TAILIEUCHUNG - Luận văn : XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH DANH VI KHUẨN GÂY BỆNH LOÉT TRÊN CÂY BƯỞI BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ part 3

Bảng . Hỗn hợp thực hiện phản ứng PCR. Thành phần PCR buffer dNTPs MgCl2 Primer Taq polymera se DNA H2 O Tổng cộng Bảng . Chu trình nhiệt phản ứng PCR Các bƣớc phản ứng Giai đoạn khởi động Chạy chu kỳ (25 chu kỳ) Tách DNA khuôn Ủ và bắt cặp Kéo dài Giai đoạn kết thúc Nhiệt độ 94oC 94oC 60oC 72oC 72oC Thời gian 5 phút 15giây 30giây 30giây 7phút Nồng độ ban đầu 10X 25mM 25 mM 100pM 5unit/1µl | 23 chính xác 4 dòng phân lập được là Xanthomonas axonopodis . theo Dong Suk Park và ctv 2005 . XACF 5 CGTCGCAATACGATTGGAAC 3 XACR 5 CGGAGGCATTGTCGAAGGAA 3 Bảng . Hỗn hợp thực hiện phản ứng PCR. Thành phần Nồng độ ban đầu Nồng độ sau phản ứng Thể tích pl PCR buffer 10X 1X 2 5 dNTPs 25mM 0 2mM 0 2 MgCl2 25 mM 1 5mM 1 5 Primer 100pM 10pM 0 25 Taq polymera se 5unit 1pl 2unit 1pl 0 4 DNA 100ng 50ng 1 H2O 19 25 Tổng cộng 25 Bảng . Chu trình nhiệt phản ứng PCR Các bước phản ứng Nhiệt độ Thời gian Giai đoạn khởi động 94oC 5 phút Chạy chu kỳ 25 chu kỳ Tách DNA khuôn 94oC 15giây Ủ và bắt cặp 60oC 30giây Kéo dài 72oC 30giây Giai đoạn kết thúc 72oC 7phút . Điện di kiểm tra sản phẩm ly trích và sản phẩm PCR Dụng cụ và thiết bị - Cân kĩ thuật 4 số ống đong - Lò viba - Khay đổ gel - Bồn và máy điện di Hóa chất - Agarose - TAE 0 5X - Loading dye 6X - Ethidium bromide - Máy chụp hình gel Gel doc 24 Bảng . Thành phần dung dịch TAE 50X Thành phần Thể tích 1 lít Tris base 2M 242 g Glacial acetic acid 57 1 ml EDTA 0 5 M pH 100 ml Quy trình thực hiện 1. Chuẩn bị gel agarose để điện di DNA - Chuẩn bị dung dịch TAE 1X cho dung dịch TAE 1X vào hộp điện di. - Pha dung dịch agarose 0 8 gồm agarose và dung dịch TAE 1X. - Đun sôi dung dịch agarose trên lò viba đến khi agarose tan hoàn toàn. Nếu quá trình đun mất nhiều nước thì cần bổ dung thêm dung dịch TAE 1X cho đủ nồng độ yêu cầu. - Để lên máy lắc cho dung dịch tan đều. Đợi đến khi nhiệt độ dung dịch agarose xuống còn 550C thì đổ vào khai điện di có cài sẳn lược. Chiều dày gel khoảng 5 mm là thích hợp. - Sau khi gel cứng di chuyển lược ra khỏi gel và đặt khai vào bể điện di chứa TAE 1X sau cho gel ngập trong dung dịch. Chú ý nhẹ tay tránh bọt khí. 2. Tiến hành chạy điện di -Lấy một mẫu giấy parafilm nhỏ những giọt loading buffer lên mỗi giọt có thể tích khoảng 2 pl . Cho thêm 5 il DNA lên mỗi giọt loading buffer và trộn đều. Dùng pipetman hút hỗn hợp DNA cho vào giếng của khai điện di. -Đậy nắp gel và cho chạy điện

• Nông - Lâm - Ngư
• cách làm luận văn
• cách trình bày luận văn
• hướng dẫn làm luận văn
• luận văn ngành công nghệ sinh học
• phòng bệnh cho cây bưởi
• Cách làm bài tập làm văn nghị luận
• Bài tập làm văn nghị luận
• Văn nghị luận
• Bài tập thực hành làm bài văn nghị luận
• Bài tập làm văn
• Đề văn nghị luận mẫu
• Lập dàn ý văn nghị luận
• Tìm hiểu đề văn nghị luận
• Nghị luận xã hội
• tóm tắt luận văn
• cách trích dẫn
• mẫu bìa luận văn
• hướng dẫn quy cách
• mẹo làm luận văn
• luận văn
• nghiên cứu khoa học
• Hướng dẫn cách viết luận văn khoa học
• cách viết luận văn
• kinh nghiệm viết luận văn
• luận văn khoa học
• tài liệu luận văn
• giáo trình luận văn
• bí quyết làm luận văn
• phương pháp làm luận văn
• Giải pháp tạo việc làm
• việc làm cho nông dân
• kỹ năng làm luận văn
• cách làm báo cáo tốt nghiệp
• báo cáo ngành kinh tế nông nghiệp
• luận văn thạc sĩ kinh tế
• luận văn ngành nông nghiệp
• luận văn ngành phát triển nông thôn
• cách làm luận văn luận văn ngành phát triển nông thôn
• chất kháng nguyên
• môi trường nuôi cấy sinh vật
• Giáo án Ngữ văn 11 tuần 5
• Giáo án điện tử Ngữ văn 11
• Giáo án điện tử lớp 11
• Giáo án lớp 11 môn Ngữ văn
• Viết bài làm văn số 2
• Nghị luận văn học
• Cách làm bài văn nghị luận
• Kỹ năng làm báo cáo
• cách làm báo cáo
• luận văn mẫu
• “Giáo dục truyền thống cách mạng
• truyền thống Đoàn Đội
• Cách làm báo cáo khoa học
• Trình bày văn bản
• Cách làm tiểu luận
• Hình thức trình bày luận văn
• Hình thức trình bày đồ án