TAILIEUCHUNG - bài giảng công nghệ sinh học đại cương 1 phần 3

Một số phương pháp đưa DNA tái tổ hợp vào tế bào chủ Hóa biến nạp Hiện tượng biến nạp là chìa khóa giúp ta hiểu biết cơ sở phân tử của gen, cũng là công cụ để thực hiện các thao tác tạo tính di truyền của vật sống. Theo Mandel và Higa cho thấy rằng, E. Coli trở nên rất dễ bị biến nạp bởi DNA ngoại lai khi các tế bào vi khuẩn được xử lí trong môi trường có CaCl2 và trước đó. | G_CCC CCTAGGGGG I GGGGGATCC itttttìCCC G DNA lạ Hình 2-6 Cách tạo DNA tái tô hợp dùng enzyme terminal transferase Một số phương pháp đưa DNA tái tổ hợp vào tế bào chủ Hóa biến nạp Hiện tượng biến nạp là chìa khóa giúp ta hiểu biết cơ sở phân tử của gen cũng là công cụ để thực hiện các thao tác tạo tính di truyền của vật sống. Theo Mandel và Higa cho thấy rằng E. Coli trở nên rất dễ bị biến nạp bởi DNA ngoại lai khi các tế bào vi khuẩn được xử lí trong môi trường có CaCl2 và trước đó được sốc nhiệt ở 42 C. Hóa biến nạp là phương pháp sử dụng chất hóa học tạo điều kiện để đưa vector tái tổ hợp vào tế bào chủ. Quá trình được thực hiện theo hai buớc sau Xử lí tế bào chủ trong dung dịch CaCl2 ở nhiệt độ thấp nhằm để thay đổi màng tế bào và ủ vector tái tổ hợp với tế bào chủ đã xử lí. Hiệu suất của phương pháp hóa biến nạp này vào khoảng 105 đến 106 tế bào biến nạp trên 1mg DNA tái tổ hợp. Qua các kết quả thực nghiệm người ta thấy rằng các tế bào phát triển ở pha sớm đến pha giữa dễ được biến nạp hơn. Những nghiên cứu sau này cho thấy việc xử lí tế bào bằng các ion kim loại hóa trị hai như Mg 2 Mn 2 và Ba 2 cũng cho khả năng biến nạp lớn. Ngoài ra hiệu suất biến nạp còn phụ thuộc vào kích thước của plasmid plasmid càng nhỏ thì hiệu suất biến nạp càng cao. Điện biến nạp Nguyên tắc Sử dụng dòng điện cao thế cục bộ theo xung để tạo lỗ nhỏ trên màng sinh học của tế bào tạo điều kiện cho tế bào hấp thụ DNA tái tổ hợp được dễ dàng. Hiệu suất Từ 109 đến 1010 tế bào biến nạp cho 1mg DNA tái tổ hợp tuy nhiên lượng tế bào biến nạp bị chết nhiều có khi lên tới 70 . Hiệu suất của phương pháp này phụ thuộc vào các yếu tố sau - Độ mạnh của điện trường tác động khác nhau đối với các loại tế bào khác nhau - Độ dài của hằng số thời gian thời gian ngắt xung - ms . Theo nhiều nghiên cứu hầu hết đối với các loại tế bào sinh vật hiệu quả biến nạp cao khi hằng số thời gian đạt được khoảng 6ms - Nồng độ tế bào chủ - Nồng độ DNA tái tổ hợp - Giai đoạn phát triển của tế bào

• Sinh học
• công nghệ sinh học
• giáo trình công nghệ sinh học
• các tế bào sống
• vi sinh vật
• phương pháp đưa DNA
• Bài giảng Công nghệ sinh học
• Ứng dụng của công nghệ sinh học
• Phương pháp công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học động vật
• Công nghệ sinh học người
• Công nghệ sinh học y sinh
• Sinh học phân tử
• Sinh học tế bào
• Vai trò của công nghệ sinh học
• Sự phát triển của sinh học phân tử
• Cơ sở của công nghệ sinh học
• Tài liệu Công nghệ sinh học
• Nhập môn công nghệ Sinh học
• Công nghệ sinh học phân tử
• Công nghệ sinh học vi sinh vật
• Công nghệ sinh học thực vật
• Công nghệ sinh học môi trường
• Bài giảng Công nghệ sinh học môi trường
• Công nghệ sinh học môi trường chương 7
• Công nghệ sinh học trong nông nghiệp
• Khoa học tự nhiên
• Đề cương môn học
• Định nghĩa công nghệ sinh học
• Lịch sử công nghệ sinh học
• Kinh tế công nghệ sinh học
• Pháp lý công nghệ sinh học
• Công nghệ sinh học y tế
• Công nghệ sinh học nông nghiệp
• Đề cương Công nghệ sinh học
• Ôn tập Công nghệ sinh học
• Ôn thi Công nghệ sinh học
• Bài tập Công nghệ sinh học
• Kiến thức Công nghệ sinh học
• Chẩn đoán phân tử
• công nghệ thực phẩm
• phản ứng khuếch đại gen
• nghiên cứu Công nghệ sinh học
• thiết bị công nghệ sinh học
• sinh học
• Công nghệ sinh học môi trường chương 5
• Chất đốt sinh học
• Năng lượng và chất đốt sinh học
• Sinh học môi trường
• Công nghệ sinh học môi trường chương 3
• Công nghệ sạch
• Chất thải sinh hoạt
• Bài giảng Công nghệ sinh học thực phẩm
• Công nghệ sinh học thực phẩm
• Tài liệu Công nghệ sinh học thực phẩm
• Tìm hiểu công nghệ sinh học thực phẩm