tổ hợp
• Nấm men Pichia pastoris X33 36
• Tế bào ung thư
• Công nghệ protein Chương 3
• Công nghệ protein
• Phương pháp tinh sạch protein
• Phương pháp sắc ký trao đổi ion
• Phương pháp dùng chất hấp phụ đặc hiệu
• Bài thuyết trình sinh học
• Các phương pháp sắc kí cột
• Sự tinh sạch của protein
• đặc điểm phương pháp sắc ký
• Nghiên cứu tách dòng
• Biểu hiện tách dòng
• Tinh sạch protein ABO3
• Cây Arabidopsis thaliana
• Vi khuẩn Escherichia coli
• Ion kim loại
• Giá thể sắc ký ái lực
• Vật liệu giá thể
• Tái tổ hợp gắn His tag
• salting out
• salting in
• ion muối
• độ hòa tan
• nồng độ muối
• protein tinh sạch
• tiến hóa
• cấu trúc bậc 4
• tế bào
• Sự tinh sạch
• phương pháp thí nghiệm
• thí nghiệm sinh học