TAILIEUCHUNG - Tách và thu nhận gen

Tách và thu nhận gen Ngày nay, người ta có thể thu nhận gen để thực hiện kỹ thuật di truyền bằng ba phương pháp: tách các đoạn DNA từ bộ gen; tổng hợp gen bằng phương pháp hoá học; sinh tổng hợp từ mRNA. 1. Tách các đoạn DNA từ bộ gen Đây là phương pháp sử dụng rộng rãi ngay từ buổi đầu tiên của sự phát triển kỹ thuật DNA tái tổ hợp. | Tách và thu nhận gen Ngày nay người ta có thể thu nhận gen để thực hiện kỹ thuật di truyền bằng ba phương pháp tách các đoạn DNA từ bộ gen tổng hợp gen bằng phương pháp hoá học sinh tổng hợp từ mRNA. 1. Tách các đoạn DNA từ bộ gen Đây là phương pháp sử dụng rộng rãi ngay từ buổi đầu tiên của sự phát triển kỹ thuật DNA tái tổ hợp. Toàn bộ phân tử DNA của một sinh vật được cắt nhỏ thành những đoạn có kích thước 1 5 2kb bằng restriction enzyme RE . Điện di hoặc sắc kí để tách đoạn DNA tinh khiết sau đó gắn vào vector chuyển gen tạo plasmid DNA tái tổ hợp. Nhược điểm là tốn nhiều công sức và thời gian nhưng ngày nay người ta vẫn sử dụng để tạo ngân hàng DNA bộ gen genonic DNA libraries . 2. Sự tổng hợp gen bằng phương pháp hoá học Năm 1969 gen nhân tạo đầu tiên được tổng hợp do nhóm nghiên cứu Khorama đó là gen mã hoá tổng hợp tRNA vận chuyển amino axit alamin ở nấm men gồm 77 cặp nucleotide. Gen đầu tiên không được biểu hiện vì không có các trình tự điều hoà. Về sau chính nhóm này đã tổng hợp được gen có hoạt tính đó là gen mã hóa cho chất ức chế tRNA vận chuyển tyrosine ở E. Coli có chiều dài khoảng 200 cặp nucleotide. Vào năm 1977 K. Itakura và Boyer đã tổng hợp được gen mã hóa sinh tổng hợp hormone somatostatin của động vật có vú được biểu hiện ở E. Coli. và từ đó nòi E. Coli mang gen tổng hợp hóa học được tạo ra. Sau này người ta tổng hợp hóa học gen mã hóa hormone tăng trưởng của người dài 584pb. Phương pháp tổng hợp hóa học gen cũng được sử dụng để tạo ra nòi vi khuẩn tổng hợp insulin một loại hormone chữa bệnh tiểu đường cho người. Gen insuline được tổng hợp từ hơn 40 đoạn oligonucleotide khác nhau sau đó được nối lại nhờ enzyme lygase để tạo ra hai chuỗi polynucleotide dài 271 và 286bp mã hóa tổng polypeptide A có 21 aminoaxit polypeptide B có 30 aminoaxit. Qua các kết quả thu được các nhà khoa học đã khẳng định rằng muốn tổng hợp được gen bằng phương pháp hoá học cần phải biết trình tự của axit amin ở protein mà gen đó chịu trách nhiệm tổng hợp. 3. Sinh tổng

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.